Трансплантация аутологичных клеток костного мозга для коррекции патогенетических нарушений при аутоиммунном сахарном диабете I типа (экспериментальное исследование)

• Автор: Великий, Дмитрий Алексеевич
• Шифр специальности: 14.01.24
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 106 с. : 38 ил.

Оглавление
Введение
Глава I. Современные представления о патогенезе аутоиммунного сахарного диабета I типа и его коррекция методами клеточной терапии (обзор литературы)

1.1. Регенерационная способность р-клеток островков Лангерганса

1.2. Иммунная дизрегуляция как фактор возникновения и прогрессирования гибели островковых клеток при СДI типа
1.3. Регенерационная клеточная терапия СД, I типа и его осложнений* в эксперименте и клинике

1.3.1. Трансплантация островковых клеток поджелудочной железы

1.3.2. Использование клеток костного мозга и пуповиной крови для индукции иммунной толерантности при СД I типа' и других аутоиммунных заболеваниях

1.3.3. Заключение

Глава П. Материалы и методы исследования

2.1. Характеристика экспериментального материала

2.2. Технология проведения культуральных исследований
2.2.1. Получение и ведение культур мононуклеарных клеток костного мозга
2.2.2. Получение и ведение культур мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга
2.2.3. Подготовка клеточного материала для трансплантации
2.3. Техника моделирования аутоиммунного сахарного диабета I типа
2.4. Методы исследования
2.4Л. Биохимическое исследование крови
2.4.2. Морфологическое исследование органов
2.4.3. Методы иммуногистохимического исследования

2.4.4. Исследование цитокинового статуса в сыворотке крови
2.4.5. Определение содержания Т-регуляторных клеток в периферической крови методом проточной цитофлуометрии
2.4.6. Определение жизнеспособности клеток в культуре
2.4.7. Методы идентификации трансплантированных ККМ в культуре и в
органах реципиента
2.5. Методы статистической обработки
Глава Ш. Разработка иммунопатологической модели аутоиммунного сахарного диабета I типа у генетически не предрасположенных крыс
3.1. Клиническая и биохимическая характеристика аутоиммунной модели СД I типа у крыс
3.2. Морфологические изменения внутренних органов при моделировании аутоиммунного СД I типа
3.3. Иммуногистохимическое исследование ПЖ
3.4. Адоптивный перенос аутоиммунного СД I типа интактным
животным
Глава IV. Результаты трансплантации стволовых/прогениторных клеток аутологичного костного мозга при аутоиммунном сахарном диабете I типа и возможные пути повышения их эффективности
4.1. Предварительное культивирование ККМ как способ восстановления их иммунорегуляторной активности
4.2. Идентификация трансплантированных ККМ в органах реципиента
4.3. Однократная трансплантация двух фракций культивированных клеток аутологичного костного мозга на начальной стадии и на стадии развернутых клинических проявлений аутоиммунного СД I типа
4.4. Многократная трансплантация двух фракций культивированных клеток аутологичного костного мозга на начальной стадии и на стадии развернутых клинических проявлений аутоиммунного СД I типа

4.4.1 Функциональные и структурные изменения в ПЖ при многократной трансплантации двух фракций аутологичного КМ на начальной стадии и на
стадии развернутых клинических проявлений СДI типа
4.4.2 Функциональные и структурные перестройки в иммунной системе при многократной трансплантации двух фракций аутологичного КМ на начальной
стадии и на стадии развернутых клинических проявлений СД I типа
Глава V. Обсуждение полученных результатов
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы

al., 2003; Fang В. et al., 2004; Togel F. et al., 2005], а таюке в клинической практике для восстановления функции сердца perin Е.С. et al., 2003; Stamm C. et al., 2004; Rosenzweig A., 2006], для регенерации костной ткани [Arthur A. et al., 2009] и для ингибирования «реакции трансплантат против хозяина» [Ringden О. et al., 2006]. Показана положительная терапевтическая роль ММСК КМ и на экспериментальных моделях аутоиммунных заболеваний [Zappia E. et al., 2005; Zhang J. et al., 2005; Augello A. et al., 2007], в частности при введении ММСК КМ животным с моделью СД I типа, у которых было отмечено уменьшение уровня глюкозы и повышение уровня инсулина в крови [Lee R.H. et al., 2006; Boumaza I. et al., 2008], то есть установлено ингибирование иммунной дизрегуляции и индукция процессов регенерации в островковой ткани ПЖ.
Продемонстрированное нами влияние клеток костного мозга - как: центрального органа иммуногенеза на процессы морфогенеза в организме укладывается в концепцию влияния иммунорегуляторных клеток иммунной системы на процессы репаративной регенерации. По современным представлениям иммунная система в здоровом организме находится в состоянии толерантности к разнообразным антигенам собственных органов, и это состояние поддерживается определенным уровнем избытка циркулирующих органных антигенов. При существенном уменьшении определенного антигена (при резекции или повреждении органа), который обеспечивал эту естественную толерантность, начинается размножение специфических к нему лимфоидных клеток - 'CD4+ Т-хелперов. Именно этим клеткам принадлежит ведущая роль в индукции морфогенеза органов. Синтезированные CD4+ Т-хелперы при этом приходят в контакт с антигенспецифичными клетками резецированного органа, активируют их геном и пролиферативную активность. В результате ускоренного клеточного деления вновь возрастает продукция органоспецифичного антигена и происходит восстановление иммунологической толерантности в организме, следствием