Изучение взаимосвязи структуры и функции маутнеровских нейронов золотой рыбки при действии амилоида

• Автор: Коканова, Надежда Александровна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 170 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Амилоид, его природа и свойства

1.1.1. Фрагменты бета-амилоидного пептида

1.1.2. Агрегация бета-амилоидного пептида

1.2. Механизмы действия бета-амилоида на клетку

1.2.1. Оксидативный стресс

1.2.2. Митохондрии

1.2.3. Кальциевый гомеостаз

1.2.4. Механическое действие агрегатов бета-амилоида на физические свойства мембран
1.2.5. Действие бета-амилоида на дендриты и синапсы
1.3. Способы защиты нейронов от действия бета-амилоида
1.3.1. Компенсаторная терапия
1.3.2. Подходы, основанные на использовании антиоксидантов
и белков теплового шока
1.3.3. Вещества, влияющие на структуру бета-амилоида
1.4. Модели для изучения действия бета-амилоида
1.5. Преимущества маутнеровских нейронов как модели для изучения действия бета-амилоида на клетку
1.5.1. Взаимосвязь между структурой и функцией
маутнеровских нейронов в норме
1.5.2. Структурные перестройки маутнеровских нейронов при экспериментальных воздействиях
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследования
2.2. Методы исследования , ..'

2.2.1. Тестирование моторной асимметрии золотых рыбок
2.2.2. Вестибулярная билатеральная стимуляция
2.2.3. Зрительная стимуляция
2.2.4. Схема выработки адаптированного состояния
маутнеровских нейронов золотых рыбок
2.2.5. Фармакологические воздействия
2.2.6. Приготовление ткани мозга для гистологического
изучения
2.2.7. Приготовление парафиновых срезов мозга для гистохимического окрашивания
2.2.8. Методика трехмерной реконструкции маутнеровских
нейронов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
ЗЛ. Исследование агрегированного фрагмента Ар25-35 in vitro и
влияние его аппликации на МН
3.1.1. Электронно-микроскопическая идентификация
амилоида
3.1.2. Изучение связи структуры и функции МН при
аппликации агрегированного фрагмента Ар
3.2. Влияние сенсорных стимуляций на функциональную активность МН и структуру их отдельных компонентов после аппликации фрагмента Ар25_з5
3.2.1. Морфофункциональное исследование МН после аппликации агрегированного фрагмента Ар25-35 и
вестибулярной стимуляции
3.2.2. Морфофункциональное исследование МН после аппликации агрегированного фрагмента Ар2з-35 и зрительной стимуляции

3.3. Влияние фрагмента бета-амилоида с обратной последовательностью (АР35.25) на морфофункциональные характеристики МН
3.3.1. Электронно-микроскопическая идентификация фрагмента Ар35
3.3.2. Морфофункциональное исследование МН после
аппликации фрагмента АР35
3.4. Исследование устойчивости МН рыбок, адаптированных к длительной стимуляции, к амилоидозу
3.4.1. Морфофункциональное исследование МН адаптированных к вестибулярной стимуляции рыбок после аппликации фрагмента Ар25-35 и утомляющей вестибулярной стимуляции
3.4.2. Морфофункциональное исследование МН адаптированных к зрительной стимуляции рыбок после аппликации фрагмента АР25.35 и утомляющей зрительной стимуляции
3.4.3. Морфофункциональное исследование МН адаптированных к вестибулярной стимуляции рыбок после аппликации фрагмента АР25.35 и утомляющей зрительной стимуляции
3.5. Влияние дофамина на морфофункциональные состояния
МН, подвергнутых действию фрагмента АР25
3.5.1. Электронно-микроскопическое исследование совместного инкубирования агрегированного фрагмента АР
и дофамина in vitro
3.5.2. Морфофункциональное исследование МН после аппликации дофамина и агрегированного фрагмента Ap2s-35.

отложения а-синуклеина при инкубированнии срезов мозга крыс, предварительно обработанных гербицидом paraquat.
Несмотря на то, что катехоламины и их производные, несомненно, не только ингибируют образование фибрилл, но и разрушают уже существующие нити, механизм их действия все еще остается недостаточно изученным. Возможно, разрушение нитей происходит в результате нековалентных взаимодействий катехолов либо с растворимыми олигомерами, находящимися в состоянии равновесия с фибриллами, либо с самими фибриллами, что приводит к образованию стабильных, растворимых олигомеров.
Рядом авторов были получены данные о том, что дофаминовые агонисты или блокаторы моноаминооксидазы, способные увеличивать уровень дофамина в мозге, могут оказывать защитное действие на нейроны. Полагают, что этот эффект может быть связан с ингибированием полимеризации а-синуклеина катехоламинами, хотя существуют и другие объяснения наблюдаемого эффекта (Muralikrishnan, Mohanakumar, 1998). Таким образом, повышение уровня дофамина может влиять на развитие данного заболевания. Например, увеличение его уровня может приостанавливать развитие патологии в результате ингибирования полимеризации а-синуклеина или, напротив, оказывать негативное действие на клетку в результате образования токсичных продуктов окисления данного нейротрансмиттера (Li et. al., 2004).
В любом случае, полученные данные позволяют лучше понять механизмы, лежащие в основе заболеваний амилоидной природы, в частности болезни Альцгеймера и Паркинсона, а также, возможно, выработать новые подходы к лечению и коррекции данных невропатологий. Если фибриллярная форма белков способствует нейродегенеративным процессам, то ее разрушение, в частности, катехолами, может замедлять или даже обращать развитие данного заболевания. Однако, если продукты распада данных фибрилл нейротоксичны, то накопления белковых агрегатов,