Получение кур-реципиентов, фертильных за счет функций трансплантата донорского яичника

• Автор: Косенко, Олег Васильевич
• Шифр специальности: 06.02.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 143 с. : ил.

ОГ ДАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Яичник позвоночных в качестве объекта трансплантации и факторы, влияющие на ее результаты
1.2 Некоторые методы трансплантации яичника и их применение в экспериментальной биологии и медицине
1.3 Биотехнические подходы к искусственной репродукции птиц путем ортотопной трансплантации яичника молодкам-реципиентам

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Влияние породы цыплят на результаты проведения у них операций овариэктомии и ортотопной трансплантации яичника
3.2 Изменчивость результатов проведения ортотопных трансплантаций донорского яичника между цыплятами разных пород без применения каких-либо приемов преодоления барьеров гистонесовместимости
3.3 Новый способ сравнительной оценки силы реакции гистонесовместимости у птиц и возможность его практического использования при проведении ортотопных трансплантаций донорского яичника между цыплятами разных пород
3.4 Модифицированные способы индукции иммунотолерантности у птиц и возможность их практического использования при проведении ортотопных трансплантаций донорского яичника между цыплятами разных пород
ВЫВОДЫ
РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. Одной из биологических проблем птицеводства является то, что почти все известные методы искусственной репродукции сельскохозяйственных птиц имеют существенные недостатки.
Так, известный метод искусственной репродукции птиц путем трансплантации овулировавшего желтка в воронку яйцевода несушки-реципиента [58; 89] не достаточно технологичен, поскольку необходимость в проведении такой довольно сложной хирургической операции возникает при получении каждого яйца.
Известен также метод искусственной репродукции птиц путем трансплантации бластодиска на мембрану желтка не оплодотворенного яйца [117], но он совершенно не эффективен, поскольку трансплантированные эмбрионы замирают уже на ранних стадиях развития.
Наряду с этими известны методы искусственной репродукции птиц путем инъекции бластодермальных [118; 130;254;266] или примордиальных клеток [201;255;267;271;296] ранним эмбрионам-реципиентам, которые также не достаточно технологичны и эффективны, поскольку проведение этих трудно выполнимых манипуляций в яйце приводит к гибели большинства эмбрионов-реципиентов на разных стадиях развития. Кроме того, далеко не все полученные таким путем химерные особи могут быть использованы в качестве производителей донорского потомства, поскольку многие из них оказываются либо только соматическими химерами, либо совершенно бесплодными из-за несовпадения генетического пола реципиентов и доноров герминативного материала.
Указанные недостатки известных методов искусственной репродукции птиц крайне затрудняют или делают вообще не возможной разработку на их основе различных биотехнологий, имеющих своей целью получение, сохранение или размножение особей с уникальным генотипом. В связи с этим актуальной темой научных исследований в области птицеводства продолжает оставаться изыскание и разработка альтернативных методов

искусственной репродукции птиц.
Весьма перспективной альтернативой известным методам искусственной репродукции птиц является ортотопная, то есть, прямоместная (от греч. орто - прямо и топос - место) трансплантация донорского яичника предварительно стерилизованным молбдкам-реципиентам, предложенная еще в начале прошлого века Гатри [210;211]. Этот метод предполагает, что полученные таким путем несушки-реципиенты, фертильные за счет функций трансплантата донорского яичника, могут быть использованы в качестве искусственных производителей донорского потомства. Но, поскольку такие особи являтотся трансплантационными химерами, то они могут послужить также в качестве экспериментальной биологической модели при выяснении некоторых вопросов биологии развития, физиологии и генетики птиц.
Однако в пионерской работе Гатри и ряде работ других исследователей [92;95;187;209] по ортотопной трансплантации донорского яичника между молодками кур разных пород были допущены серьезные методические погрешности при постановке экспериментов. При этом, в частности, были использованы не достаточно надежные способы выполнения хирургических операций, а также проигнорирована необходимость применения методов генетического анализа при выяснении происхождения фертильности у несушек-реципиентов, что привело к получению сомнительных или явно отрицательных результатов. Поэтому достаточно убедительные доказательства принципиальной возможности искусственной репродукции птиц указанным путем были представлены лишь в 1969 году Браром и Бенуа [174], которые провели ортотопные трансплантации донорского яичника между перепелками двух родственных пород после предварительной стерилизации реципиентов радиационным методом.
В последующие же десятилетия сообщений о проведении аналогичных работ на птицах в доступной литературе не появлялось и лишь в по-

ными [38;84;2б 1 ;274] Следует отметить, что это явление достаточно хорошо известно в трансплантологии и объясняется тем, что реципиенты, происходящие из разных популяций, имеют разную силу иммунных реакций на несовместимые антигены донорского трансплантата (реакций гистонесовместимости) [53; 125; 151].
Вышеизложенные данные позволяют предполагать, что при реци-прокном проведении кожно-трансплантационного теста на гистосовместимость между животными разных популяций, в частности - птицами разных пород и линий, также может наблюдаться асимметричность результатов, свидетельствующая о том, что в настоящем сочетании популяций реципиенты разного происхождения имеют разную силу реакций гистонесовместимости. Поэтому указанную модификацию известного кожнотрансплантационного теста на гистосовместимость в постановке на птицах разных популяций можно рассматривать в качестве простейшего метода сравнительной оценки силы реакций гистонесовместимости у птиц.
Однако из имеющихся литературных данных совершенно не ясно, в каком же именно возрасте следует проводить постановку оценена сила реакции гистонесовместимости у птиц. Так, нельзя не принять во внимание, что постановку кожно-трансплантационного теста на гистосовместимость у молодняка птиц обычно проводят не раньше 2 недельного возраста [1б4;215;245], поскольку только к этому сроку у них заканчивается формирование антигенов гистосовместимости [31; 171 ;279] и становление функций иммунной системы [51;137;205]. С другой же стороны, известно, что результаты реципрокного проведения трансплантаций крупных лоскутов донорской кожи между цыплятами разных пород суточного возраста также бывают асимметричными [38;67; 137]. Наряду с этим отметить, что в доступной литературе не выявлено сообщений о возможности практического использования указанного метода сравнительной оценки силы реакции гистонесовместимости при проведении трансплантаций донорского яичника у