Инновационные методы видовой идентификации лактобактерий в оценке состояния микробиоты влагалища у беременных женщин

• Автор: Мелкумян, Алина Рантиковна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 123 с. : 37 ил.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования

Методология и методы иследования

Г лава 1. Современные лабораторные методы видовой идентификации влагалищных лактобактерий (обзор литературы)

1.1. Микроэкология влагалища

1.2. Лактобактерии как представители микробиоценоза организма

человека

1.3. Классификация и морфо-фенотипическая характеристика

лактобактерий

1.4. Молекулярно - генетическая характеристика лактобактерий

1.5. Видовая структура лактобактерий влагалища

1.6. Чувствительность лактобактерий к антибактериальным
препаратам
1.7. Лабораторные методы идентификации лактобактерий в оценке
состояния микробиоты влагалища
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 2. Комплексная лабораторная оценка микроценоза влагалища
у обследованных беременных
2.1. Анализ клинико - анамнестических данных беременных
2.2. Комплексная оценка микроценоза влагалища с учетом результатов
микроскопии и культуральной диагностики
2.3. Оценка микроценоза влагалища с учетом результатов метода
количественной ПЦР (тест - система Фемофлор - 16)
Г лава 3. Результаты видового типирования лактобактерий методом
МАЮ1 ТОР М3 и количественной ПЦР
3.1. Видовая идентификация влагалищных лактобактерий методом
времяпролетной масс - спектрометрии
3.2. Сравнительный анализ результатов видового типирования
лактобактерий методом МАЮ1 ТОР М5 и количественной ПЦР

3.3. Биохимическая идентификация лактобактерий на автоматических бактериологических анализаторах
3.4. Морфологическая характеристика влагалищных лактобактерий, выделенных у беременных женщин
3.5. Результаты определения антибиотикочувствительности различных
видов влагалищных лактобактерий диско - диффузионным методом
Глава 4. Особенности видового состава лактобактерий при различных состояниях микробиоты влагалища
4.1. Оценка частоты выявления лактобактерий различными
методами
4.2. Интегральная оценка видового спектра влагалищных лактобактерий с
учетом 345 - идентификации и ПЦР - типирования
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Выводы
Практические рекомендации
Перспективы дальнейшей разработки темы
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
Приложение
Приложение
Приложение
Приложение
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования
Внедрение инновационных технологий в микробиологическую диагностику расширяет наши познания в области медицинской микроэкологии. Впервые исследования микрофлоры влагалища у женщин были проведены
А.Додерлейном в 1892 году. До середины XX века вагинальный микроценоз считался однородным и представленным, в основном, Lactobacillus acidophilus - «палочками Додерлейна». К девяностым годам прошлого столетия было показано, что нормальный микроценоз гениталий женщин репродуктивного возраста неоднороден и представлен как Lactobacillus spp. - 95-98%, так и большой группой условно-патогенных микроорганизмов (УПМ) -Staphylococcus spp., E.coli, G.vaginalis, С.albicans с частотой выявления 10-50% [4,42,58].
У здоровых женщин доминирующими видами микробиоты влагалища являются лактобактерии, преобладающее количество которых, по мнению большинства исследователей, определяет высокий уровень противомикробной защиты [26,47,48]. В последние годы наблюдается снижение частоты воспалительных заболеваний урогенитального тракта женщин, вызванных абсолютными патогенами, в то время как частота оппортунистических инфекций этой локализации неуклонно растет [12,51,131]. Нарушение состава микробиоты влагалища возникает вследствие неблагоприятных внешних воздействий, при подавлении локального и общего иммунитета, при ряде инфекционных и соматических заболеваний, широкого использования антибактериальных и контрацептивных препаратов [12,13,49]. Нарушения вагинальной микрофлоры во время беременности провоцируют восходящее инфицирование плодного яйца, задержку роста плода, преждевременные роды или их сочетание [48,51,69,100,144]. Причиной этого может быть вытеснение лактобактерий из микробиоты влагалища и доминирование условно -патогенной микрофлоры, увеличение общего количества бактерий и местная

организма хозяина, качественные и количественные изменения, возникающие в разных условиях существования [43,55].
Микробиота влагалища является подвижной экосистемой, которая составляет часть нормальной женской физиологии от внутриутробной жизни до самой смерти и оказывает важное влияние на здоровье женщины [178,200]. Наличие некоторых видов микроорганизмов и их способность достигать высокой численности в определенной экологической гильдии, адаптированной к организму женщины, является признаком здоровья [225]. Драматические изменения в соотношениях представителей микробных сообществ во влагалище может привести к патологическим состояниям [110]. В одном из важных разделов в рамках проекта по изучению человеческого микробиома {НОР), говорится, что для того, чтобы понять, насколько изменения в вагинальном микробиоме способны влиять на здоровье женщины, в первую очередь, необходимо изучение бактериального разнообразия микробиоты влагалища в норме и при патологии [207].
Микроценоз влагалища у женщин репродуктивного возраста в норме состоит из постоянно обитающих микроорганизмов (индигенная, автохтонная микрофлора) и транзиторных (аллохтонная, временная микрофлора). Индигенная микрофлора является доминирующей в составе микробиоты по численной представительности, но не отличается видовым разнообразием. Транзиторная микрофлора, напротив, по видовому составу широко разнообразна, хотя их общая численность в норме не велика и не превышает 3 - 5 % от общего пула микробиоты. Доминирование лактобактерий во влагалище обеспечивает состояние колонизационной резистентности (КР) биотопа. Именно КР обеспечивает постоянство количественного и видового состава нормальной микрофлоры, что предотвращает заселение влагалища патогенными микроорганизмами или чрезмерное размножение УПМ, входящих в состав нормального микроценоза, а также их транслокацию за пределы данной экологической ниши.