Повышение жизнеспособности Yersinia pestis EV в биомассе вакцины

• Автор: Абзаева, Наталья Вячеславовна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Ставрополь
• Количество страниц: 122 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ
Глава 1 ОПТИМИЗАЦИЯ МИКРОБНОЙ СУСПЕНЗИИ Г. речПч ЕУ В ПРОЦЕССЕ ПОЛУЧЕНИЯ ВАКЦИНЫ ЧУМНОЙ ЖИВОЙ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЕЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ (обзор литературы)

1.1 Вакцина чумная живая, характеристические особенности и

пути повышения показателя жизнеспособности, как основной компоненты качества

1.2 Иммуногенность вакцины чумной живой

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Материалы

2.1.1 Характеристика вакцинных противочумных препаратов и
вирулентных культур
2.1.2 Характеристика питательных сред и стабилизаторов
2.1.3 Характеристика лабораторных животных
2.1.4 Использованная аппаратура
2.1.5 Производственные критерии качества вакцины чумной
живой
2.2 Методы исследования
2.2.1 Приготовление экспериментальных серий вакцины чумной
живой
2.2.2 Определение фаз роста микробных клеток У. резШ ЕУ
2.2.3 Определение повреждаемости микробных клеток
2.2.4 Определение жизнеспособности микробных клеток
2.2.5 Подготовка вирулентного штамма
2.2.6 Определение иммуногенности вакцин
2.2.6.1 Изучение иммуногенности в модели феномена
«переживания»
2.2.7 Определение бактерицидной активности полиморфноядерных лейкоцитов
2.2.8 Определение пирогенности
2.2.9 Определение специфической безопасности
2.2.10 Определение термостабильности
2.2.11 Определение потери в массе при высушивании
2.2.12 Статистическая обработка материала
Глава 3 ВЫРАЩИВАНИЕ ПОПУЛЯЦИИ КЛЕТОК ВАКЦИН-
НОГО ШТАММА ¥. ренИх ЕУ ПРИ ТЕМПЕРАТУРЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ (21±1) °С И ПОЛУЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ СЕРИЙ ВАКЦИНЫ
Глава 4 СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РЕГЛАМЕНТИРОВАН-
НЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ И КОНТРОЛЬНЫХ СЕРИЙ ВАКЦИНЫ ЧУМНОЙ
ЖИВОЙ
4.1 Сравнительная характеристика различных серий вакцины
чумной по показателю жизнеспособности
4.2 Анализ термостабильности различных серий препарата
4.3 Анализ динамики жизнеспособности образцов вакцины
чумной живой в зависимости от параметров вакцинной суспензии в условиях длительного температурного воздействия
4.4 Сравнительный анализ различных серий вакцины чумной
живой по степени повреждаемости, жизнеспособности и термостабильности
4.5 Изучение реактогенности различных серий вакцины чумной
живой

Глава 5 ОЦЕНКА ИММУНОГЕННОСТИ ЭКСПЕРИМЕН-
ТАЛЬНЫХ И КОНТРОЛЬНЫХ СЕРИЙ ВАКЦИНЫ ЧУМНОЙ, ИЗУЧЕНИЕ ЦИТОЭНЗИМОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПОЛИМОРФНОЯДЕРНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ БЕЛЫХ МЫШЕЙ НА ФОНЕ ИММУНИЗАЦИИ И ИНФИЦИРОВАНИЯ
5.1 Изучение иммуногенности различных серий вакцины
чумной регламентированным методом
5.2 Изучение иммуногенности различных серий вакцины
чумной в феномене «переживания»
5.3 Оценка цитоэнзимохимических показателей полиморфноядерных лейкоцитов белых мышей, привитых против чумы,
и в различных схемах инфицирования У
5.3.1 Бактерицидная активность полиморфноядерных лейкоцитов
белых мышей, инфицированных возбудителем чумы
5.3.2 Бактерицидная активность полиморфноядерных лейкоцитов
белых мышей, привитых против чумы
5.3.3 Бактерицидная активность полиморфноядерных лейкоцитов
белых мышей, привитых против чумы, после заражения
5.3.4 Бактерицидная активность полиморфноядерных лейкоцитов
белых мышей на модели феномена «переживания»
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

температуре подогрева материала, не превышающей 28 °С. Ампулы с готовым препаратом запаивали под вакуумом и хранили при температуре (4±2) °С.
Для приготовления контрольных образцов производили выращивание в матрацах биомассы штамма К реяНя ЕУ при (27±1) °С. Полученную бакмас-су смывали, разливали и лиофилизировали аналогично экспериментальным образцам.
2.2.2. Определение фаз роста микробных клеток К /?£$/& ЕУ
В пробирки с 5 мл бульона Хоттингера pH 7,1±0,1 засевали по 10 млн. м.к. Засеянные пробирки инкубировали при температуре (27±1) °С и (21±1) °С. Каждые три часа стерильно высевали на пластинки агара часть взвеси. После трех суток инкубации подсчитывали количество выросших колоний, после чего высчитывали длительность периодов роста, число клеточных делений и время одной генерации (Дж. Мейнелл, Э. Мейнелл, 1967; Г Шлегель, 1987).
2.2.3. Определение повреждаемости микробных клеток
Повреждаемость микробных клеток в процессе экспериментальной отработки препарата вакцины чумной живой, полученного в различных условиях выращивания, а также с различным объемом суспензии в ампуле, оценивали электронно-микроскопическим методом (Бондаренко А.И., 1995). Определение проводили после лиофилизации, для чего брали 3 ампулы из разных частей контейнера и разводили 1-2 мл дистиллированной воды в зависимости от объема сухой таблетки. Ресуспендированные пробы отмывали от остатков среды высушивания центрифугированием в течение 15 мин при 4000 х g. Полученные осадки ресуспендировали в 1-2 мл дистиллированной воды и разводили до конечной концентрации 500 млн. микробных клеток на 1 мл.