Активация мукозального иммунитета легких неинфекционными стимулами

• Автор: Концевая, Галина Владимировна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 134 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Механизмы неспецифической иммунной защиты в легких

1.2. Иммунный ответ на бактериальный липополисахарид

1.3. Эндокринный ответ на активацию иммунитета

1.4. Различия в реакции мукозального иммунитета на инфекционные стимулы у мышей с преобладанием ТЫ- или ТЬ2-типов иммунного ответа

1.5. Модуляция иммунных реакций социальными сигналами

1.6. Реакция мукозального иммунитета легких на наночастицы

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования и план проведения экспериментов
2.1.1. Эксперимент 1. Исследование нейроэндокринного ответа и реакции мукозального иммунитета легких самцов на интраназальную аппликацию мочи самок и бактериального липополисахарида
2.1.2. Эксперимент 2. Иммуно-эндокринная реакция на интраназалыюе введение мочи самок и иммуногенных стимулов у самцов мышей, различающихся по типу иммунного ответа
2.1.3. Эксперимент 3. Иммуно-эндокринная реакция самцов на запах полового феромона (2,5-диметилпиразин) и мочи самок
2.1.4. Эксперимент 4. Реакция мукозального иммунитета легких и эндокринный ответ на интраназальную аппликацию суспензии нано-
и микроразмерных частиц Таркосила
2.1.5. Эксперимент 5. Реакция мукозального иммунитета легких и

эндокринный ответ на хроническую экспозицию аэрозолем наночастиц
Таркосила 25 у самцов мышей, различающихся по типу иммунного
ответа
2.2. Методики исследования
2.2.1. Сбор и хранение мочи самок
2.2.2. Подготовка наноматериала
2.2.3. Гистологическое исследование ткани легкого
2.2.4. Подсчет общего числа лейкоцитов в БАЛ
2.2.5. Определение концентрации интерлейкина-ф (ИЛ-ф) в тканях легких и гипоталамуса
2.2.6. Определение концентрации цитокинов интерлейкина-ф (ИЛ-ф), гранулоцитарно-макрофагального колиниестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) и фактора некроза опухолей-а (ФНО- а) в БАЛ
2.2.7. Мультиплексный анализ цитокинов в БАЛ
2.2.8. Определение концентрация белка в БАЛ
2.2.9. Определение пероксидазной активности в БАЛ
2.2.10. Определение концентрации кортикостерона в плазме крови
2.2.11. Определение концентрации тестостерона в плазме крови
2.2.12. Статистический анализ данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Иммуно-эндокринная реакция на интраназальную аппликацию мочи самок и бактериального ЛИС (Эксперимент 1) .
3.1.1. Лейкоцитарная интервенция в легкие
3.1.2. Содержание интерлейкина-ф в тканях легкого и гипоталамуса
3.1.3. Содержание кортикостерона в плазме крови
3.1.4. Содержание тестостерона в плазме крови
3.1.5. Интегративная иммуно-эндокринная реакция на мочу самок и бактериальный липополисахарид
3.2. Зависимость иммуно-эндокринной реакции на хемосигналы
самок и бактериальный липополисахарид от генотипа
самцов (Эксперимент 2)
3.2.1. Общее число лейкоцитов в БАЛ
3.2.2. Концентрация белка в БАЛ
3.2.3. Кортикостерон в плазме крови
3.2.4.Тестострон в плазме крови
3.3. Иммуно-эндокринные эффекты суточной экспозиции
запахом самок и феромоном стресса самок мышей (Эксперимент 3)
3.3.1. Показатели БАЛ
3.3.2. Количество лейкоцитов в крови
3.3.3. Тромбоциты в крови
3.3.4. Кортикостерон в плазме
3.3.5. Концентрация тестостерона в плазме
3.4. Реакция мукозального иммунитета легких и эндокринный ответ на иитраназальную аппликацию суспензии нано- и микроразмерных частиц Таркосила 25 (Эксперимент 4)
3.4.1. Показатели БАЛ
3.4.2. Интегральная реакция мукозального иммунитета легких
3.4.3. Количество лейкоцитов в крови
3.4.4. Кортикостерон в плазме крови
3.4.5. Тестостерон в плазме крови
3.5. Иммуно-эндокринная реакция на многократную экспозицию аэрозолем наночастиц Таркосила 25 у самцов мышей, различающихся по типу иммунного ответа (Эксперимент 5)
3.5.1. Содержание кремния в органах
3.5.2. Показатели бронхоальвеолярного лаважа

хронический бронхит, хроническое обструктивное заболевание легких, а так же может вызывать развитие рака легких (Donaldson et al., 2002; Merget et al., 2002).
Проведенный нами анализ данных литературы показывает, что мукозальный слой легких является своего рода ареной, на которой сталкиваются внешние инфекционные и неинфекционные стимулы с механизмами неспецифической и специфической иммунной защиты. При этом появляются доказательства не только прямого защитного реагирования мукозального иммунитета на попадание патогенов в верхние дыхательные пути, но и реагирование в ответ на сигналы, сопряжённые с повышением инфекционного риска, например на половые феромоны. Но все иммунологические эффекты половых феромонов были получены при многочасовой экспозиции запаховыми стимулами, тогда как защитная реакция на сигналы о повышении инфекционного риска будет иметь реальное адаптивное значение только при ее развитии в короткое время. Это обстоятельство предопределило направление наших исследований, в которых были проанализированы изменения мукозального иммунитета легких у самцов мышей через 2 часа после предъявления запаха мочи половозрелых самок. Еще одним неинфекционным фактором активации мукозального иммунитета являются наночастицы. Несмотря на то, что их провоспалительные эффекты показаны в работах многих авторов, вне поля зрения остаются генетически детерминированные особенности иммунного реагирования, в частности, не исследована роль преобладания клеточного и гуморального иммунных ответов. Поэтому в данной работе было запланировано исследовать состояние мукозального иммунитета при интраназальном введении наночастиц мышам линий C57BL и BALB/c, относящимся, согласно данным литературы, к типичным представителям линий мышей с Thl- и Th2-типами иммунного реагирования.