Усовершенствование элементов технологии получения регенерантов для создания удвоенных гаплоидов моркови : Daucus carota L.

• Автор: Котлярова, Оксана Валерьевна
• Шифр специальности: 06.01.05
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 165 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА Е ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Значение и биологические особенности моркови (Dauern Carola L.)

Достижения и перспективы использования методов in vitro в селекции растений

1.3. Получение гаплоидов растений методами биотехнологии и их практическое значение
1.4. Преимущества использования гаплоидов и удвоенных гаплоидов в селекционной работе

1.5. Идентификацмя гаплоидов

1.6. Распространение полиэмбрионии (многозародышевости)

1.7. Апомиксис
1.7.1. Факторы, влияющие на процесс получения удвоенных гаплоидов методом гаплопродюсера
1.7.2. Культура зародышей (эмбриокультура)
1.8. Метод андрогенеза
1.8.1. Культура микроспор
1.8.2. Основные факторы, влияющие на процесс андрогенеза в культуре in vitro
1.9. Культура завязей и семяпочек
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 2. УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ, ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ, СХЕМА И МЕТОДИКИ ОПЫТОВ
2.1. Цель, задачи исследований
2.2. Схема исследований

2.3. Условия проведения исследований
2.3.1. Почвенные и агроклиматические условия проведения исследований
2.3.2. Погодные условия вегетационных периодов 2002-2007 гг.
2.4. Материал и методика проведения исследований
2.4.1. Исходный материал
2.4.2. Методики лабораторных опытов
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ
ГЛАВА 3. ЭФФЕКТИВНОСТЬ МЕТОДОВ ПОЛУЧЕНИЯ
УДВОЕННЫХ ГАПЛОИДОВ МОРКОВИ (.Daucus carota L.)
3.1. Идентификация гаплоидов моркови
3.2. Получение гаплоидов моркови из полиэмбриональных семян.
3.3. Получение семян моркови при индуцированном апомиксисе
3.4. Использование эмбриокультуры для получения апомиктов моркови
3.5. Получение растений-регенерантов моркови в культуре пыльников
3.5.1. Предообработка донорных растений моркови биологически ак-
тивными веществами и регуляторами роста для повышения эффективности культуры пыльников
3.5.2. Уточнение режима стерилизации бутонов моркови для введения
в культуру in vitro

' ’ ' Сортоспецифицность андрогенеза
3.5.4. Питательная среда как индуктор новообразований в культуре
пыльников
3.5.5. Воздействие положительной пониженной температуры на мор-
фогенетическую активность моркови в культуре пыльников
3.5.6 Укоренение побегов моркови полученных в культуре пыльников

3.5.7.

3.6.1.
3.6.2.
3.6.3.

3.6.5.
3.6.6.

Адаптация растений-регенерантов
Получение растений-регенерантов полученных в культуре семяпочек
Предобработка донорных растений биологически активными веществами и регуляторами роста для повышнния эффективности культуры семяпочек
Сортоспецифичность гиногенеза
Питательная среда как индуктор новообразований в культуре
семяпочек
Влияние положительной пониженной температуры на морфогенетическую активность моркови в культуре семяпочек
Укоренение побегов моркови, полученных в культуре семяпочек
Адаптация растений-регенерантов
Цитологический анализ растений-регенерантов
Эффективность методов получения гаплоидов и удвоенных гаплоидов моркови
Характеристика растений-регенерантов моркови и апомиктов
полученных различными способами
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В
СЕЛЕКЦИОННОЙ ПРАКТИКЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

лоидов по сравнению с методом инбридинга. На процесс андрогенеза влияют многие факторы. Условия выращивания, возраст растения-донора, положение цветочной почки на растении, время, прошедшее с начала зацветания, по мнению большинства исследователей, имеет существенное значение для эффективности процесса. Несомненно, состав питательной среды также важен для эффективности процесса, но он имеет меньшее значение, чем стадия развития пыльцы, используемой для андрогенеза. Влияние стимуляторов роста типа ауксинов и цитокининов строго не установлено. В целом можно утверждать, что для представителей семейства паслёновых ауксин можно не добавлять к среде, тогда как виды семейства злаковых и крестоцветных требуют добавления к среде 2,4 дихлорфеноксиуксусной кислоты (2,4 - Д).
Процесс перехода микроспор от гаметофитного на спорофитный путь развития определяется на генетическом уровне, но реализуется в зависимости от конкретных физиологических условий и различных по действию индуцирующих факторов.
Культура пыльцы используется реже, чем культура пыльников. Выход растений-регенерантов ниже в расчёте на один пыльник в случае культивирования пыльцы.
Методом культуры пыльников в разных странах выведены высокоурожайные и устойчивые сорта риса и пшеницы. В Китае такие сорта сейчас занимает площади 170000 га (рис) и 70000 га (пшеница).
В Краснодаре этим же методом получены различные сорта риса, табака. В Поволжье метод культуры пыльников успешно применяли для селекции ячменя и тритикале.
Итак, получение гаплоидов разными способами in vitro позволяет быстро создать гомозиготные линии, и в этом ценность этой технологии для селекции. Некоторый скептицизм, проявляемый селекционерами, связан, в частности, с тем что при использовании F,- поколения рекомбинации могут произойти только в одном мейотическом цикле, а этого недостаточно для