МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ В ДИАГНОСТИКЕ, ПАТОГЕНЕЗЕ И ПРОГНОЗЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

• Автор: Казаков, Сергей Петрович
• Шифр специальности: 14.03.10
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 310 с. : 22 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О МЕХАНИЗМАХ

НАРУШЕНИЯ ИММУННОЙ И ЦИТОКИНОВОЙ СИСТЕМ, ОСНОВНЫХ МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИХ И ГЕНЕТИЧЕСКИХ МАРКЕРАХ, РЕГУЛИРУЮЩИХ АПОПТОЗ И ПРОЛИФЕРАЦИЮ, НЕКОТОРЫХ КОМПОНЕНТАХ ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ У БОЛЬНЫХ С ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ (обзор
литературы)
1.1. Механизмы иммунопатогенеза при опухолевом канцерогенезе у больных с онкологическими и аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы
1.2. Оценка уровней экспрессии тканевых маркеров апоптоза и пролиферации, сериновых протеаз и их ингибиторов в норме при солидных опухолях и аутоиммунных заболеваниях щитовидной железы
1.2.1. Оценка маркеров пролиферации и апоптоза при канцерогенезе у больных с онкологическими и аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы
1.2.2. Роль сериновых протеаз в формировании неоангиогене-за, инвазии и метастазирования опухолей щитовидной железы
1.3. Молекулярно-биологические генные дефекты и мутации при опухолях и заболеваниях щитовидной железы
ГЛАВА 2. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МАТЕРИАЛОВ И МЕТОДОВ
ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика материала клинических исследований
2.2. Методы исследования
2.2.1. Получение и хранение тканей и плазмы крови
2.2.2. Метод проточной цитометрии
2.2.3. Оценка поверхностных рецепторов субпопуляций периферических лейкоцитов, маркеров апоптоза и пролиферации
2.2.4. Методы оценки цитокинов и соотношений (индексов) цитокинов в крови больных
2.2.5. Подготовка материала для исследования поверхностных рецепторов субпопуляций клеток крови и клеточной суспензии, полученной из тканей щитовидной железы
2.2.6. Методы оценки внутриклеточных маркеров апоптоза и пролиферации
2.3. Иммунохимические и молекулярно-биологические методы исследования в тканях (цитозолях, парафиновых блоках) щитовидной железы
2.3.1. Подготовка глубокозамороженной ткани щитовидной железы для исследования белков, регулирующих апоптоз
и пролиферацию
2.3.2. Подготовка цитозолей из тканей щитовидной железы для исследования компонентов системы активации плазминогена
2.3.3. Подготовка парафиновых блоков для проведения молекулярно-генетических исследований
2.4. Методы исследования тканей щитовидной железы
2.4.1. Определение маркеров, регулирующих апоптоз и пролиферацию в свежезамороженных образцах
2.4.2. Определение содержания иРА, РА1-1 и 1РА в цитозолях

тканей щитовидной железы
2.4.3. Метод полимеразной цепной реакции для оценки мутаций онкогена р53 в парафиновых блоках

2.4.3.1. Подготовка материала для проведения полимеразной цепной реакции
2.4.3.2. Амплификация выделенного материала
2.4.3.3. Детекция продуктов амплификации
2.5. Оценка некоторых гормональных и иммунологических показателей у больных с заболеваниями щитовидной железы
2.6. Статистический анализ данных
ГЛАВА 3. ИЗМЕНЕНИЯ НЕКОТОРЫХ ПАРАМЕТРОВ ИММУННОЙ
СИСТЕМЫ, МЕМБРАННЫХ БЕЛКОВ АПОПТОЗА В КРОВИ БОЛЬНЫХ С ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ (ПРОТОЧНАЯ ЦИТОМЕТРИЯ)
3.1. Оценка уровней клеточного и гуморального иммунитета у больных с аутоиммунными заболеваниями, злокачественными и доброкачественными опухолями щитовидной железы
3.2. Оценка функциональных и аутоиммунных свойств у больных с аутоиммунной патологией, злокачественными и доброкачественными опухолями щитовидной железы
3.3. Сравнительная количественная оценка уровней некоторых цитокинов и их соотношений в плазме крови больных с аутоиммунными заболеваниями, доброкачественными и злокачественными опухолями щитовидной железы
3.4. Исследование БАБ-Ь на основных субпопуляциях лимфоцитов и оценка диагностической эффективности этого белка у больных раком щитовидной железы
ГЛАВА 4. ОЦЕНКА МАРКЕРОВ, РЕГУЛИРУЮЩИХ АПОПТОЗ, ПРОЛИФЕРАЦИЮ (ПРОТОЧНАЯ ЦИТОМЕТРИЯ), И УРОВНЯ СЕРИНОВЫХ ПРОТЕАЗ В НОРМАЛЬНЫХ И ПАТОЛОГИЧЕСКИХ ТКАНЯХ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
рующей клеткой и активировать Т-хелперы и Т-цитотоксические лимфоциты и, возможно, другие цитотоксические клетки. Поэтому на поверхности В-лимфоцита в значительном количестве присутствуют антигены НЛА-ПЛ — главного комплекса гистосовместимости человека 2-го класса, т. е. те, которые отличают иммунокомпетентные клетки от всех клеток органов и тканей организма. У больных с АИЗЩЖ, спорадическим многоузловым зобом количество В-лимфоцитов было статистически достоверно выше по сравнению с здоровыми пациентами контрольной группы [150, 159], в особенности если иммунный ответ проходил по ТЪ-2-механизму.
Опухольспецифичные антитела, вырабатываемые В-лимфоцитами, могут также связываться с антигенами опухоли для более точного указания цитогоксическим клеткам месторасположения и усиления активационных механизмов иммунной системы. Но опухолевая клетка имеет интересную особенность: она может терять свои поверхностные антигены, как ящерица отбрасывает хвост, когда за него ее поймают.
Образующиеся противоопухолевые антитела и циркулирующие иммунные комплексы усугубляют развитие болезни, вызывая аутоиммунные процессы в пораженных опухолевой трансформацией тканях организма. С другой стороны, они блокируют антигены опухолевых клеток и рецепторы цитотоксических Т-лимфоцитов, защищая трансформированную клетку от цитолитического удара.
Оценка количественного состава различных групп клеток иммунной системы, отвечающих за противоопухолевый иммунитет, позволяет говорить о состоянии иммунной системы при различных патологических процессах -опухолевой прогрессии, ее доброкачественности, степени озлокачествления аутоиммунных заболеваниях. При этом о количественном составе клеток судят не в относительных процентных единицах, а в абсолютных показателях, так как это говорит о более качественном анализе параметров иммунной системы. Однако показатели количественного субпопуляционного состава основных групп клеток иммунной системы являются очень стабильными,