Биологическое обоснование создания микогербицида на основе фитопатогенного гриба Stagonospora cirsii

• Автор: Сокорнова, Софья Валерьевна
• Шифр специальности: 03.02.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 132 с. : ил.

Оглавление
Введение

Г лава 1. Обзор литературы

1.1. Бодяк полевой как объект исследования

1.2. Современные способы борьбы с бодяком полевым

1.3. Методология создания микопестицидов

1.4. Потенциальные микогербициды для борьбы с бодяком полевым

1.5. Токсины грибов-патогенов бодяка полевого

1.6. Способы и условия культивирования продуцентов микогербицидов.

1.7. Препаративные формы микогербицидов

1.8. Повышение эффективности микогербицидов в полевых условиях

Глава 2. Объекты и методы исследований
2.1. Stagorюspora ЫгзИ
2.2. Бодяк полевой
2.3. Культурные растения
2.4. Подготовка конидиального инокулюма
2.5. Подготовка мицелиального инокулюма
2.5.1 Твердый субстрат
2.5.2 Жидкая питательная среда
2.6. Стабилизация мицелия 5cirsii
2.7. Приготовление композиций
2.7.1 Композиции на основе конидий б'.сгтг
2.7.2 Композиции на основе мицелия Б.сггяП
2.8. Инокуляция листовых высечек
2.9. Инокуляция растений в контролируемых условиях
2.10. Учет развития болезни
2.11. Световая и электронная сканирующая микроскопия
2.12. Выделение фитотоксинов и оценка фитотоксической активности
2.13. Оценка патогенности мицелия Хсгтг в полевых условиях
2.14. Статистическая обработка экспериментальных данных
Глава 3. Патогенные свойства мицелия 5. сг'пш
3.1. Влияние температуры и периода увлажнения листьев на патогенные свойства мицелия У. с/гай
3.2. Развитие инфекционных структур гриба У с1г$П
3.2.1 Инокуляция листьев бодяка полевого конидиями 51 с/гай
3.2.2 Инокуляция листьев бодяка полевого мицелием Усггай
3.2.3 Сравнение динамики развития инфекционных структур при заражении конидиями и фрагментами мицелия б'.сггай
3.3. Определение специализации Б.сшИ
3.4. Роль токсинов при инокуляции бодяка полевого мицелием Ус/гай
3.5. Обсуждение результатов
Глава 4. Способы получения мицелия У.сгтг
4.1. Оптимизация твердофазной ферментации по выходу мицелия и патогенности в отношении бодяка полевого
4.2. Оптимизация жидкофазной ферментации по выходу мицелия и патогенности в отношении бодяка полевого
4.2.1 Выбор источника углерода
4.2.2 Выбор источника азота
4.2.3 Оценка устойчивости мицелия к сушке
4.2.4 Выбор длительности культивирования У с/пуй
4.2.5 Выбор концентраций источников углерода и азота
4.3. Стабилизация мицелия ^сгга/г
4.3.1 Стабилизация мицелия б’.сг'ган, полученного при помощи твердофазной ферментации
4.3.2 Стабилизация мицелия 5. Ыгяп, полученного при помощи жидкофазной ферментации
4.4. Обсуждение результатов
Глава 5. Композиции на основе мицелия Б.Ыгяп
5.1. Добавки к композициям на основе мицелия 5. с/луп, полученного при помощи твердофазной ферментации
5.2. Добавки к композициям на основе мицелия З'.сглуй, полученного при помощи жидкофазной ферментации
5.3. Влияние композиционных добавок на морфологию и развитие инфекционных структур Хсггаг
5.3.1 Кукурузное масло
5.3.2 Ксантан с глицерином
5.4. Обсуждение результатов
Глава 6. Применение композиций на основе мицелия, б'.с/глй' в полевых условиях
6.1. Композиции на основе мицелия Б.Ыгзп, полученного при помощи твердофазной ферментации
6.2. Композиции на основе мицелия Д.сггаи, полученного при помощи жидкофазной ферментации
6.3. Обсуждение результатов
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы

Таблица 2.2 - Способы стабилизации мицелиального инокулюма S.cirsii
Сушка Добавки Содержание добавок в пробе, %
Проточным воздухом в тонком слое при 25-3 0°С —
Аэросил
Пшено
Лиофильная сушка, Thermo Electron РР
Г лицерин
Для определения жизнеспособности инфекционного материала после сушки и хранения его измельчали, готовили на его основе водную суспензию (0,01% Твин 80) и определяли КОЕ (см. раздел 2.5.2 «Жидкая питательная среда»). Оценку патогенности мицелия на этапах оптимизации состава среды проводили экспресс-методом на высечках бодяка из листьев бодяка (см. раздел 2.10 «Учет развития болезни»). Для анализа использовали водную суспензию на основе измельченного высушенного мицелия в концентрации 100 мг/мл для материала, полученного с помощью ТФ, и 2,5 мг/мл для материала, полученного с помощью ЖФ.
2.7. Приготовление композиций
2.7.1 Композиции на основе конидий 5.с/ги’/
Споровую суспензию У cir.su получали смывом конидий водой с поверхности обросших грибом зерен перловой крупы. Для этого их заливали водой, содержащей Твин 80 в концентрации 0,01%, и перемешивали при 180 об/мин на орбитальной качалке в течение 0,5 часа. Затем суспензию отфильтровывали и путем последовательных разведений доводили до концентрации 5x106спор/мл. Количество конидий в суспензии подсчитывали при помощи камеры Горяева.