Изменение пространственной организации хромосомы 6 в ядрах трофоцитов и клеток слюнных желез Calliphora erythrocephala Mg. (Diptera: Calliphoridae) в процессе политенизации

• Автор: Коханенко, Алина Андреевна
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 118 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Архитектура хромосом в ядре

1.1.1 История развития представлений о расположении хромосом в ядре

1.1.2 Современные представления о ядерной архитектуре. Хромосомные территории и их расположение в пространстве ядра

1.1.3 Территории активных и неактивных генов в ядре

1.1.4 Взаимодействие хромосомных территорий и отдельных генетических локусов

1.1.5 Изменение архитектуры ядра в ходе клеточной дифференцировки

1.1.6 Современные модели пространственной организации ядра

1.2 Ядрышко - динамичная структура ядра
1.3 Анатомо-физиологическая организация Diptera. Политенизация ядер Diptera
1.3.1 Слюнные железы Diptera 3
1.3.2 Особенности оогенеза Diptera 3
1.3.3 Политенизацияядер Diptera 3
1.4 Пространственная организация хромосом в ядре у представителей
Diptera
Глава 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Объект исследования
2.2 Получение хромосомоспецифичной ДНК хромосомы 6
2.3 Приготовление ДНК-зонда хромосомы 6 С. erythrocephala
2.4 Амплификация кластера рибосомных генов С. erythrocephala
2.5 Получение ДНК-зонда рДНК С. erythrocephala
2.6 Двуцветная 3D флуоресцентная in situ гибридизация (3D FISH) ДНК хромосомы 6 и генов рРНК с политенными хромосомами трофоцитов и
клеток слюнных желез С. erythrocephala
2.7 Получение недавленных препаратов ядер трофоцитов и клеток слюнных желез С. erythrocephala, окрашенных азотнокислым серебром
2.8 Приготовление препаратов для изучения ультраструктуры ядер трофоцитов С. erythrocephala
2.9 Микроскопический анализ
Глава 3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Пространственная организация хромосомы 6 в ядрах трофоцитов
С. erythrocephala
3.2 Ядрышки в ядрах трофоцитов С. erythrocephala на стадии с вторичной ретикулярной структурой
3.3 Пространственная организация ядер клеток слюнных желез
С. erythrocephala
3.4 Организация ядрышка в пространстве ядер клеток слюнных желез
С. erythrocephala
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ЯО-хромосома - ядрышкоорганизующая хромосома; ЯОР - ядрышкоорганизующий район;
ФЦ - фибриллярный центр;
ПФК - плотный фибриллярный компонент;
ГК - гранулярный компартмент;
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота;
РНК - рибонуклеиновая кислота;
рДНК - рибосомная дезоксирибонуклеиновая кислота; ПЦР - полимеразная цепная реакция;
PBS - phosphate buffer saline;
SSC - saline sodium citrate;
БСА - бычий сывороточный альбумин;
п.н. - пар нуклеотидов;
т.п.н. - тысяч пар нуклеотидов.

трахей, первыми этапами склеротизации кутикулы и завершающуюся куколочной линькой и переходом в куколочную стадию. В это время лизируется большая часть личиночных органов и из имагинальных дисков формируются органы взрослого насекомого - имаго (Sehnal, 1985; Richards, Hoffman 1986).
1.3.1 Слюнные железы Diptera
В анатомо-физиологической организации слюнных желез видов Diptera можно выделить ряд общих черт, таких как подразделение на отделы, секреторная активность и гормональный контроль физиологических процессов. Наиболее полное и детальное описание антомических и функциональных особенностей слюнных желез насекомых проведено для разных видов семейства Drosophilidae. Слюнная железа дрозофил представлена парным органом, расположенным в передней части тела личинки. Каждая железа содержит в среднем 128 клеток, однако, это число может изменяться в зависимости от условий культивирования насекомых (Berendes et al., 1978). Обе железы одной особи, как правило, имеют одинаковую морфологию, хотя и не всегда. Функции личиночных слюнных желез до середины третьего возраста неясны. Известны многочисленные указания на то, что в слюнные железы принимают участие в процессе пищеварения (Fraenkel, 1952). Но все же наиболее заметной функцией слюнной железы в конце третьего личиночного возраста является синтез гликопротеинового секрета, который выделяется в момент формирования пупариума, с его помощью предкуколка многих видов дрозофил приклеивается к субстрату (Frankel et al., 1953). Незадолго до начала формирования пупариума секрет выходит в проток, где лежит в виде толстого тяжа из-за чего железа сильно раздувается (Zhimulev et al., 1975; Колесников и др., 1985). В момент эверсии дыхалец личинка сжимается, и секрет изливается из протока слюнных желез наружу. Через несколько минут