Молекулярное маркирование в селекции риса на устойчивость к пирикуляриозу

• Автор: Ильницкая, Елена Тарасовна
• Шифр специальности: 06.01.05
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Краснодар
• Количество страниц: 99 с. : ил.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8 1Л Понятие молекулярного маркера, основные виды ДНК-маркеров
1.2 Рис {Огуга тИа I.) - ценная культура и модельный организм в молекулярной биологии
1.3 Селекция растений с использованием ДНК-маркеров
1.4 Селекция риса на устойчивость к пирикуляриозу
1.4.1 Пирикуляриоз риса; Устойчивость к заболеванию
1.4.2 Создание резистентных к пирикуляриозу сортов риса
1.4.3 Ген Р'1-Ь - один из эффективных генов устойчивости риса к пирикуляриозу в Краснодарском крае
1.4.4 Гены широкого спектра устойчивости риса к пирикуляриозу П-1, Р1-2, Р1-33
2.МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
2.1 Исходный материал
2.1.1 Родительские формы в программе интрогрессии генов устойчивости
2.1.2 Образцы коллекции исходного материала ВНИИ риса, изученные маркером гена Р1-Ъ
2.2. Подготовка растительного материала и экстракция ДНК
2.3 Молекулярные маркеры, использованные в работе
2.4 Проведение полимеразной цепной реакции и электрофореза продуктов амплификации
2.5 Гибридизация растений
2.6 Оценка устойчивости к пирикуляриозу
2.7 Статистический анализ расщепления
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Интрогрессия генов широкого спектра устойчивости к пирикуляриозу Р1-1, РР2, РРЗЗ в отечественные сорта риса с применением методов маркерной селекции
3.2 Введение гена расоспецифической устойчивости к пирикуляриозу Р1-Ь в генотипы районированных сортов селекции ВНИИ риса Янтарь и Хазар
3.3. Изучение образцов рабочей коллекции ВНИИ риса внутригенной маркерной системой гена Р1-Ъ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Актуальность проблемы. Последнее время все увереннее обсуждается роль ДНК-технологий в ускорении процесса селекции, охране авторских прав селекционеров и защите продукции растениеводства от возможной фальсификации. Только анализ ДНК, который напрямую характеризует геном, а не его фенотипические проявления, может дать устойчивые характеристики растения, практически пригодные для идентификации генотипов, регистрации сортов и маркирования хозяйственно ценных генов и признаков.
Процесс создания новых форм растений базируется на генетическом разнообразии и методах его использования селекционерами. Применение ДНК-технологий позволяет существенно расширить возможности традиционной селекции растений. Проявление молекулярных маркеров нейтрально по отношению к фенотипу, не является тканеспецифичным, и их можно обнаружить на любой стадии развития растений. Методы ДНК-генотипирования и селекции при помощи молекулярных маркеров (marker assisted selection - MAS) позволяют ускорить перенос хозяйственно ценных генов в процессе селекции и обеспечить создание новых сортов с целым комплексом заданных свойств (Хавкин Э.Е., 2003).
Успехи в молекулярной биологии риса (Oryza saliva L.) -благоприятная среда для активного использования маркерных технологий именно для этой культуры. Секвенирование генома риса и клонирование генов позволяют создавать ДНК-маркеры, эффективные в работе практической селекции.
Одним из наиболее вредоносных заболеваний риса на всей территории возделывания, в том числе и России, является пирикуляриоз, вызываемый грибом Pyricularia oryzae Cav. Селекция устойчивых сортов

использованы Rm 527, SSR 140, для Pi-1 - Rm 224, для гена Pi-33 - Rm 72, Rm 310 (таблица 5).
Сиквенс праймерных пар на микросателлитные локусы доступен на сайте:
Rm 224 - F АТС GAT CGA ТСТ ТСА CGA GG;
- R TGC TAT AAA AGG CAT TCG GG.
Rm 72 - F CCG GCG ATA AAA CAA TGA G;
- R GCA TCG GTC СТА ACT AAG GG.
Rm 310 - F CCA AAA CAT TTA AAA TAT CAT G;
- R GCT TGT TGG TCA TTA CCA TTC.
Rm 527 - F GGC TCG АТС TAG AAA АТС CG;
- R TTG CAC AGG TTG CGA TAG AG.
SSR140 - F AAG GTG TGA AAC AAG СТА GCA A;
- R TTC TAG GGG AGG GGT GTA GAA.
Таблица 5. Переносимые гены устойчивости к пирикуляриозу и сцепленные
с ними ДНК-маркеры
Линии-доноры Г ен устойчивости Ми кро сателл итн ы й ДНК-маркер Хромосома
С104-Lac Pi-1 Rm224
С101-А-51 Pi-2 Rm527 SSR140
C101-Lac Pi-33 Rm72 Rm310