Полиморфизм генов и секреция in vitro про- и противовоспалительных цитокинов при туберкулезе легких

• Автор: Никулина, Евгения Леонидовна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 155 с. : 4 ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Общие сведения о туберкулезной инфекции

1.1.1. Этиология и эпидемиология туберкулезной инфекции

1.1.2. Характеристика основных клинических форм туберкулеза легких

1.2. Иммунопатогенез туберкулезной инфекции

1.2.1. Особенности иммунитета при туберкулезе легких

1.2.2. Роль цитокинов в иммунопатогенезе туберкулезной инфекции

1.3. Молекулярно-генетические аспекты туберкулеза легких

1.3.1. Структурные основы функционального полиморфизма генов цитокинов
1.3.2. Связь полиморфизма промоторных регионов генов цитокинов с развитием заболеваний
Глава 2. Характеристика клинического материала и методы исследования..
2.1. Характеристика больных туберкулезом легких
2.2. Материал исследования
2.3. Методы исследования
2.3.1. Определение содержания лейкоцитов в периферической крови
2.3.2. Определение фенотипической принадлежности лимфоцитов периферической крови
2.3.3. Выделение мононуклеарных лейкоцитов из периферической крови
2.3.4. Иммуноферментный анализ для оценки секреции in vitro цитокинов
2.3.5. Выделение ДНК
2.3.6. Исследование полиморфизма генов цитокинов
2.4. Статистический анализ результатов
Глава 3. Результаты исследований
3.1. Общее количество лейкоцитов и уровень лимфоцитов периферической крови
3.2. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови
3.3. Секреция цитокинов in vitro мононуклеарными лейкоцитами периферической крови у больных туберкулезом легких
3.4. Анализ распределения генотипов и аллельных вариантов генов цитокинов у больных туберкулезом легких
3.5. Связь аллельного полиморфизма иммунорегуляторных генов с цитокинопродукцией in vitro
Глава 4. Обсуждение результатов
Выводы
Список литературы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АПК - антигенпрезентирующая клетка АМК - активные метаболиты кислорода ВИЧ - вирус иммунодефицита человека ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ДТЛ - диссеминированный туберкулез легких ИТЛ - инфильтративный туберкулез легких ИФА - иммуноферментный анализ КП - казеозная пневмония
ЛАК-клетки - лимфокинактивированные киллерные клетки
ЛУТЛ - лекарственно-устойчивый туберкулез легких
ЛЧТЛ — лекарственно-чувствительный туберкулез легких
МВТ - микобактерии туберкулеза
МФЗ - мультифакториальные заболевания
ОКЛ - общее количество лейкоцитов
ПДРФ - полиморфизм длин рестрикционных фрагментов
п.о. - пара оснований
ПЦР - полимеразная цепная реакция
СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита
ТАЕ буфер - трис-ацетатный буфер
ТВЕ буфер - трис-боратный буфер
ТЛ - туберкулез легких
ФГА - фитогемагглютинин
ФКТЛ — фиброзно-кавернозный туберкулез легких ЦТЛ - цитотоксические Т-лимфоциты BCG - бацилла Кальметта-Герена
CD (cluster of differentiation) - дифференцировочные антигены dNTP - дидезоксинуклеотидтрифосфат IFN (interferon) - интерферон
Р Ц ром достигается при участии всех трех субъединиц, что ведет к фосфорилированию цитоплазматических белков при действии нескольких протеинкиназ [Gerosa F., 2002];
Покоящиеся клетки не синтезируют a-цепь рецептора, ß-цепь экспрессируют CD8+ цитотоксические Т-лимфоциты, NK-клетки и моноциты,, а у-цепь - цитотоксические Т-лимфоциты и моноциты. CD4+ Т-хелперы, находящиеся в покое, и CD20+ В-лимфоциты не презентируют на мембране ни одной из трех субъединиц рецептора IL-2, поэтому не способны отвечать даже на стимуляцию высокими дозами IL-2. Только стимуляция ми или митогенами способствует индукции экспрессии рецептора и IL 2. Т киллеры в покое способны экспрессировать низкие количества рецептора IL-2 [Симбирцев A.C., 1998; Щелканов М.Ю. и соавт., 1999].
Основной биологический, эффект IL-2 заключается в регуляции пролиферации клеток-мишеней, с которыми он взаимодействует: Т- и В-лимфоциты, NK-клетки, моноциты, макрофаги; Первоначальным эффектом IL-2 является его взаимодействие с CD4+ Т-лимфоцитами и формирование клонов Thl. После получения активирующего сигнала в Thl-лимфоцитах начинают экспрессироваться гены IL2, IFNG, TNFA. Оказывая аутокринное воздействие на ТЫ-клетки и паракринное на субпопуляцию Th2, IL-2 вызывает смещение баланса Thl/Th2 в сторону клеточного звена. IL 2 служит ростовым и дифференцировочным фактором для CD8+ Т-лимфоцитов, стимулирует ИХ цитотоксическую активность. После Р ого иммунного ответа IL-2 способствует формированию популяции
Т-клеток памяти [Егорова ВЫ., 2004].
IL-2 стимулирует клеточное деление не только GD4+ Т-лимфоцитов, но и CD8 читотоксических Т-лимфоцитов, действуя по аутокринному и паракринному типам. В CD8+ Т-лимфоцитах под действием IL-2 происходит активация экспрессии генов, отвечающих за синтез перфоринов и гранзимов, что в конечном итоге приводит к усилению их цитотоксических свойств, в В-