Сравнительные характеристики дендритных клеток человека, дифференцированных in vitro, и проявляющих иммуностимулирующие или иммунорегуляторные свойства

• Автор: Каралкин, Павел Анатольевич
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 106 с. : 24 ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Дендритные клетки — ключевое звено в первичном иммунологическом распознавании

1.1.1. Типы дендритных клеток и их функциональная специализация в организме

1.1.2. Клеточные взаимодействия в процессе развития первичного иммунного ответа. Роль дендритных клеток

1.1.3. Возможные механизмы участия дендритных клеток

в негативной регуляция иммунного ответа

1.2. Особенности экспрессии генов в дендритных клетках

1.2.1. Транскриптомный анализ в изучении генной экспрессии

1.2.2. Экспрессия генов, отвечающих за иммунологические функции дендритных клеток
1.3. Перспективы клинического применения дендритных клеток
1.3.1. Способы создания терапевтических вакцин на основе дендритных клеток
1.3.2. Вакцины на основе дендритных клеток в лечении онкологических и хронических инфекционных заболеваний
1.3.3. Возможности клинического использования дендритных клеток, обладающих иммунорегуляториыми свойствами
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Биологический материал
2.1.1. Кровь
2.1.2. Опухолевая ткань
2.2. Культуры клеток
2.2.1. Дифференцировка дендритных клеток в культуре

2.2.2. Смешанные культуры лимфоцитов и дендритных клеток
2.2.3. Получение и культивирование первичных культур опухолевых клеток
2.2.4. Культура фибробластоподобных мезенхимальных стволовых клеток
2.2.5. Сокультивирование ДК с мезенхимальными стволовыми клетками и клетками первичной опухолевой культуры
2.3. Проточная цитофлуориметрия
2.3.1. Анализ поверхностных и внутренних маркеров клеток
2.3.2. Оценка пролиферации СБ4+ Т-лимфоцитов
2.3.3. Измерение ПТИ-у -продуцирующих Т-лимфоцитов
2.3.4. Определение активности эндоцитоза
2.4. Микроскопия
2.5. Иммуноферментный анализ
2.6. Транскриптомный анализ
2.6.1. Выделение и анализ РНК
2.6.2. Определение качества РНК
2.6.3. Синтез комплементарной ДНК (кДНК)
2.6.4. Синтез и очистка меченой комплементарной РНК (кРНК)
2.6.5. Гибридизация кРНК
2.6.6. Промывка чипов после гибридизации кРНК
2.6.7. Получение и первичная обработка транскриптомных данных
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
3.1. Изменение морфологии и экспрессии поверхностных маркеров при созревании дендритных клеток
3.2. Секреция 1Ь-12 дендритными клетками до и после их созревания
3.3. Эндоцитоз микро- и наноразмерных частиц дендритными клетками
3.4. Влияние секреторных факторов, продуцируемых клетками почечноклеточной карциномы и мезенхимальными стволовыми клетками,