Фармакологическая модуляция сигнальной функции Na+, K+-ATФазы

• Автор: Лопатина, Екатерина Валентиновна
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 175 с. : 29 ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

Ыа+,К -АТФаза - натрий калиевая АТФаза

1.8-канал — медленный натриевый тетродотоксинрезистентный канал Zt.ff - эффективный заряд физическая величина, выраженная в зарядах электрона

ИП - индекс площади

СС - самостимуляция

ПТТ - противотуберкулезная терапия

СТ - стекловидное тело

ТГ - туберкулез глаз

ТХ - туберкулезный хориоретинит

ПЭ - пигментный эпителий

т - самцы
£ - самки
(1 - диаметр очага
Ь - уровень проминенции
е - степень экссудации
ДЗН - диск зрительного нерва
ЦНС - центральная нервная система
ЭКГ - электрокардиограмма
ЛД5о - половина летальной дозы
ЭД - эффективная доза
ТИ - терапевтический интервал
ЭКГ - электрокардиограмма
ВЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография ЭПР - эндоплазматический ретикулюм ЭФР - эпидермальный фактор роста АТФ — аденозинтрифосфорная кислота

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
I. ВВЕДЕНИЕ
II. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
2.1. Строение Иа+,К+-АТФазы
2.2. Электрогенная функция Na+, К+-АТФазы
2.3. Регуляция активности натриевой ионной помпы
2.4. Регуляция Na+, К+-АТФазы как трансдуктора сигнала
III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Метод локальной фиксации потенциала (patch-clamp)
3.2. Синтез коменовой кислоты
3.3. Метод органотипического культивирования ткани
3.3.1. «Цитологические» методы исследования
3.4. Приготовление лекарственной формы препарата «Аноцептин» (раствор для инъекций)
3.5. Тест «горячая пластина»
3.6. Формалиновый тест
3.7. Метод самостимуляции латерального гипоталамуса
3.8. Методика определения антимикробного действия препарата «Аноцептин» наМ tuberculosis
3.9. Методика моделирования туберкулезного очагового хориоретинита
3.9.1. Гистологические методы исследования тканей глазного яблока
3.10. Исследование острой токсичности препарата «Аноцептин» на грызунах
3.11. Исследование препарата «Аноцептин» при 90-дневном введении

3.11.1. Изучение эмбриотоксического действия препарата «Аноцептин»
3.11.2. Изучение влияния препарата «Аноцептин» на репродуктивную функцию
3.12. Методы исследования, используемые для оценки влияния препарата «Аноцептин» на рост трансплантируемых опухолей
3.13. Оценка пирогенности препарата «Аноцептин»
3.14. Материалы и методы, используемые при изучении фармакокинетики препарата «Аноцептин»
3.14.1. Методика оценки фармакокинетических показателей у здоровых
добровольцев. Анализ фармакокинетических данных
IV. РЕЗУЛЬТАТЫ
4.1. Исследование влияния оуабаина на потенциалочувствительность активационного воротного устройства медленных Nav1.8 -каналов сенсорных нейронов спинальных ганглиев млекопитающих
4.2. Сравнительный анализ действия сердечных гликозидов и коменовой кислоты . на рост эксплантатов различных тканей куриного эмбриона
4.2.1. Оценка действия сердечных гликозидов на рост эксплантатов ткани сердца куриного эмбриона
4.2.2. Оценка действия строфантина К и дигоксина на рост нейритов сенсорных нейронов спинальных ганглиев куриного эмбриона
4.2.3. Оценка действия сердечных гликозидов на рост эксплантатов ткани сетчатки куриного эмбриона
4.2.4. Исследование возможного механизма модуляции трансдукторной функции 1Ча+,Кн-АТФазы молекулой оуабаина
4.2.5. Исследование трофических свойств коменовой кислоты
4.3. Оценка обезболивающего действия препарата «Аноцептин» в условиях теста «горячая пластина»
4.4. Исследование свойств препарата «Аноцептин» и оуабаина в условиях формалинового теста
ферментов клеток мозга. Почти 50% кислорода потребляемого мозгом идет на энергообеспечение работы Na+,KАТ Фазы. Интерес к Ыа+,К+-АТФазе нейронов всегда был ничтожным (Aperia А., 2007). Хотя в настоящее время поиск специфических лигандов к Na+,K+-ATФазе нервных клеток и новая информация о роли фермента в ЦНС в норме и при развитии патологии сможет стать основой для создания принципиально новых лекарственных препаратов, действие которых связано с модуляцией сигнальной функции Иа+,К+-АТФазы.
С помощью patch-clamp метода на диссоциированных сенсорных нейронах спинальных ганглиев новорожденных крысят было проведено исследование кодирования ноцицептивного сигнала в системе опиоидоподобный рецептор - Ма+,К+-АТФаза - Nav1.8 канал (Крылов Б.В. и др., 1999). Оказалось, что не только наркотические аналгетики оказывают влияние на этот процесс. Эффективность гидрохлорида морфина (Крылов В. и др., 1999) была сопоставима с эффективностью производных гамма-пирона (в, частности, коменовой кислоты) (Derbenev A. et al., 2000). На фоне блокаторов G белков эффекты исследуемых соединений сохранялись (Крылов Б.В. и др., 1999; Derbenev A. et al., 2000). Приложение налтрексона или оуабаина к наружной стороне мембраны сенсорного нейрона устраняло влияние морфина и коменовой кислоты на эффективный заряд воротного устройства (TTXR) Nav1.8 канала (Крылов Б.В. и др., 1999; Derbenev A. et al., 2000). Приведенные выше наблюдения экспериментально доказали, что именно Иа+,К+-АТФаза, а не G белки, является траисдуктором при прохождении ноцицептивного сигнала от рецептора к медленному натриевому каналу (Крылов Б.В. и др., 1999; Derbenev A. et al., 2000). Основываясь на результатах экспериментов in vitro, логично предположить, что коменовая кислота, как одна из производных гамма-пирона, может быть перспективна в качестве аналгетика. Возможно, изменение функциональной активности №+,К+-АТФазы под действием производной гамма-пирона коменовой кислоты может вызывать эффект обезболивания in vivo.