Некоторые биологические свойства монокультур и сокультивируемых вариаций бактерий рода Enterobacter и Staphylococcus aureus и особенности их действия на перитонеальные макрофаги мышей.

• Автор: Изикаев, Венер Миниварисович
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Челябинск
• Количество страниц: 119 с. : 9 ил.

Оглавление

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Бактерии рода Enterobacter и Staphylococcus aureus в инфекционной патологии человека

1.2. Факторы патогенности бактерий рода Enterobacter и Staphylococcus aureus

1.3. Взаимоотношения микробов с иммунной системой хозяина

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Морфологические, культуральные и биохимические свойства бактерий рода Enterobacter и Staphylococcus aureus
3.2. Факторы патогенности монокультур бактерий рода Enterobacter и Staphylococcus aureus и их сокультивируемых вариаций
3.2.1 .Адгезивная активность
3.2.2.Гемолитическая активность
3.2.3.Лецитиназная активность
3.2.4.ДНК-азная активность
3.2.5. Персистентные свойства монокультур бактерий рода Enterobacter и Staphylococcus aureus и их сокультивируемых вариаций
3.3. Изучение токсигенности и вирулентности монокультур бактерий рода Enterobacter и Staphylococcus aureus и их сокультивируемых вариаций на биологических моделях

3.3.1. «Легочная модель»
3.3.2. Тест «отек лапки»
3.3.3. Модель «петля тонкого кишечника кролика»
3.3.4. Изучение антибиотикорезистентности монокультур бактерий рода Enterobacter и Staphylococcus aureus и их сокультивируемых вариаций
3.4. Генетическая природа некоторых факторов патогенности монокультур бактерий рода Enterobacter, S.aureus и их сокультивируемых вариаций
3.5. Взаимоотношения в системе патоген-хозяин
3.5.1. Влияние монокультур Е.cloacae, Staphylococcus aureus и их сокультивируемых вариаций на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов мышей
3.5.2. Влияние монокультур Е.cloacae и Staphylococcus aureus и их сокультивируемых вариаций на лизосомальную активность перитонеальных макрофагов мышей
3.5.3. Влияние монокультур Е.cloacae и Staphylococcus aureus и их сокультивируемых вариаций на внутриклеточный кислородзависимый метаболизм перитонеальных макрофагов мышей
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования и степень её разработанности
Изучение частоты встречаемости инфекционных заболеваний, вызванных ассоциациями грамотрицательных и грамположительных бактерий, является весьма своевременным. Изменение этиологического спектра возбудителей многие исследователи связывают как с особенностями симбиотических взаимоотношений между бактериями, так и снижением иммунной реактивности организма в условиях ухудшения экологии и селективного воздействия антибактериальных препаратов [86,189,193].
В последние годы показана этиологическая роль целого ряда условно-патогенных бактерий в возникновении инфекционного процесса различной локализации [71,87]. Однако в отношении микробных ассоциаций Enterobacter spp. и Stahpylococcus aureus данный вопрос недостаточно изучен. Практически отсутствуют сравнительные данные о биологических свойствах сокультивируемых вариаций Enterobacter spp. и S.aureus.
Как отмечают некоторые исследователи, инициируя патологический процесс, грамположительные кокки определяют условия для возможного развития в патологическом очаге как в особой экологической нише грамотрицательных микроорганизмов с имеющимся высоким персистентным потенциалом, что повышает вероятность развития тяжелого хронического процесса [36].
Актуальность этой проблемы также обусловлена широким распространением лекарственно-устойчивых штаммов в популяциях условно-патогенных бактерий и приспособлением их к внутреннней среде организма [34,104].

№168, 1978г.). В одной половине чашки Петри вертикальными и
горизонтальными штрихами засевали суточные агаровые монокультуры, а в другой половине эти же культуры сеяли в виде креста и инкубировали при 37°С в течение 24 часов. Штаммы с высокой гемолитической активностью имели зоны гемолиза диаметром 5-8 мм, со средней - 3-5 мм, со слабой - 1-3 мм и с отрицательной - при отсутствии зоны гемолиза
2.4 Тиолзависимый гемолизин бактерий рода Enterobacter и S.aureus определяли на среде, содержащей [61] агар Дифко - 1,2г, ферментативный гидролизат казеина - 0,5г, экстракт кормовых дрожжей сухой - 0,5г, цистеин -0,2г и бульон Хоттингера - 98,0 мл.
Среду стерилизовали при 121 °С в течение 30 минут ex tempore, добавляли 0,2 мл стерильного аминопептида, 5 мл дефибринированной крови кролика, 1,2 мл 4% раствора глюкозы и разливали в чашки Петри. В дальнейшем чашки Петри сушили, уколом сеяли исследуемые культуры и ставили в термостат при 37°С на 2 часа, затем на 24 часа при 4°С. Наличие вокруг колонии зеленой зоны гемолиза свидетельствует о способности штаммов синтезировать тиолзависимый гемолизин.
2.5 ДНК - азную активность бактерий определяли по Jeffries C.D. [1 18]. Для этого брали 3,0 г DNA-агара Difco, 1,0 г агара Difco и 98 мл мясо-пептонного бульона /pH 7,4-7,6/. Полученную смесь стерилизовали при 121 °С в течение 30 минут. Затем разливали в чашки по 12 мл и сушили в термостате при 37°С в течение 30 минут. Посевы суточных культур Enterobacter spp. производились штрихом горизонтальной полоской, а вторая суточная культура S.aureus высевалась вертикальной полоской (контрольные полоски). В центре чашки проводились посевы этих же культур под прямым углом, где и происходило взаимодействие микроорганизмов (опыт). Инкубировали в термостате при 37°С в течение 18-24 часов. Затем в чашки наливали 5-6 мл раствора 1Н НС1 и оставляли на 10 минут. После этого кислоту сливали и учитывали результат. Под действием НС1 образуется непрозрачный белый осадок, а вокруг колоний