Влияние аминокислот, природных и синтетических пептидов на культуру ткани кожи молодых и старых крыс

• Автор: Войцеховская, Марина Александровна
• Шифр специальности: 14.01.30
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 83 с. : 27 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИИ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Структурно-функциональные особенности развития ткани кожи в онтогенезе

1.2. Теории старения клеток и тканей

1.3. Изменения кожи при старении организма

1.4. Роль биорегуляторных пептидов в функционировании клеток и тканей

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Состав питательной среды

2.2. Получение коллагена и коллагеновой подложки
2.3. Выделение тканей
2.4. Морфологические и морфометрические методы исследования развития эксплантатов в органотипической культуре тканей
2.5. Препараты, исследованные в культуре тканей
2.6. Определение эффективной концентрации аминокислот и пептидов в органотипической культуре ткани
2.7. Иммуноцитохимические методы исследования эксплантатов
2.8. Морфометрические исследования и компьютерный анализ микроскопических изображений
2.9. Статистическая обработка экспериментальных данных
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Влияние аминокислот на культуру ткани кожи молодых и старых крыс
3.2. Исследование процессов пролиферации и апоптоза при действии аминокислот в эксплантатах кожи молодых и старых крыс

3.3. Исследование влияния дипептидов на развитие эксплантатов кожи молодых и старых крыс
3.4. Исследование процессов пролиферации и апоптоза при действии дипептидов в эксплантатах кожи молодых и старых крыс
3.5. Исследование влияния трипептидов на развитие эксплантатов кожи молодых и старых крыс
3.6. Исследование влияния тетрапептидов на развитие эксплантатов кожи молодых и старых крыс
3.7. Исследование процессов пролиферации и апоптоза при действии тетрапептидов в эксплантатах кожи молодых и старых крыс
3.8. Исследование влияния природных полипептидов на развитие эксплантатов кожи молодых и старых крыс
3.9. Исследование процессов пролиферации и апоптоза при действии природных полипептидов в эксплантатах кожи молодых и старых крыс
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ИП - индекс площади ПОЛ - перекисное окисление липидов УФО - ультрафиолетовое облучение

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Органотипические культуры тканей являются удобным объектом для тестирования биологически активных веществ, так как в них отсутствуют нервные, гуморальные и другие воздействия на исследуемые клетки. Органотипическое культивирование тканей проводилось по описанной ранее методике [Чалисова Н.И. и др., 1999, 2005].
2.1. Состав питательной среды
Для успешного развития ткани вне организма необходимо подобрать адекватную питательную среду. Используемая культуральная среда (pH 7,2) содержала 35 % раствора Хенкса, 35 % среды Игла, 25% фетальной сыворотки теленка, глюкозу (0,6%), гентамицина (100 ЕД/мл).
2.2. Получение коллагена и коллагеновой подложки
Коллаген широко применяется в качестве биологического субстрата, на котором растет и развивается культивируемая ткань. Для поставленных задач использовали коллаген, полученный из сухожилий хвостов крыс по методу Бернстайна.
Хвост помещали в чашку Петри со спиртом и выдерживали при температуре минус 10°С в течение не менее 15 минут, затем освобождали от кожи и при помощи двух зажимов разламывали на кусочки (по 1-1,5 см от кончика к центральной части), затем из него вытягивали сухожильные нити. Эти нити помещали в чашку Петри со стерильной дистиллированной водой и расщепляли на отдельные волокна при помощи тонких пинцетов. Затем волокна опускали в колбу, наполненную 150 мл 0,1% раствора ледяной уксусной кислоты, и оставляли в холодильнике на 48 часов. Затем