Лихорадка Западного Нила на Юге России: современные эпидемиологические проявления и совершенствование методов выявления возбудителя

• Автор: Афанасьева, Екатерина Евгеньевна
• Шифр специальности: 14.02.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 139 с. : 16 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Лихорадка Западного Нила: современные аспекты эпидемиологии и лабораторной диагностики

1.2. Применение иммуномагнитных сорбентов при

санитарно-эпидемиологическом мониторинге патогенов во внешней среде

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материалы, взятые в работу

2.1.1 Клинический и полевой материал

2.1.2. Биологическое сырье
2.1.3. Диагностические тест-системы, использованные
при проведении лабораторных исследований
2.1.4. Оборудование и аппаратура (основные)
2.2. Методы исследования
2.2.1. Эпидемиологический анализ заболеваемости
2.2.2. Места сбора полевого материала
2.2.3. Сбор и хранение полевого материала
2.2.4. Подготовка проб полевого материала к исследованию
2.3. Выявление РНК вируса ЛЗН методом ОТ-Г1ЦР
2.4. Методы выделения иммуноглобулинов
2.5. Получение иммунопероксидазного конъюгата
2.6. Физико-химические методы
2.7. Лиофилизация биологического материала
2.8. Методы математической и статистаческо обработки полученных результатов
Глава 3. ОСНОВНЫЕ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ
ОСОБЕННОСТИ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА НА ТЕРРИТОРИИ ЮГА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
3.1. Условия, способствующие формированию природных очагов лихорадки Западного Нила
3.2. Результаты исследования полевого материала на
ЛЗН, собранного на территории Юга России
3.3. Эпидемическая обстановка по заболеваемости
лихорадкой Западного Нила на Юге России

Глава 4. СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МОНИТОРИНГА ЗА ЛИХОРАДКОЙ ЗАПАДНОГО НИЛА НА ПРИМЕРЕ СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ
4.1. Исследование клинического и полевого материа-
ла в ИФА и ПЦР, собранного на территории Ставропольского края
4.2. Разработка иммуномагнитного сорбента для мо-
ниторинга вируса лихорадки Западного Нила в объектах внешней среды в ИФА и ОТ-ПЦР
4.2.1. Получение иммуномагнитного сорбента
4.2.2. Изучение эффективности применения иммуно-магнитной сепарации при исследовании объектов внешней среды на наличии вируса лихорадки Западного Нила в ИФАи ПЦР
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК Л ИТЕРАГУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ
ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ
влзн - вирус лихорадки Западного Нила
ЗФР - забуференный физиологический раствор
ИФА - иммуиоферментный анализ
КББ - карбонат-бикарбонатный буфер
ЛЗН - лихорадка Западного Нила
МИС - магноиммуносорбент
МС - магносорбент
ОП - оптическая плотность
ОТ - обратная транскрипция
ОТ-ПЦР - полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией
ПААГ - полиакриламидный гель
ПЦР - полимеразная цепная реакция
ПЭГ - полиэтиленгликоль
PH - реакция нейтрализации
РИГА (РИГА) - реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации
РНК - рибонуклеиновая кислота
РСК - реакция связывания комплемента
РФ - Российская Федерация
ск - Ставропольский край
ТЭМЭД - тетраэтилметилендиамин
УФ - ультрафиолетовые лучи
ФСБ - фосфатно-солевой буфер
ЮФО РФ - Южный федеральный округ Российской Федерации
°С - градус Цельсия
1ёС - иммуноглобулины класса О
1ёМ - иммуноглобулины класса М
pH - отрицательный логарифм концентрации водородных ионов
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2Л. Материалы, взятые в работу
Для анализа эпидемиологической обстановки по лихорадке Западного Нила в Юге Российской Федерации использованы о тчетные данные Территориальных управлений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 2001-2006 гг.: Астраханской, Волгоградской, Ростовской областей, Краснодарского края, Кабардино-Балкарской, Карачаево-Черкесской, Чеченской республик, Республик Северная Осетия-Алания, Калмыкия, Адыгея.
2.1.1. Клинический и полевой материал
При выполнении работы использован клинический и полевой материал, собранный нами на 23 из 26 административных территориях Ставропольского края и в краевом центре - г. Ставрополе: 268 сывороток крови лихорадящих больных и 1302 сыворотки крови доноров; 8626 объектов внешней среды, в том числе 3573 имаго орнитофильных комаров (230 пулов) родов Culex. Aedes, Anopheles, Coquillettidia; 4853 особи иксодовых клещей (454 пула) — Hyalomma marginatum, Dermacenter marginatus, Ixodes ricinus, Rhipice-phalus rossicus, Boophilus annulatus и 61 особь аргасовых клещей Argas persi-cus (2 пула); 139 проб головного мозга птиц и грызунов.
2.1.2. Биологическое сырье
Антиген вируса Западного Нила, мышиная иммунная асцитическая жидкость к вирусу ЛЗН с высоким титром специфических антител класса G получены в ГУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН.
2.1.3. Диагностические тест-системы, использованные при проведении лабораторных исследований
• Тест-система иммуноферментная для индикации антигена вируса Западного Нила, изготовленная в ГУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН;