Морфологическая характеристика иммунной системы птиц при заражении токсигенными бактериями Yersinia pseudotuberculosis

• Автор: Ибрагимова, Карина Ахмедовна
• Шифр специальности: 06.02.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 112 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Таксономическое положение и история изучения бактерий Yersinia

pseudotuberculosis

1.2. Дифференциально-диагностические свойства Yersinia pseudotuberculosis

1.3. Факторы патогенности Yersinia pseudotuberculosis

1.4. Патогенез, диагностика и иммунитет при псевдотуберкулезе

Заключение по обзору литературы

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Клинико-морфологические методы исследований
2.2. Гематологические и иммунологические методы исследований
2.3. Бактериологические методы исследований
2.4. Методы оценки патогенных и токсигенных свойств
2.5. Методы изучения фенотипических признаков Y. pseudotuberculosis
2.6. Методы статистической обработки результатов исследований
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Результаты изучения морфологических, культуральных, ферментативных
свойств Y.pseudotuberculosis
3.2. Результаты изучения факторов патогенности Y.pseudotuberculosis
3.3. Результаты изучения динамики развития болезни при экспериментальном
воспроизведении псевдотуберкулеза птиц
3.4. Результаты изучения диссеминации Y.pseudotuberculosis в ткани и органы

3.5. Результаты изучения морфологических изменений в тканях и органах иммунной системы птиц при заражении токсигенными бактериями
Y. pseudotuberculosis
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

ВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. Микроорганизмы Yersinia pseudotuberculosis (возбудители псевдотуберкулеза), в соответствии с эмпирическим принципом классификации «Bergy's manual...1984-1989», включены в род Yersinia, уровень гомологии ДНК с возбудителем зооантропонозной чумы (Особо Опасной Инфекции) - Yersinia pestis составляет - 87,9 - 90,0 % (Балахонов С.В., 1988; Шурыгина И.А., 2004; Светоч Т.Э., 2012; Price et al., 2012). Генотип патогенных штаммов Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica содержит хромосомные и плазмидные детерминанты, называемые «плазмидой вирулентности иерсиний» - «plasmidasociated with Yersinia virulence» (pYV) (Езепчук Ю.В., 1977; Полоцкий Ю.Е., 1981; Пашин А.Ю. и соавт., 1984; Дайтер А.Б. и соавт., 1987; Тимченко Н.Ф., 1989; 2004; Исачкова Л.М. и соавт., 1993; Мавзютов А.Р., 2001., 1980; Ценева Г.Я., 1997; Kaneuchi С., 1989; Hayashidani H., 1994; Singh S., 1994; Brubaker R.R., 1983; Comelis G. et al., 1994; Czemomysy-Furowicz, D. 1996; Okwori A. et al., 2007; BonciM. et al. 2009; Thisted Lambertz S. et al., 2008; Long C. et al., 2010).
Псевдотуберкулез у птиц (куры, индейки, фазаны, серые куропатки, утки, голуби, канарейки) протекает остро, подостро, хронически, латентно (Душук Р.В., 1989; Конопаткин A.A. и соавт., 1993; Сидоров М.А. и соавт., 1995; Скородумов Д.И., и соавт., 2005; Бессарабов Б.Ф. и соавт., 2007). При исследовании 1200 проб патматериала птицы идентифицировано 184 культур микроорганизмов, из числа которых 2,1 % составили Y. pseudotuberculosis, указанные бактерии были выделены, также с поверхности и из тушек птицы, яиц и продуктов, приготовленных из мяса птицы, а также с упаковочной тары (Каландадзе Е. П., 1991; Зон М.Г., 2001). При бессимптомной персистенции иерсиний в теплокровном организме бактерионосителей может происходить контаминация пищевого сырья, что обусловливает социальную значимость профилактических мероприятий в начале «пищевой цепи» (в птицеводстве и

перерабатывающей промышленности) (Санитарные правила. 3.1.094-96; Ветеринарные правила 13.3.1318-96).
При организации профилактических мероприятий и изыскании средств борьбы с инфекционными болезнями приоритетной задачей является раскрытие механизмов развития взаимодействия в системе «возбудитель-макроорганизм» с последующей практической реализацией полученных знаний для разработки эффективных методов диагностики. Следует учитывать, что цитотоксическое влияние бактерий Y pseudotuberculosis на клетки млекопитающих, как in vitro, так in vivo к настоящему времени достаточно изучено, менее изученными являются патогенетические аспекты псевдотуберкулеза птиц. Культивирование иерсиний при температуре свыше 28° С вызывает диссоциацию однородной популяции на S-R-формы (Ющенко Г.В., 1972; Ленченко Е.М. и соавт., 1998; Пушкарева В.И., 1999; Бондаренко В.М., 1999; Литвин В.Ю., 1999; Каврук Л.С., 2000; Скляров О.Д., Мельниченко Л.П., 2001; Павлова И.Б. и соавт., 2007; Colwell R., 1985; Kapperud G. et al., 1987; Robins-BrowneR.M. et al., 1993; China B. et al., 1994). Изменение формы, снижение метаболизма бактерий способствуют переходу в «некультивируемое состояние», что определяет целесообразность апробации и подбора эффективных схем бактериологической диагностики, учитывая, мало исследованность следует изучить влияние токсигенных бактерий Y.pseudotuberculosis на динамику развития патологических процессов в органах иммунитета птиц, что и определило актуальность темы диссертационной работы.
Цель исследований: изучить диссеминацию микроорганизмов в ткани и органы, динамику морфологических изменений иммунной системы птиц при заражении токсигенными бактериями Yersinia pseudotuberculosis
Задачи исследований:
- изучить морфологические, культуральные, ферментативные свойства Г.pseudotuberculosis;

голубой цвет (изменение окраски в границах pH 6,25-7,7), при pH 5,3-6,0 окраска колоний становится желтой.
На среде «CIN-agar» через 18 часов культивирования иерсинии, ферментирующие маннит, формировали розового цвета колонии с четко очерченным центром и прозрачными краями. За счет наличия цефсулодина, триклозана, новобиоцина подавлялся рост сальмонелл и эшерихий.
Для определения формы бактериальных клеток, их расположения относительно друг друга, размера и способности к окраске анилиновыми красителями (тинкториальные свойства) готовили мазки из чистых бульонных и агаровых культур, окрашивали по I раму. Использовали модификацию А.В. Синева. На фиксированный мазок помещали полоску фильтровальной бумаги, пропитанную генциановым фиолетовым, и смачивали ее 2-3 каплями воды. Окрашивали 2 мин. Затем бумажку удаляли и наливали раствор Люголя на 2 мин. Сливали раствор и обрабатывали мазок 96 %-ным этанолом в течение 30 сек. Промывали водой и докрашивали фуксином Пфейффера в течение 2 мин. Мазок промывали, высушивали и исследовали под иммерсией.
В мазках из агаровых и бульонных культур У. рзеибошЬегси1оз]з были представлены грамотрицательными палочками с закругленными концами, овоиднойили кокковидной формы, без капсул.
Выделенные культуры У. рзеибо1;иЬегси1оз1з ферментировали с образованием кислоты: глюкозу, галактозу, Ь-арабинозу, левулезу, маннозу, ксилозу, рамнозу, мальтозу, трегалозу, маннит, салицин; редуцируровали нитраты, метиленовый синий; реакции на каталазу, уреазу и с метиловым красным положительны, Фогес-Проскауэра - отрицательна (при 26 - 28 °С и 37 °С); не ферментировали лактозу, сахарозу, рафинозу, целлобиозу, дульцит, инозит, сорбит, инулин, Д-арабинозу.
За изменениями сред в процессе роста бактерий наблюдали в течение в течение 10 сут, учитывая результаты на 2, 5, 7, 10 сут. Учет результатов проводят через 18 - 24 ч согласно классификационным таблицам определяют видовую принадлежность выделенных чистых культур бактерий.