Иммуногенные и протективные свойства препаратов рекомбинантных аденовирусов, экспрессирующих гены консервативных антигенов вируса гриппа A

• Автор: Есмагамбетов, Ильяс Булатович
• Шифр специальности: 14.03.09, 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 178 с. : ил.

Оглавление

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

Глава I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Грипп: этиология и эпидемиология

1.2. Иммунный ответ при гриппозной инфекции

1.3. Вакцинопрофилактика гриппа

1.4. Генетические вакцины на основе рекомбинантного аденовируса человека пятого серотипа

1.5. Использование рекомбинантного аденовируса для создания

универсальной противогриппозной вакцины

Глава II СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы
2.1.1. Материалы
2.1.2. Методы
Глава III РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Оптимизация аминокислотных последовательностей антигенов М2 и

3.2. Получение рекомбинантных аденовирусов человека пятого серотипа, эффективно экспрессирующих гены антигенов М2 и NP вируса гриппа А
3.3. Изучение экспрессии генов М2 и NP в составе полученных рекомбинантных аденовирусов (Ad5-tet-M2NP и Ad5-tet-M2NP-PEST) в экспериментах in vitro
3.4. Изучение иммуногенности полученных препаратов Ad5-tet-M2NP и Ad5-tet-M2NP-PEST

3.5. Исследование протективных свойств препаратов АсНЛеСМЗИР и Ас15-1еЕМ2КР-РЕ8Т
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
БЛАГОДАРНОСТИ

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ
293НЕК - культура клеток эмбриональной почки человека Ад - аденовирус
АПК - антиген-презентирующая клетка БОЕ - бляшкообразующая единица ДТТ - дитиотреитол
ИКП - инвертированный концевой повтор
ЛД - летальная доза
ПЭГ - полиэтилен гликоль
Твин - полиоксиэтиленсорбитана монолаурат
Трис — гидрооксиметиламинометан
ТЦД - тканевая цитопатическая доза
ЦПД — цитопатическое действие
ЦТЛ - цитотоксический Т-лимфоцит
ЭДТА - этилендиаминтетраацетат
ЭИД - эмбриональная инфекционная доза
ЭР - эндоплазматический ретикулум
А549 - клеточная линия аденокарциномы легких человека
СБ - кластер дифференцировки
СЕБ - культура клеток эмбриональных куриных фибробластов
СМУ - цитомегаловирус
БАРІ - 4,6-диамидин-2-фенилиндол
БС - дендритная клетка
БМЕМ - минимальная среда Игла модифицированная Дельбекко ЕСЕР - ген усиленного зеленого флуоресцирующего белка

США в основном использовались именно они. Для категорий населения с иммунной системой, еще не праймированной гриппом, сплит и субъединичные вакцины являются слабо иммуногенными и требуют двукратного введения (Laver W.G. & Webster R.G., 1976).
Трехвалентные инактивированные вакцины обеспечивают прежде всего, выработку специфических вирус-нейтрализующих антител против гемагглютинина. Некоторые варианты могут индуцировать выработку антител против нейраминидазы. Такие антитела не обладают вирус-нейтрализующей активностью, но ограничивают распространение вируса в организме. Преимуществом инактивированных вакцин является меньшее цисло противопоказаний, по сравнению с аттенуироваными вакцинами, что делает их доступными для пременения людям старше 65 лет и хронически больным. Препараты трехвалентной вакцины обычно вводят внутримышечно (реже внутрикожно). Взрослым старше 9 лет вводят однократно полную дозу, детям от 6 месяцев до 8 лет вводят за два раза с интервалом в 4 недели. В последние годы одобрено производство четырехвалентной сплит-вакцины, включающей в себя дополнительный штамм вируса гриппа В. Таким образом вакцина, включающая штаммы вируса гриппа В обоих линий, позволяет свести до минимума шансы ее неэффективности.
1.З.1.2. Живые аттенуированные вакцины
Основными достоинствами живых аттенуированных вакцин является их способность имитировать естественный инфекционный процесс, а также индуцировать выработку как гуморального, так и клеточного иммунного ответа. Живые аттенуированные вакцины были впервые разработаны в 1960-х годах путем длительного пассирования в куриных эмбрионах в неоптимальных условиях (Maassab H.F., 1967). Полученные ослабленные штаммы вируса были весьма чувствительны к температуре и адаптированы к росту при 25° С, что является средней температурой носовых ходов. Таким образом, репликация таких холодо-адаптированных штаммов ограничена