Роль полиморфизма генов NO-синтаз при бронхиальной астме у детей

• Автор: Петрова, Ирина Валерьевна
• Шифр специальности: 14.00.16
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 176 с. : 18 ил.

Содержание

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Ведущие патогенетические механизмы бронхиальной астмы

1.1.1. Атопическое воспаление и бронхиальная астма

1.1.2. Механизмы развития бронхиальной гиперреактивности

1.2. Роль наследственности в патогенезе бронхиальной астмы

1.2.1. Результаты генетических исследований бронхиальной гиперреактивности

1.2.2. Факторы подверженности атопии

1.3. Семейство ГЮ-синтаз. Структура и функции

1.3.1. Генетика NО-синтаз
1.4. Роль оксида азота в организме
1.5. Регуляция экспрессии генов БЮ-синтаз
Глава 2. Клинические группы и методы
2.1. Характеристика обследованных больных
2.2. Клиническое обследование
2.3. Лечение
2.4. Аллергологическое обследование
2.5. Функциональные методы исследования функции легких
2.5.1. Пикфлоуметрия
2.5.2. Оценка функции внешнего дыхания
2.5.3. Бронхопровокационная проба с мегахолином
2.6. Специальные методы исследования
2.6.1. Подготовка периферической крови для молекулярнобиологических исследований
2.6.2. Выделение геномной ДНК

2.6.3. Амплификация ДНК в ПЦР
2.6.4. Выделение тотальной РНК
2.6.5. Амплификация РНК в ПЦР
2.6.6. Определение полиморфизма промоторной области генов NO- 61 синтаз
2.6.7. Определение нуклеотидной последовательности фрагментов ДНК
2.6.8. Получение дыхательного конденсата
2.6.9. Спектрофотометрическое определение нитритов
2.7. Статистическая обработка результатов
Глава 3. Результаты собственных исследований
3.1. Клинико-анамнестическая характеристика больных бронхиальной астмой, включенных в исследование
3.2. Показатели функции внешнего дыхания у больных бронхиальной астмой до и после лечения
3.3. Специальные методы исследования
3.3.1. Уровень мРНК генов NO-синтаз у детей, больных бронхиальной астмой, до и после лечения
3.3.2. Содержание нитритов в дыхательных путях больных бронхиальной астмой до и после лечения
3.3.3. Распространенность полиморфных вариантов промоторной области генов NO-синтаз и их ассоциация с патогенетическими признаками бронхиальной астмы
3.3.3.1 Результаты изучения полиморфизма промоторной области гена NOSJ и его ассоциации с клинико-патогенетическими признаками бронхиальной астмы
3.3.3.2. Результаты изучения полиморфизма промоторной области гена NOS2 и его ассоциации с клинико-патогенетическими признаками бронхиальной астмы

3.3.3.3. Результаты изучения полиморфизма промоторной области гена NOS3 и его ассоциации с клинико-патогенетическими признаками бронхиальной астмы
3.3.4. Результаты определения нуклеотидной последовательности промоторных областей генов NO-синтаз
Глава 4. Обсуждение результатов
4.1. Анализ ассоциаций полиморфизма генов NO-синтаз с некоторыми патогенетическими маркерами бронхиальной астмы
4.1.1. Анализ связей полиморфных вариантов промоторной области
гена NOS1 с патогенетически важными для астмы признаками
4.1.2. Анализ связей полиморфных вариантов промоторной области
гена NOS2 с патогенетически важными для астмы признаками
4.1.3. Анализ связей полиморфных вариантов промоторной области
гена NOS3 с патогенетически важными для астмы признаками
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы

29 и 5'-фланкирующей области [72, 74]. Однако эти полиморфные варианты еще не изучены и в литературе не обнаружено данных об их связи с какими-либо заболеваниями.
Таблица
Структура и хромосомная локализация генов ИО-синтаз
Изоформы Структура гена Хромосомная локализация Номер в генбанке (ИСВІ)
N081 29 экзонов, 28 интронов 12ц24.2-12я24.3 № Ш 5666
N082 26 экзонов, 25 интронов 17сеп-ц11.2 № ЬЗ6031
N083 26 экзонов, 25 интронов 7ц35-7ц36 №026607
Эндотелиальная ЫО-синтаза является продуктом гена, расположенного на хромосоме 7q36, имеющего протяженность 22 кб и содержащего 26 экзонов. В интроне 4 данного гена расположен минисателлит. Полиморфизм гена ИО-синтазы в интроне 4 относится к полиморфизмам типа тандемных повторов с изменяющимся числом копий. Он представлен двумя аллелями — аллелем а, который состоит из 4 повторяющихся фрагментов размером 27 пар нуклеотидов (п.н.), и аллелем Ь, который содержит 5 таких повторов [34, 72]. По данным исследований, аллель с пятью повторами (аллель 4Ь) в популяции встречается значительно чаще, чем с четырьмя [133, 143]. Отмечено также, что у лиц, гомозиготных по редкому аллелю (аллель 4а), повышен уровень нитратов и нитритов в крови, который зависит от скорости выработки N0. Это свидетельствует о потенциальной генетической роли генотипа 4а/4а как фактора риска для развития заболеваний, при которых отмечается нарушение нормальной выработки N0.
Известен полиморфизм гена N083, расположенный в экзоне 7 01и298Азр. Точечная миссенс-мутация в 7 экзоне (замена б на Т в 894 нуклеотиде) ведет к замене глутаминовой кислоты на аспарагиновую в 298-м