Морфологическая характеристика репаративных процессов в коже при действии митохондриально-направленного антиоксиданта SkQ1

• Автор: Демьяненко, Илья Александрович
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 150 с. : ил.

Содержание

Список сокращений

Введение

Глава I. Обзор литературы

1. Репаративная регенерация кожи

1.1. Заживление кожных ран

1.1.1. Стадия воспаления

1.1.2. Стадия новообразования соединительной ткани

1.1.3. Стадия ремоделирования новообразованной соединительной ткани18

1.2. Заживление ран при внутриутробном развитии млекопитающих

1.3. Раневое заживление при физиологическом старении организма. Заживление ран как показатель биологического возраста
1.4. Патологическое заживление ран
1.4.1. Хронические раны. Заживление при сахарном диабете
1.4.2. Гипертрофические и келоидные рубцы
2. Активные формы кислорода и азота
2.1. Активные формы кислорода
2.2. Активные формы азота
2.3. Повреждающее действие активных форм кислорода и азота. Оксидативный и нитрозотивный стрессы
2.4. Роль активных форм кислорода в процессах внутриклеточной передачи сигналов
3. Антиоксиданты
4. Митохондриально-направленные антиоксиданты
5. Роль активных форм кислорода в регуляции репаративной регенерации кожи и развитии длительно незаживающих ран. Применение антиоксидантов для коррекции нарушений репаративных процессов
Глава II. Материалы и методы

Глава III. Результаты исследования
1. Влияние длительного перорального приема 8кС>1 на репаративные процессы в кожных ранах у старых мышей
2. Влияние длительного перорального приема 8к0>1 на процесс заживления ран на модели сахарного диабета II типа у мышей
3. Влияние перорального введения 8к(1 на динамику изменения клеточного состава инфильтрата в различных фазах асептического воспаления у мышей
4. Эффект локального введения 8кС>1 на репаративные процессы в нолнослойных
кожных ранах у крыс
Глава IV. Обсуждение результатов
Выводы
Список литературы
Приложения

Список сокращений
АФА - активные формы азота
АФК - активные формы кислорода
ГКИТ - гигантские клетки инородных тел
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
КОЕ-Ф - колониеобразующие единицы фибробластов
МДА - малоновый диальдегид
РНК - рибонуклеиновая кислота
СДС - синдром диабетической стопы
ФМЛП - формил пептиды
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота
ADP - (adenosine diphosphate) аденозиндифосфат
ATP - (adenosine triphosphate) аденозинтрифосфат
EGF - (epidermal growth factor) эпидермальный фактор роста
FAD - (flavin adenine dinucleotide) флавинадениндинуклеотид
FGF- (fibroblast growth factor) фактор роста фибробластов
FMN - (flavin mononucleotide) флавинмононуклеотид
ICAM - (intercellular adhesion molecule) межклеточная молекула адгезии
Ig - иммуноглобулин
IL - интерлейкин
LFA - (lymphocyte function-associated antigen) «антиген, связанный с функционированием лимфоцитов»
МСР - (monocyte chemotactic protein) хемотаксический белок моноцитов
MIP - (macrophage inflammatory protein) воспалительный белок макрофагов
ММР - (matrix metalloproteinase) матриксная металлопротеаза
NAD - (nicotinamide adenine dinucleotide) никотинамидадениндинуклеотидфосфат
NGF - (nerve growth factor) фактор роста нервов
NOS - (nitric oxide synthase) синтаза оксида азота
PBS - (phosphate buffered saline) забуференный фосфатом солевой раствор PDGF - (platelet-derived growth factor) тромбоцитарный фактор роста SOD - (superoxide dismutase) супероксиддисмутаза TGF - (transforming growth factor) трансформирующий фактор роста

различные производные пластохинона, конъюгированные с несколькими проникающими катионами (рис. 7). Группа этих соединений получила тривиальное название SkQ. Большинство проведенных к настоящему времени исследований были посвящены изучению веществ этой группы, обладающих наивысшей способностью к проникновению через билипидные мембраны: 10-(б'-пластохинонил) децнлтрифенилфосфония (SkQ 1) и 10-(пластохинонил) децилродамина 19 (SkQRl). В исследованиях in vitro было показано, что SkQ 1 и SkQRl легко проникают через бислойную фосфолипидную мембрану, через мембраны митохондрий и внешнюю клеточную мембрану, электрофоретически накапливаются в изолированных митохондриях и митохондриях живых клеток. В наномолярных концентрациях они проявляют высокую антиоксидантную активность в водных растворах, в липидных мицеллах, в изолированных митохондриях и в клетках, а также предотвращают окисление кардиолипина митохондрий под действием гидроксильного радикала. Кроме того в культуре клеток HeLa и фибробластов кожи человека различные формы SkQ эффективно ингибировали апоптоз и некроз, вызванные АФК (Антоненко Ю.Н. и др., 2008; Antonenko Y.N. et al., 2008).
Исследования с использованием SkQ 1 и SkQRl также показали, что данные антиоксиданты проявляют проокендантную активность в области гораздо более высоких (микромолярных) концентраций, по сравнению с MitoQ, что обуславливает наличие у них очень широкого диапазона между минимальными антиоксидантными и прооксидантными концентрациями. У MitoQ, данный диапазон гораздо меньше благодаря значительно более низкой ангноксидантной и более высокой прооксидантной активности (Антоненко Ю.Н. и др., 2008; Antonenko Y.N. et al., 2008).
Эксперименты in vivo с применением SkQl и SkQRl показали, что эти антиоксиданты оказывают выраженное защитное действие на моделях различных заболеваний у животных, сопровождаемых развитием окислительного стресса. Среди данных заболеваний - инфаркт почки и сердца, сердечная аритмия, ишемический инсульт, рабдомиолиз, увеит, катаракта и глаукома (Архипова Л.Т. и др., 2008; Бакеева Л.Е. и др., 2008; Plotnikov E.Y. et al., 2011). Кроме того, длительное введение SkQl подавляло спонтанное развитие опухолей у мутантных мышей с дефектным белком р53 (Агапова Л.
С. и др., 2008). Показано также, что SkQl при длительном приёме оказывает значительный геропротекторный эффект у представителей различных таксономических групп (Podospora anserina, Ceriodaphnia affinis, Drosophila mdanogaster, Nothobnmchius furzeri, Mus muscnlus), а также в моделях преждевременного старения у животных (крысы линии OXYS, мутантные мыши с нарушенной способностью к репарации митохондриальной ДНК). Геропротекторное действие SkQl выражалось в увеличении