Значение рецептора интерлейкина-6 на опухолевых клетках множественной миеломы

• Автор: Костюкова, Мария Николаевна
• Шифр специальности: 14.01.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 145 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Структура и функциональная активность рецептора интерлейкина-

1.1. Общая характеристика рецептора интерлейкина-6

1.2. Структура внеклеточных доменов рецептора 1Ь-6 и механизм передачи цитокинового сигнала

1.3. Экспрессия рецептора ІБ-6 в норме и при плазмоклеточных опухолях

1.4. Типы функциональной активности рецептора 1Ь-6 при множественной миеломе

1.5. Заключение

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материалы
2.2. Характеристика клинического материала
2.3. Методы
2.3.1. Работа с культурами клеток
2.3.2. Выделение фракции мононуклеарных клеток костного мозга
2.3.3. Проточная цитофлуориметрия
2.3.3.1. Метод прямой иммунофлуоресценции
2.3.3.2. Метод непрямой иммунофлуоресценции
2.3.3.3. Количественное определение экспрессии молекул рецептора 1Ь-6
2.3.3.4. Окрашивание внутриклеточных маркеров
2.3.3.5. Анализ клинических и экспериментальных данных, полученных методом проточной цитометрии
2.3.4. Депривация П.-6 в препаратах костного мозга
2.3.5. Флуоресцентная микроскопия
2.3.6. Выявление генов вируса ННУ-8 в опухолевых клетках
2.3.7. Статистическая обработка экспериментальных данных

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Функциональные особенности внеклеточных доменов gpl30 и IL-6Ra субъединиц рецептора 1L-
3.1.1. Участие эпитопов рецепторных молекул gpl30 и IL-6Ra в дозозависимом связывании IL-
3.1.2. Изучение димеризации рецептора интерлейкина-6 с помощью МКА к gpl30 и IL-6Ra на иммортализованных клеточных линиях
3.1.3. Регуляция экспрессии рецептора IL-6 его лигандом на клеточных линиях множественной миеломы
3.1.4. Определение абсолютных количеств молекул рецептора IL-6 на мембране клеток миеломных линий
3.1.5. Изменение активационных состояний (функциональный эпитопный анализ) IL-6Ra и gp
3.1.6. Особенности иммунофенотипов клеточных линий множественной миеломы
3.2. Экспрессия рецептора IL-6 у больных множественной миеломой
3.2.1. Уровень и характер экспрессии IL-6Ra на мембране опухолевых клеток
3.2.2. Взаимосвязь экспрессии рецептора 1L-6 с клиникоиммунологическими характеристиками множественной миеломы
3.2.3. Экспрессия рецептора 1L-6 при морфологически атипичных вариантах множественной миеломы
3.3. Регуляция экспрессии рецептора IL-6 на мембране опухолевых плазмоцитов интерлейкином-
3.4. Взаимосвязь инфицированности HHV-8 с экспрессией рецептора IL-6 и с клиническими характеристиками опухолевых клеток множественной миеломы

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1. Иммунологическая оценка экспрессии и активации рецептора IL-6
4.1.1. Определение активационных состояний gpl30 и IL-6Ra на клеточных линиях множественной миеломы
4.1.2. Регуляция уровня экспрессии рецептора IL-6 его лигандом
4.2. Клинико-иммунологические характеристики множественной миеломы и экспрессия рецептора IL-6
4.2.1. Уровни экспрессии рецептора IL-6 в CD138+ и CD138' субпопуляциях опухолевых плазматических клеток
4.2.2. Взаимосвязь экспрессии рецептора IL-6 с аберрантным иммунофенотипом плазматических клеток
4.3. Заключение
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

экспрессией этого маркера, причем из трех изоформ (CD45RA, CD45RB, CD45R0) CD45RA представлена на миеломных клетках в меньшей степени и не участвует в сигнальном взаимодействии с IGF-1R и gpl30, a CD45RB, и в большей степени аберрантная, не экспрессирующаяся в норме [Fujii et al., 1999] CD45R0 при воздействии IL-6 быстро транспонируются в липидные островки на мембране, где конститутивно присутствуют рецепторы IL-6 и IGF-1R [Li et al., 2005]. Подтверждена близкая локализация CD45R0, IL-6Ra, IGF-1R и некоторых нерецепторных киназ [Ishikawa et al., 2002]. Таким образом, сигнал IL-6 активирует gpl 30, IGF-1R и CD45, модулируя выживаемость клеток по трем сигнальным механизмам. Интересно также, что в пуле клеток одной клеточной линии могут присутствовать как CD45+, так и CD45" клетки [Ishikawa et al, 2003; Zhou et al., 2004], выживаемость и пролиферация которых активируется по разным механизмам, в обоих случаях через рецептор интерлейкина-6.
Участие gpl30 в сигнальном пути 1L-10 характерно для плазматических клеток в состоянии выраженной пролиферативной активности: IL-10 запускает аутокринную петлю, способствуя появлению на мембране клеток ММ рецептора онкостатина М, который сенсибилизирует опухолевые клетки к передаче сигнала онкостатина М через gpl30 для дальнейшей выработки ростового фактора IL-10 [Klein etal, 1999].
Взаимодействие gpl30 с молекулами рецепторных тирозинкиназ было показано ранее: выявлены комплекс gpl30/ErbB2 в клетках карциномы простаты человека, а также взаимодействие рецептора интерферона IFNAR-1 с gpl30 [Qiu et al., 1998; Mitani et al., 2001]. Таким образом, нарушение соотношения молекул IL-6R и gpl 30 на мембране опухолевых клеток может способствовать трансактивации рецептора и являться важным механизмом передачи сигналов опухолевых клеток.
Особое функциональное свойство gpl30 взаимодействовать без участия IL-6Ra с вирусным гомологом IL-6 (vIL-б) играет патогенетическую роль в ассоциированных с HHY-8 опухолях и рассматривается как один из возможных