Повышение эффективности остеоинтеграции титановых дентальных имплантатов путем оптимизации их формы, структуры поверхности и применения клеточных технологий в эксперименте

• Автор: Мальгинов, Николай Николаевич
• Шифр специальности: 14.01.14
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 125 с. : 162 ил.

Оглавление
Введение

ГЛАВА 1. Применение клеточных технологий в стоматологии (Обзор литературы)

1.1. Стволовые клетки - как индукторы регенерации тканей человека.

1.2. Современные представления о роли мезенхимальных стволовых клеток в остеогенезе и остеокондукции.

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования

2.1. Характеристика экспериментального материала.

2.2. Характеристика образцов титановых имплантатов.

2.3. Характеристика дентальных имплантатов. 2.4. Характеристика мезенхимальных стволовых клеток (МСК). 49

2.4.1.Культивирование МСК и заселение титановых пластин

2.4.2.Методика формирования клеточного слоя на поверхности имплантатов 2.4.3.Изучение организации клеточного слоя на
поверхности имплантатов методом электронной микроскопии 2.4.4.Изучение цитотоксичности, эффективности прикрепления и пролиферации клеток на поверхности образцов титановых имплантатов. 51
2.5. Исследование динамики регенерации костной ткани.
2.5.1. Рентгенологическое изучение фрагментов кости с имплантатом. 2.5.2.Изучение костной ткани и сколов кости
челюсти методом сканирующей электронной микроскопии.
2.5.3.Гистологическое исследование препаратов костной ткани.
2.5.4.Методика гистоморфометрического исследования
2.6. Методика статистической обработки данных

ГЛАВА 3. Влияние материала имплантата и структурных особенностей его поверхности на морфофункциональные характеристики клеток, культивируемых на его поверхности 3.1. Характеристика поверхности титанового имплантата, обработанной разными способами. 3.2. Оценка влияния титана на жизнеспособность и пролиферативный потенциал МСК. 55 55
ГЛАВА 4. Сравнительная оценка репаративных изменений в кости экспериментальных животных в зависимости от вида имплантата. 4.1. Изучение регенераторных особенностей и
остеогенных свойств тканей периимплантационнои зоны при использовании титанового образца (контроль).
4.2. Особенности регенерации и остеогенеза в костной ткани экспериментальных животных при использовании титанового имплантата с нежизнеспособными стволовыми клетками
4.3. Оценка репаративных возможностей и остеогенных способностей тканей периимпланта-ционной зоны при использовании титанового имплантата с нанесенными живыми стволовыми клетками.
ГЛАВА 5. Особенности процесса регенерации костной ткани органогинической кости (нижней челюсти) при имплантации титановых образцов в МСК.
ГЛАВА 6. Реакция костной ткани на вживление титановых
имплантатов в сроки 3,6 и 9 месяцев.
6.1.Структурные изменения в периимпланта-ционной ткани в срок 3 месяца
6.1.1.Срок 3 месяца, непосредственная имплантация без МСК.
6.1.2. Срок 3 месяца отсроченная имплантация. 6.1.3. Срок три месяца, непосредственная
имплантация, поверхность имплантата содержит МСК. 6.1.4. Срок три месяца, отсроченная имплантация,
поверхность имплантата обработана с МСК.
6.2. Характер регенераторных процессов в срок 6 месяцев эксперимента
6.2.1. Срок 6 месяцев, непосредственная имплантация, имплантат без МСК

6.2.2. Срок 6 месяцев, отсроченная имплантация, имплантат без МСК. 6.2.3. Срок 6 месяцев, непосредственная имплантация, имплантат с МСК. 6.2.4. Срок 6 месяцев, отсроченная имплантация, имплантат с МСК. 6.3. Реакция костной ткани на вживление титановых имплантатов в срок 9 месяцев 6.3.1. Срок 9 месяцев, непосредственная имплантации, имплантат обычной формы, без МСК. 6.3.2. Срок 9 месяцев, непосредственная имплантация, имплантат усовершенствованной формы без МСК. 6.3.3. Срок 9 месяцев, непосредственная имплантация, имплантат усовершенствованной формы с МСК. 6.3.4. Срок 9 месяцев, отсроченная имплантация. Имплантат стандартной формы без МСК. 6.3.5. Срок 9 месяцев, отсроченная имплантация. Имплантат усовершенствованной формы, без ММСК. 6.3.6. Срок 9 месяцев, отсроченная имплантация имплантат усовершенствованной формы с МСК. 6.4. Морфометрический анализ тканевых соотношений в зоне имплантации при непосредственной и отсроченной имплантации в разные сроки после операции. 186 194 202 213 214 223 229 236 241 247
Заключение
Выводы
Практические рекомендации
Список используемой литературы

материалов с наноструктурированной поверхностью обладают достаточными матричными свойствами, обеспечивают на своей поверхности пролиферацию фибробластов, которая приводит к образованию в течение 3-4 недель трехмерных структур, состоящих из клеток и гранул. Жизнеспособность фибробластов оценивают с помощью МТТ-метода, который основан на способности дегидрогеназ живых клеток восстанавливать 3 - (4,5 - диметил - 2 - тиазолил) - 2 — 5 -диметилтетразолий бромистый (МТТ) в голубые кристаллы формазана, не растворимые в воде. Количество образовавшегося формазана характеризует пролиферативную активность, следовательно, жизнеспособность различных клеток человека и животных (Моэтап Т., 1983).
Исследователи убедительно продемонстрировали возможность использования пористых керамических материалов, применяемых стоматологами России: В-трикальцийфосфат, пирофосфат кальция и бифазное соединение В-трикальций фосфат, гидрофосфат кальция (40/60) и костные цементы на основе аморфного фосфата кальция с добавлением гидроксиапатита и карбоната кальция для адгезии стволовых клеток. Однако, эти материалы токсичны в отношении фибробластов человека, за исключением пирофосфата кальция, который слаботоксичен. Все шесть видов калиций-фосфатных материалов обеспечивали прикрепление, распластывание и пролиферацию фибробластов на своей поверхности. При длительном культивировании происходило формирование
трехмерных структур, в которых гранулы материалов были
сцементированы фибробластами (Сергеева Н.С. и соавт., 2008).
1.2. Современные представления о роли мезенхимальных
стволовых клеток в остеогенезе и остеокондукции.
Возникло мнение, что можно использовать свойства остеогенных МСК для стимулирования собственного остеогенеза и создания оптимальных