Роль активных форм кислорода в регуляции Са2+-активируемой калиевой проницаемости эритроцитов человека

• Автор: Трубачева, Оксана Александровна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 94 с. : 29 ил.

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ АФК - активные формы кислорода ГП - глутатионпероксидаза ГТФ - гуанозинтрифосфат ГЦ - гуанилатциклаза

ИДЭ - индекс деформируемости эритроцитов ИТФ - инозитолтрифосфат

К+(Са2+)-каналы) - Са2+-активируемые К+ - каналы НП - нитропруссид натрия Н202 - перекись водорода Ог’- супероксид-анион

ПК-G - цГМФ-активируемая протеинкиназа

ПК-C - протеинкиназа-С

СОД - супероксиддисмутаза

ФДЭ - фосфодиэстераза

ФЛ-С - фосфолипаза С

ФМА - форбол-меристат-ацетат

цАМФ - циклический 3:5-аденозинмонофосфат

цГМФ - циклический 3:5-гуанозинмонофосфат

eNOS -эндотелиальная NO-синтаза
iNOS - индуцибельная NO-синтаза
L-NMMA- N-monomethil-1-argenine
L-ФЭ - L-фенилэфрин
NO - оксид азота
NOS -NO-синтаза
С1-ССР - карбонилцианид-ш-хлорфенилгидразон

Оглавление
Оглавление
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1Л. Образование и роль активных форм кислорода в клетке
1.2. Общая характеристика Са2+-активируемых калиевых каналов мембраны эритроцитов
1.3. Регуляция Са2+-активируемых калиевых каналов эритроцитов
1.4. Нарушение морфофункциональных свойств эритроцитов у больных артериальной гипертензией в сочетании с сахарным диабетом 2 типа
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
2.1. Объект исследования
2.2. Получение эритроцитов
2.3. Использованные растворы и реактивы
2.4. Метод регистрации мембранного потенциала в суспензии эритроцитов
2.4.1. Получение гиперполяризационного ответа эритроцитов,
индуцированного кальциевым ионофором А23
2.5. Спектрофотометрический метод
2.5.1. Определение продукции супероксид-аниона
2.5.2 . Регистрация изменения объема эритроцитов
2.6. Исследование деформируемости эритроцитов
2.7. Статистическая обработка полученных данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЯ..
3.1. Влияние супероксид-аниона и перекиси водорода на Са2+ -зависимую калиевую проницаемость мембраны эритроцитов здоровых доноров
3.1.1. Роль перекиси водорода в адренэргической регуляции Са2+ -зависимой калиевой проницаемости эритроцитов здоровых доноров
3.2. Влияние оксида азота на Са2т-зависимую калиевую проницаемость мембраны эритроцитов здоровых доноров
3.2.1. Влияние нитропруссида натрия на Са2+-зависимую калиевую проницаемость мембраны эритроцитов
3.2.2. Влияние Ь-аргинина на Са2+ -зависимую калиевую проницаемость мембраны эритроцитов
3.2.3. Влияние дибутирил-цГМФ на Са2+-зависимую калиевую проницаемость мембраны эритроцитов
3.2.4. Влияние ингибиторов фосфодиэстераз на Са2+-зависимую калиевую проницаемость мембраны эритроцитов
3.3. Вклад Са2+-зависимой К+-проницаемости в деформируемость эритроцитов

3.4. Влияние активных форм кислорода на Са2~- зависимую калиевую проницаемость эритроцитов больных артериальной гипертензией в сочетании с сахарным диабетом 2 типа
3.4. Влияние активных форм кислорода на Са2+- зависимую калиевую проницаемость эритроцитов больных артериальной гипертензией в сочетании с сахарным диабетом 2 типа
3.4.1. Влияние супероксид-аниона и перекиси водорода на Са2+ -зависимую калиевую проницаемость мембраны эритроцитов больных артериальной гипертензией в сочетании с сахарным диабетом 2 типа
3.4.2. Роль перекиси водорода в агадренэргической регуляции Са2+-активируемых калиевых каналов эритроцитов больных артериальной гипертензии в сочетании сахарным диабетом 2 типа.
3.4.3. Влияние нитропруссида натрия на Са2+- зависимую Кч-проницаемость эритроцитов больных артериальной гипертензией в
сочетании с сахарным диабетом 2 типа
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

2.5. Спектрофотометрический метод
2.5.1. Определение продукции супероксид-аниона
Продукцию супероксид-аниона системой ксантин-ксантиноксидаза оценивали спектрофотометрически в бесклеточной среде. В одну кювету объемом 1 мл, содержащую среду N. добавляли: 10‘4 М ксантина, 10 м11/ мл ксантиноксидазы и 5*10"5 М цитохрома с. Измерения проводились против кюветы, содержащей среду N и цитохром с. По степени восстановления цитохрома с при 550 нм оценивали продукцию супероксид-аниона (рис.2).
Рисунок 2 Спектры поглощения восстановленного цитохрома с в присутствии 10'4 М ксантина и 10 мИ/ мл ксантиноксидазы в зависимости от времени инкубации
Другим продуктом реакции с участием ксантиноксидазы является перекись водорода, что находит свое отражение в снижении содержания супероксид-аниона.
Добавление к среде И, содержащей ксантин, ксантиноксидазу и цитохром с, каталазы (454 и/ мл), не вызывало снижения содержания супероксид-аниона (рис.З).