Системный подход к банкированию пуповинной крови для восстановительной медицины

• Автор: Яковлева, Мария Валерьевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Организация банков пуповинной крови ^

1.2. Методы сбора пуповинной крови ^

1.3. Транспортировка, обработка, замораживание и 21 криохранение пуповинной крови

1.4. Характеристика пуповинной крови ^

1.5. Факторы, влияющие на состав пуповинной крови ^

1.6. Спонтанный апоптоз и некроз клеток крови ^

1.7. HLA - типирование пуповинной крови и современные 42 представления о главном комплексе гистосовместимости
1.8. Взаимосвязь МНС с лейкозами ^
1.9. Взаимосвязь МНС с глютенчувствительной целиакией ^
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Глава 3. ОСОБЕННОСТИ КЛЕТОЧНОГО СОСТАВА ПУПОВИННОЙ
КРОВИ
3.1. Влияние анте- и интранатальных факторов на качественные 75 и количественные характеристики клеток.пуповинной крови
3.2. Особенности течения беременности, родов, 111 антропометрических данных, пола новорожденного и срока гестации, влияющие на количество CD34+ клеток пуповинной крови доношенных новорожденных
3.3. Влияние различных состояний острой и хронической 124 гипоксии плода на клеточный состав пуповинной крови доношенных новорожденных
3.4. Ручной и автоматический подсчет клеток ПК
3.5. Оценка определения морфологического состава пуповинной 140 крови
3.6. Иммунологическая характеристика клеточного состава 141 пуповинной крови
3.7. Анализ субпопуляций CD34+клеток и CD133+клеток ПК
3.8. Колониеобразующая активность пуповинной крови
3.9. Уровень спонтанного апоптоза и некроза клеток пуповинной 153 крови
ЗЛО. Оценка нормобластов пуповинной крови
3.11. Оценка клеточного состава пуповинной крови в
зависимости от пола и массы тела доношенных новорожденных

Глава 4. ВЛИЯНИЕ ТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА НА
БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ПУПОВИННОЙ КРОВИ 4Л. Эффективность методов автоматического выделения клеток
(МАВК) и двойного центрифугирования (МДЦ) при проведении процедуры лейкоконцентрации ПК
4.2. Процедура лейкоконцентрации клеточного состава ПК
4.3. Прогнозирование эффективности процедуры 198 лейкоконцентрации ПК
Глава 5. ОПТИМИЗАЦИЯ ВЫСОКОТЕХНОЛОГИЧНЫХ МЕТОДОВ
БАНКИРОВАНИЯ ПУПОВИННОЙ КРОВИ И ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ
5.1. Исследование генетического полиморфизма системы HLA 214 пуповинной крови московского региона
5.2. Оптимизация исследования генетического полиморфизма 220 системы HLA периферической крови при заболеваниях
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ГСК - гемопоэгические стволовые клетки
ГЦ — глютенчувствительная целиакия
KOE-mix — колониеобразующая единица смешанная
КОЕ-Г - колониеобразующая единица гранулоцитарная
КОЕ-ГМ — колониеобразующая единица гранулоцитарно-макрофагальная
КОЕ-М - колониеобразугощая единица макрофагальная
КОЕ-Э - колониеобразующая единица эритроцитарная
ОЛЛ - острый лимфобластный лейкоз.
ОМЛ - острый миелобластный лейкоз.
ПК — пуповинная кровь
ПП - пролиферативный потенциал.
BAS — (basophile) количество базофилов крови (х109/л)
CD - (clasters of differentiations) кластер дифференцировки
EF - этиологическая фракция
EOS - (eosinophile) количество зозинофилов крови (х109/л)
f — частота встречаемости специфичности
НСТ - (hematocrit) гематокрит
HES 200 - 6% гидроксиэтилкрахмал с молекулярной массой 200 ООО дальтон
HGB — (hemoglobin) концентрация гемоглобина (г/л)
HLA - человеческие лейкоцитарные антигены (Human leukocyte antigen)
LFA — leukocyte function-associated molecule.
LYM - (lymphocyte) количество лимфоцитов крови (xl 09/л)
MCH - (mean corpuscular hemoglobin) среднее содержание гемоглобина в
эритроцитах
MCFIC - ( mean corpuscular hemoglobin concentration) средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах (г/л)
MCV - (mean corpuscular volume) средний объем эритроцитов
(фл/фемтолитры)
MNC - (mononuclear cells) мононуклеарные клетки
MON - (monocyte) количество моноцитов крови (х109/л)
MPV - (mean platelet volume) средний объем тромбоцитов (фл/фемтолитры)
NEU — (ncutrophile) нейтрофилы
NK - (natural killer) натуральные киллеры
NOD/SCID - тяжелая комбинированная иммунная недостаточность
NRBC — (nuclear red blood cell) нормобласты (/100 лейкоцитов)
OR - (odds ratio) однофакторное отношение шансов
РСТ - (platelet crit) тромбокрит (%), отражает долю объема цельной крови,
занимаемой тромбоцитами PDW - (platelet distribution width) ширина распределения тромбоцитов по
объему, характеризует степень анизоцитоза (%)
PF — превентивная фракция
PLT - (platelet) количество тромбоцитов
RBC — (red blood cells) количество эритроцитов крови (х10|2/л)

тромбоцитопения, составила 2,1%, а в группе новорожденных, у матерей которых тромбоцитопении не выявлено, составила 2,0% [213].
Гематологические взаимоотношения между матерью и. плодом сложны и изучены недостаточно. Хотя обе циркуляторные системы отделены друг от друга, определенное количество клеток крови способно перемещаться из одной сосудистой системы в другую, вызывая различные иммунологические изменения. Некоторые инфекционные агенты и лекарства, циркулирующие в кровотоке матери, как правило, также получают доступ к циркуляции у плода и вызывают характерные гематологические изменения у плода и новорожденного. Более того, различные заболевания матери могут воздействовать на гематологический статус плода и новорожденного. Несмотря на существующий барьер для миграции клеток, эритроциты, лейкоциты и даже тромбоциты плода часто находят в кровообращении матери, причем фето-материнские трансфузии развиваются более чем в 50% всех беременностей [12]. Перемещение существенных объемов крови дает начало анемии или полицитемии плода, в зависимости от направления перехода. Оккультные кровотечения могут наблюдаться не только от плода к матери, но и от одного близнеца к другому при многоплодной беременности, приводя к анемиям. Кровь матери является для плода единственным источником железа. Транспорт железа через плаценту — активный процесс, осуществляется против градиента концентрации и возможен только в одном направлении - от беременной к плоду. [41,143,179,217]. При физиологическом течении беременности и родов доношенный новорожденный получает 250-300 мг железа, что соответствует 70 - 75 мг/кг массы тела [20], из которых только 25 мг храниться в депо - в печени. Максимальное накопление железа у плода происходит в последние 3 месяца внутриутробной жизни, поэтому недоношенность в 4 — 8 недель может привести к сокращению запасов железа в 1,5 -3 раза по сравнению с доношенными [30,254]. Патологическое течение беременности, сопровождающееся нарушением маточно-плацентарного кровотока и плацентарной недостаточностью, приводит к уменьшению поступления железа в организм плода [29]. С широким распространением автоматических анализаторов в медицинской практике появилось много работ [3,23,25], посвященных взаимосвязи показателей эритрона с уровнем обмена железа. Разработаны скрининговые программы для дифференциальной диагностики анемии с дефицитным эритропоэзом [22,23]. По