Механизмы влияния гиперосмотических растворов препарата "Рапан" на процессы пролиферации и дифференцирования кератиноцитов in vitro"

• Автор: Зайцева, Наталья Сергеевна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 122 с. : ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ARE - антиоксидант-респонсивный элемент

CFSE - карбоксифлуоресцеин

DiOC6 - 3,3'-ДИгексилоксакарбоцианин йодид

DMSO - диметилсульфоксид

DHE - дигидроэтидий

МТТ - бромид 3-(диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил тетразолия

NAD(P)H - никотинамидадениндинуклеотидфосфат восстановленный

NADH - никотинамидадениндинуклеотидфосфат

PBS - фосфатно-солевой буфер

PI - йодид пропидия (Propidium iodide)
TGF - трансформирующий фактор роста
TMRM - тетраметилродамин (Tetramethylrhodamine)
АФК - активные формы кислорода ИФА - иммуноферментный анализ ГР - гиперосмотический раствор

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1Л. Применение гиперосмотических растворов для лечения хронических воспалительных заболеваний кожи
1.2. Клеточные модели и модели живого эквивалента кожи для изучения кератиноцитов in vitro
1.3. Клеточный цикл
1.3.1. Сигналинг клеточного цикла
1.3.2. Влияние гиперосмотического воздействия на клеточный
цикл
1.4. Апоптотическая гибель клеток при гиперосмотическом воздействии
1.5. Процесс дифференцирования кератиноцитов
1.5.1. Маркеры дифференцирования кератиноцитов
1.5.2. Процесс аутофагии в кератииоцитах
1.6. Цитоскелет клетки и его роль в реализации ответа на гиперосмотическое воздействие
1.7. Адаптация клеток к гиперосмотическому воздействию
1.8. Активные формы кислорода в клетке в физиологическом состоянии и при стрессе
1.9. Внутриклеточная сигнальная система Nrf2/Keap 1/ARE.
Участие в стресс-опосредованном ответе и дифференцировании
клеток
1.10. Роль транскрипционного фактора NF-кВ в клетке
1.11. Роль цитокинов в формировании эпидермиса
Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Глава 3. СОБСТВЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Исследование жизнеспособности клеток
3.2. Исследование апоптотической и некротической гибели клеток
после гиперосмотического воздействия
3.3. Исследование пролиферативной активности и клеточного

цикла кератиноцитов в ответ на гиперосмотическое воздействие
3.4. Исследование процессов дифференцирования кератиноцитов
3.5. Исследование особенностей продукции активных форм
кислорода кератиноцитами при гиперосмотическом воздействии
3.6. Исследование активации сигнальной системы №12/Кеар1/А11Е
в кератиноцитах при гиперосмотическом воздействии
3.7. Характеристика актинового и тубулинового цитоскелета кератиноцитов при гиперосмотическом воздействии
3.8. Исследование продукции цитокинов ИЛ-1(3, ИЛ-6, ФНО-а,
ИЛ-10 и активности транскрипционного фактора №-кВ в ответ
на гиперосмотическое воздействие
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ливает пролиферацию, свидетельствуя об осмопротективном действии этих веществ и активации описанных выше транспортных систем органических осмолитов [WarskuIatU.etal., 2004].
Кроме транспортных систем осмолитов в ответ на гиперосмотическое воздействие в клетках усиливается экспрессия определенных стресс-активируемых белков, таких как Gadd45 [Chakravarty D. et al., 2002; Tamura R.E. et al., 2012], p53 и различных белков теплового шока [Sheikh-Hamad D. et al., 1994]. Белки Gadd45 -многофункциональные молекулы, выполняющие важную роль в процессах дифференцирования клеток, апоптоза и репарации ДНК [Tamura R.E. et al., 2012].
Белок p53, играющий ключевую роль при прохождении точек контроля клеточного цикла и репарации ДНК, является самым известным опухолевым супрессором, но у него есть многочисленные дополнительные функции [Sullivan K.D. et al., 2012]. Накоплению и активации р53 способствует ДНК-повреждающие агенты. Известно, что гиперосмотический стресс является частой причиной повреждения ДНК. Поэтому в случае, если после такого повреждения репарации ДНК не происходит, активация р53 индуцирует апоптоз в клетке [Dmitrieva N. et al., 2000].
Белки теплового шока (Hsp) представлены группой высококонсервативных белков, которые экспрессируются конститутивно, либо могут индуцироваться стрессорами [Lanneau D. et al., 2010]. Конститутивная экспрессия Hsp обеспечивает упаковку белков и белковых комплексов, а также устранение неправильно упакованных белков, появление которых возможно при гиперосмотическом воздействии на клетки. Кроме того, работа Hsp предотвращает апоптоз посредством ингибирования JNK киназы и выхода цитохрома С из митохондрий, выполняя дополнительную защитную функцию в клетке [Mosser D.D. et al., 1997].
Развитие адаптивного ответа реализуется через активацию многочисленных механизмов, обеспечивающих выживание клетки в условиях меняющейся окружающей среды и возвращение в состояние гомеостаза.
Важную роль в поддержании внутриклеточного гомеостаза выполняет окислительно-восстановительный баланс клетки, зависящий главным образом от эндогенных и экзогенных активных форм кислорода и редокс-чувствительных сигнальных систем [Ткачев В.О. и др., 2011; Sena L.A., Chandel N.S., 2012].