Разработка методов терапии косточковых пород от вирусных заболеваний

• Автор: Богуш, Леонид Юрьевич
• Шифр специальности: 06.01.11
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Кишинев
• Количество страниц: 164 c. : ил

1. История развития состояния изученности методов терапии плодовых культур от вирусных инфекции

1.1. Состояние изученности метода термотерапии плодовых растений от вирусов

1.2. Современные представления о механизмах термоинактивации фитопатогенных вирусов

1.3. Состояние изученности химиотерапии многолетних

растений от вирусных заболеваний

1.4. О механизме действия химических веществ на вирусную инфекцию

2. Материалы и методы.

2.1. Материалы исследований

2.2. Метода исследований

2.2.1. Метода термотерапии плодовых культур

2.2.1.1. Классический метод термотерапии по

A. Campbell (1962)
2.2.1.2. Термотерапия по методу G. Nyland (I960)
и L.Welshj G.. Nyland (1965)
2.2.1.3. Методы микропрививки апексов на сеянцы
2.2.1.4. Метод укоренения косточковых пород после термотерапии в культуре in vitro
2.2.2. Подготовка растений косточковых пород к термотерапии
2.2.3. Подготовка почвенной смеси
2.2.4. Применение макро и микроудобрений
2.2.5. Применение гиббереллиновой кислоты по 1.1асоб1Э74)

2.2.6. Определение теплотолерантности и динамики роста косточковых пород во время термотерапии
2.2.7. Методика переноса чистого изолята вируса НКП на травянистые и древесные индикаторы
2.2.8. Тест методы
2.2.8.1. Тест на индикаторе Широфуген
2.2.8.1. Иммуно-ферментный метод (Элиза-тест)
2.2.9. Испытание антивирусных веществ
2.2.10. Методика определения активности рибонуклеазы
(РНКазы)
2.2.11. Методика определения количества белка в растениях огурца
2.2.12. Методика электрофореза в полиакриламидном геле
(ПААГе)
3. Разработка методов терапии косточковых пород от вирусных заболеваний
3.1. Совершенствование устройства термокамеры типа ЕА.Т
3.2. Изучение факторов, влияющих на рост и выживание растений косточковых пород в период их термообработки 63
3.2.1. Изучение влияния почвенной смеси на выживание растений вишни, черешни, сливы в процессе термообработ-

3.2.2. Влияние макро и микроудобрений на рост растений вишни, черешни и сливы во время термообработки
3.2.3. Влияние стимулирующих веществ на рост растений вишни, черешни, сливы в период термообработки
3.2.4. Изучение динамики роста и теплотолерантности сортов вишни, черешни и сливы в период термообработки 82
3.3. Разработка способа сохранения и укоренения материала,
полученного в результате термообработки
3.3.1. Результаты инактивации вирусной инфекции в спящих латеральных почках вишни,черешни,сливы по М.P.Welsh
И G. Nyland (1962, 1965)
3.3.2. Разработка метода микропрививок апексов на безвирусные сеянцы
3.3.3. Разработка совместного применения метода термотерапии и культуры тканей
4. Разработка метода химиотерапии косточковых пород
4.1. Изучение воздействия некоторых химических веществ
на вирус НКП в тканях косточковых пород
4.2. Изучение механизма действия химических веществ вируса НКП в тканях растений
Выводы J28-I29
Список литературы I3I-I62

/П1.1+П + м
где: П - больные пошей;
N - количество угнетенных почек;
1,п,м - баллы;
Пп - наивысший балл поражения.
В каждом варианте опь-1та браж по три побега с 10 почками на каждом. После окончания бонитировки зараженные побеги срезали. Таким образом растения использовали многократно.
2.2.8.Иммунно-ферментный метод /Элиза-тест/.
Элиза-тест является новейшим^наиболее чувствительным и надежным серологическим методом выявления и диагностики вирусной инфекции в растениях. Тестирование косточковых пород на наличие вируса НКП выполнено Бондаренко С.С. о использованием сыворотки и методики, разработанных им в отделе вирусологии МНИИП НПО "Кодру" (Бондаренко С.С. отчет МНИИП НПО "Кодру", 1983, Богуш 1.Ю., Чернец А.М., Бондаренко С.С., 1984). Техника выполнения данного метода заключалась в следующем:
Сначала выделяли глобулиновую фракцию из антисыворотки к вирусу. Затем готовился конъюгат этой фракции с энзимом и уже далее проводился тест: 200 мкл глобулинов, разведенных на карбонатном буфере PH 9,6 наносили на плашку /произв. ГДР*/ и выдерживали в термостате 3 часа при 37°С. Затем 4 раза отмывали плашку РВ:, твин-буфером. На отмытую плашку наносили 200 мкл тестируемого материала, предварительно растертого в ступке с буфером в соотношении 1:10 и выдерживали на плашке в течение ночи при 4°С. Отмывку
* Плашки для проведения ЭЖЗА-теста были получены от про&.Кегле-ра /ГДР/.