Экспрессия белков, контролирующих апоптоз, при раке молочной железы

• Автор: Глухова, Елена Игоревна
• Шифр специальности: 14.00.14
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 158 с. : ил

Содержание

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Некоторые клинико-морфологические и биологические факторы прогноза при РМЖ

1.2. Современные представления о р53 и подходы к оценке экспрессии р

1.3. Современные представления о Вс1-2 и методические подходы к оценке экспрессии Вс1-2 при РМЖ

1.4. Основные методические подходы определения экспрессии биомаркеров

1.5. Методичекие подходы к оценке плоидности ДНК при РМЖ

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Характеристика больных

2.2. Материалы исследования
2.3. Моноклональные антитела
2.4. Методы исследования
2.4.1. Реакция иммунофлуоресценции
2.4.2.Иммуноферментный анализ (АВС-метод)
2.4.3.Иммуногистологическое окрашивание
2.5. Методика лазерной ДНК-проточной цитофлуориметрии
2.6. Методика анализа клеток в фазах клеточного цикла
2.7. Статистическая обработка данных
Глава 3. Результаты исследования
3.1. Сравнение иммуноцитохимического и иммуногистохимического методов определения биомаркеров при раке молочной железы
3.2. Экспрессия белков, контролирующих апоптоз, при РМЖ
3.2.1. Зависимость экспрессии биомаркеров от стадии и степени злокачественности опухоли молочной железы
3.2.2. Изучение зависимости экспрессии биомаркеров от наличия метастазов
3.2.3. Зависимость экспрессии биомаркеров от гистологической формы РМЖ
3.3. Изучение зависимости экспрессии биомаркеров от гормонального статуса опухоли при РМЖ
3.4. Зависимость плоидности от различных факторов прогноза при РМЖ
3.5. Зависимость экспрессии биомаркеров от плоидности опухоли молочной железы
3.6. Корреляция экспрессии биомаркеров с традиционными факторами прогноза РМЖ
3.7. Анализ экспрессии р53 с использованием моноклональных антител ІС0212 при РМЖ
3.8. Связь экспрессии биомаркеров с выживаемостью больных РМЖ
Глава 4. Обсуждение результатов
Выводы
Список литературы

Список сокращений
BSA - бычий сывороточный альбумин
PBS - фосфатный солевой буфер
БРВ - безрецидивная выживаемость
ДАБ - диаминобензидин
ДИР - инфильтративный дольковый рак
ИГХ - иммуногистохимия
ИФА - иммуноферментный анализ
ИЦХ — иммуноцитохимия
МКА — моноклональные антитела
ОВ - общая выживаемость
ПА - пролиферативная активность
ПИР - инфильтративный протоковый рак
ПКА - поликлональные антитела
ПЦР - полимеразная цепная реакция
РА - рецепторы андрогенов
РГ - рецепторы глюкокортикоидов
РМЖ - рак молочной железы
РП - рецепторы прогестерона
РЭ - рецепторы эстрогена

супрессором клеточной гибели. Вероятно, причина в том, что у позвоночных существует большое семейство Bcl-2-подобных молекул, способных выполнять аналогичную функцию. В последние годы в лимфоидных клетках цыпленка найден другой ген: Bcl-x [Boise L.H.,
1993]. Это ген в значительной степени гомологичен Вс1-2 и кодирует два белка различной длины: длинная форма - Bcl-xl, короткая - Bcl-xs, которая противодействует Вс1-2.
Кроме того, в зрелых гемопоэтических тканях обнаружены другие гены и белки, гомологичные Вс1-2. При апоптозе ИЛ-3-зависимой клеточной линии выявлен белок Вах. Этот белок димеризуется с Вс1-2, ускоряет апоптическую гибель и, таким образом, противодействует как и Bcl-xs, активности Bcl-2 [Oltvai Z.N. et al, 1993, Williams G.T., Smith C.A.,1993; Lichtenstein A., Tu Y., Fady C. et al, 1995; Kozopas K.M., Yang T. et al, 1993].
Механизм действия белка Bcl-2 пока не совсем ясен. Показано, что Вс1-2 обладает антиоксидантным свойством, подавляет пероксидацию липидов и действет как нереактивная, свободнорадикальная ловушка [Hockenbery D.M., Oltvai Z.N. et al, 1993].
Интересно отметить, что такой протоонкоген как Вс1
специфический ингибитор апоптоза во многих клеточных типах — экспрессируется в юных кроветворных клетках, про-В-лимфоцитах, CD4-, СБ8-лимфоцитах, зрелых долгоживущих Т- и В-лимфоцитах, клетках памяти, но не выявляется в незрелых формах и на эффекторных клетках [Zamazami N., 1997]. Трансфекция в незрелых Т- и В-клетках вызывает увеличение их клонов и повышает устойчивость к глюкокортикоидам [Sentman C.L., Shutter J.R., Hockenbery D., 1991].
Установлено, что экспрессия Bcl-2 гена способствует выживанию лимфоцитов и поддерживает гомеостаз иммунной системы [Linette G.P., Korsmeyer S.J., 1994]. Однако вызываемое экспрессией гена Вс 1-2 увеличение выживаемости клеток не универсально. Например, ИЛ-2-зависимых клеточных линиях эффект не выявлен.