Ультраструктурное и морфометрическое исследование печени крыс с карциносаркомой Walker 256 при воздействии циклофосфана

• Автор: Кунц, Татьяна Анатольевна
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 162 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Системные нарушения в организме при опухолевом процессе

1.1.1. Виды и проявления паранеопластических синдромов

1.1.2. Факторы неспецифической эндогенной интоксикации

1.1.3. Роль печени при онкопатологии

1.1.3.1. Изменения печени на фоне паранеопластического синдрома

1.1.3.2. Вторичные опухоли печени и ангиогенез

1.2. Карциносаркома Walker 256 как модель для разработки методов противоопухолевой терапии
1.3. Современные методы противоопухолевой терапии
1.3.1. Антиангиогенная терапия
1.3.2. Цитостатическая химиотерапия
1.3.3. Метрономная терапия
1.3.4. Циклофосфан как противоопухолевый агент
Резюме
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования
2.2. Модель эксперимента
2.3. Методы патоморфологического анализа
2.3.1. Методы свето-оптического исследования
2.3.1.1. Приготовление и окраска парафиновых срезов
2.3.1.2. Стереологический анализ клеточных элементов и микроциркуляторного русла печеночной дольки
2.3.1.3. Морфометрический анализ артериально-венозной системы, пространств Малла и холангиол
2.3.1.4. Оценка интенсивности метастазирования
2.3.2. Электронно-микроскопическое исследование
2.4. Методы статистического анализа

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Морфологическое исследование печени интактных крыс
3.2. Патоморфологические изменения сосудистого русла печени крыс с карциносаркомой Walker 256 в условиях ее спонтанного развития и после воздействия цитостатиком
3.2.1. Морфологические изменения печени крыс Wistar в условиях спонтанного
развития карциносаркомы Walker
Резюме
3.2.2. Морфологические изменения сосудистого русла печени крыс Wistar с
карциносаркомой Walker 256 после воздействия циклофосфаном
Резюме
3.3. Патоморфологические изменения паренхиматозных клеток печени крыс Wistar с карциносаркомой Walker 256 в условиях ее спонтанного развития и после
воздействия цитостатиком
3.3.1 Морфологические изменения гепатоцитов печени крыс Wistar в условиях
спонтанного развития карциносаркомы Walker
Резюме
3.3.2. Морфологические изменения гепатоцитов печени крыс Wistar с карциносаркомой Walker 256 после воздействия циклофосфаном
3.4. Оценка метастатического поражения печени крыс Wistar в условиях спонтанного развития карциносаркомы Walker 256 и после воздействия циклофосфана
3.4.1. Оценка метастатического поражения печени крыс Wistar со спонтанным развитием карциносаркомы Walker
3.4.2. Оценка метастатического поражения печени крыс с карциносаркомой Walker
256 после воздействия циклофосфаном
Резюме
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ СОБСТВЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ПРАКТИЧЕСКОМУ ВНЕДРЕНИЮ
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ПС - паранеопластический синдром
две - синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания
нэп - неспецифическая эндогенная интоксикация
пол - перекисное окисление липидов
АТФ - аденозинтрифосфат
HIF-1 - фактор, индуцируемый гипоксией-
VEGF - фактор роста эндотелия сосудов
TNF-a - фактор некроза опухоли-альфа
IL - интерлейкин
TGF-pi - трансформирующий фактор роста-бета
ЭМ - экстрацеллюлярный матрикс
W256 - Walker
INF-y - интерферон-гамма
NF-kB - ядерный фактор-каппа В
МПД - максимально переносимая доза
CEPs - циркулирующие предшественники эндотелиальных клеток
РНК - рибонуклеиновая кислота
мРНК - матричная рибонуклеиновая кислота
кДНК - комплементарная дезоксирибонуклеиновая кислота
TSP-1 - тромбоспондин-
ЧМ - частота метастазирования
VCAM - молекула клеточной адгезии эндотелия сосудов
VAP - сосудистый адгезивный белок
АФК - активные формы кислорода
ESF - эндотелий-стимулирующий фактор
СОС - синусоидный обструктивный синдром

эффект препарата связан со снижением уровня глутатиона (Gurtoo H. L. et al., 1981; Fang Y. Z. et al., 2002; Townsend D. M. et al., 2003; Tsai-Turton M. et al.,
2007).
Экспериментальное введение высоких доз циклофосфана крысам ухудшает гистоархитектонику печени, вызывает некроз гепатоцитов и лимфомоноцитарную инфильтрацию, уменьшает количество двуядерных гепатоцитов (Саратиков А. С. и др., 2004; Непомнящих Г.И. и др., 2008; Непомнящих Л.М. и др., 2010; Сорокина И. В., 2010). В сыворотке крови отмечено возрастание активности аминотрансфераз, снижение активности щелочной фосфатазы, уменьшение содержания диеновых конъюгатов, имеет место гипербилирубинемия с нарушением глюкуронирования билирубина, гипопротеинемия, гиполипидемия (Sladek N. E. et al., 1972; McDonald G. В. et al., 2003). Показано, что циклофосфан, применяемый по классической схеме, вызывает повреждение стромальных клеток печени, ретикулярных клеток и макрофагов уже через 2 ч после введения, однако, эти изменения обратимы (Anton E. et al., 1997). Действие препарата на макрофаги препятствует выполнению ими цитотоксических функций в отношении опухолевых клеток.
Эндотелиальные клетки синусоидов печени повреждаются метаболитами циклофосфана (Connors Т. A. et al., 1974; Struck R. F. et al., 1975; Ren S. et al., 1997; Молодых О. П. и др., 2011), образующимися в гепатоцитах (DeLeve L. D. et al., 1996). Предполагается, что индуцированное циклофосфаном повреждение эндотелиальных клеток (Iwamoto Y. et al., 1992) связано с таким его побочным эффектом, как усиление критических стадий метастазирования (Петрищев H. Н. и др., 1999; Yamauchi K. et al.,
2008). С действием больших доз циклофосфана связывают возникновение вено-окклюзивной болезни в печени (Beltinger J. et al., 2006). Токсичность также может быть усугублена анемией и взаимодействием с другими препаратами (другими воздействиями). Прямой связи анемии с веноокклюзионной болезнью не обнаружено, однако, считается, что эндотелиальные клетки демонстрируют большую чувствительность к токсическим эффектам циклофосфана в присутствии локальной гипоксии (Beltinger J. et al., 2006).
В последнее время противоопухолевая активность циклофосфана
используется в режиме метрономной терапии многих видов онкопатологии.