Роль биологических ритмов в реализации токсических эффектов химических веществ у млекопитающих в эксперименте

• Автор: Мелешин, Марат Игоревич
• Шифр специальности: 03.02.14
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Владикавказ
• Количество страниц: 127 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. БИОРИТМЫ КАК ОСНОВА ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ

ЖИВЫХ ОРГАНИЗМОВ (состояние вопроса)

1.1. Адаптивное значение биологических ритмов

1.2. Научно-методические проблемы оценки риска биоресурсам

(млекопитающим) с позиций биоритмологии

1.3. Теоретико-методологические проблемы изучения растительных

ресурсов с целью поиска новых фитоадаптогенов

Выводы
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Планирование эксперимента с позиций временной организации
биосистем
2.2. Приготовление экстрактов
2.3. Экспериментальная модель токсического гепатита
2.4. Оптимизированные методики определения биохимических показателей печени на фоне острых патологий
2.4.1. Аланин- и аспартаттрансаминазы
2.4.2. Холестерин
2.4.3 Прямой и общий билирубин
2.5. Стандартные методики биохимического контроля
2.5.1. Методика анализа активности щелочной фосфатазы
2.5.2. Определение концентрации общего гемоглобина в крови
2.5.3. Определение гидроперекисей по Гаврилову
2.5.4. Определение малонового диальдегида в эритроцитах
2.5.5. Методика анализа активности супероксиддисмутазы
2.5.6. Методика анализа активности каталазы
2.5.7. Методика анализа активности церулоплазмина
2.5.8. Определение метгемоглобина
2.6. Гистологические исследования
Глава 3. БИОЛОГИЧЕСКИЕ РИТМЫ - ОСНОВА МЕТОДОЛОГИИ ОЦЕНКИ РИСКА БИОРЕСУРСАМ ОТ АНТРОПОГЕННЫХ ЗАГРЯЗНИТЕЛЕЙ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
3.1.1 Годовая динамика гепатотоксичности тетрахлорметана у крыс в эксперименте: биохимический аспект

3.1.2 Годовая динамика гепатотоксичности тетрахлорметана у крыс в эксперименте: гистологический аспект
3.2. Модель оксидативного стресса у животных (циклофосфамид, метотрексат, 5-фторурацил - СМР): комплексные исследования
биологического действия
3.3. Сезонные колебания гематотоксичности соединений СМБ
Выводы
Глава 4. ХРОНОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ПОДХОД В МЕТОДИКАХ ИСПЫТАНИЙ НОВЫХ ГЕПАТОПРОТЕКТОРОВ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
4.1. Изменения гепатозащитных свойств экстракта плодов расторопши пятнистой («Карсила») в течение года
4.2. Опыт изучения новых гепатопротекторов, выделенных из флоры
Центрального Кавказа
Выводы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АлТ - аланинтрансаминаза
АОЗ - антиоксидантная защита
АсТ - аспартаттрансаминаза
АФК - активные формы кислорода
БАВ - биологически активные вещества
ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения
ГП, ROOH - гидроперекиси
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
КТ - каталаза
МДА - малоновый диальдегид МЯ - микроядра
НАДН - никотинамидадениндинуклеотид
НАДФН - никотинамидадениндинуклеотидфосфат
ОС - окружающая среда
ПОЛ - перекисное окисление липидов
ПХЭ - полихроматофильные эритроциты
СОД - супероксиддисмутаза
СОЗ - стойкие органические загрязнители
СОЭ - скорость оседания эритроцитов
ТБК - тиобарбитуровая кислота
ТХМ, ССІ4 - тетрахлорметан
УФ - ультрафиолетовый
ЦП - церулоплазмин
ЩФ - щелочная фосфатаза
CMF - циклофосфамид, метотрексат, 5-фторурацил QSAR - quantitative structure activity relationship

минут растворы спектрофотометрируют при 530 нм. От значения опытной пробы отнимают значение контрольной пробы, результат умножают на коэффициент 875, получая величину концентрации церулоплазмина в мг/л.
2.5.8. Определение метгемоглобина
Метод определения основан на различии спектральных характеристик метгемоглобина, имеющего характерный максимум поглощения при 630 нм, и цианметгемоглобина, имеющего сниженное поглощение света при данной длине волны.
К 3 мл воды прибавляют 100 мкл эритроцитов и оставляют на 30 минут для гемолиза. После добавления 2 мл фосфатного буфера пробы центрифугируют 15-20 минут. Полученный раствор делят поровну в две пробирки: №1 - исходный гемолизат, содержащий оксигемоглобин и, возможно, метгемоглобин (Е]), №2 - гемолизат в который добавляют каплю Кз[Ре(С1Ч)б] (5% раствор) для перевода гемоглобина в мет-форму (Е3). Затем в обе пробы добавляют по капле 5% раствора азида натрия и снова измеряют экстинкцию поглощения растворов (Е2 и Е4). Относительное содержание метгемоглобина в крови (тНЬ) вычисляют по формуле:
тНЪ = (Е! -Е2 / Ез -Е4) * 100 (%). (2.6)
2.6. Гистологические исследования
Свежая печеночная ткань фиксировалась в 10%-ном растворе формалина, обезвоживалась в спиртах возрастающей концентрации, пропитывалась формалином и заливалась в парафиновые блоки. Срезы делались на санном микротоме и окрашивались гематоксилином и эозином.