Разработка биотехнологических параметров по получению протективного, инактивированного антигена Ornithobacterium rhinotracheale

• Автор: Курьянова, Назия Хусаиновна
• Шифр специальности: 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Ульяновск
• Количество страниц: 115 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список условных сокращений

Введение

I Обзор литературы

1.1 Биологические свойства бактерий ОгпШюЬас(егшт гктои-аскеа1е -возбудителей орнитобакгериоза птиц
1.1.1 Морфология, тинкториальные и биохимические свойства Огт(коЬас1епит гЫпо1гаскеа1е

1.1.2 Резервуар и распространение инфекции

1.1.3 Устойчивость бактерий ОгпШюЪас1еНит гк'то1гаскеа1е к инактивирующим веществам

1.2. Характеристика и практическое применение теотропина для инактивации бактерий

1.3 Представления о строении поверхностных структур бактериальных клеток

1.3.1 Строение клеточной стенки бактерий

1.3.2 Строение цитоплазматической мембраны
1.4 Дезинтеграция бактерий
1.5 Основы взаимодействия дезинфектантов с бактериями
II Собственные исследования
2.1 Материалы и методы
2.2. Результаты собственных исследований
2.2.1 Основные культуральные и биологические свойства референс-штаммов бактерии ОгпШюЬаМепит гЫпо1гаскеа1е
2.2.1.1 Тинкториальные свойства бактерий ОгпМюЬаМегшт гЫпои-аскеа1е
2.2.1.2 Культуральные свойства бактерий ОтккоЬас1е?чкт гЫпои-аскеЫе
2.2.1.3 Проведение сравнительного анализа ростовых характеристик бактерий ОгпИНоЬас(е>чит гЫтйгаскесйе на

различных питательных средах
2.2.2 Определение показателей КОЕ бактерий ОгпИкоЬаМегшт г1г1по(гаскеа1е для выявления оптимальной накопительной среды
для наработки бактериальной массы
2.2.2.1 Конструирование среды накоплен™ для наработки бактериальной массы ОгпИкоЬас1егшт гЫпок'аскеа1е
2.2.2.2 Расчет оптимального времени культивирования бактерий ОгпШюЬаМегшт гЫпои~аскеа1е на среде накопления
2.2.3 Изучение бактерицидного и бактериостатического действия теотропина
2.2.3.1 Изучение бактерицидного и бактериостатического действия теотропина на микроорганизмы различной морфологической структуры
2.2.3.2 Изучение бактерицидного и бактериостатического действия теотропина на бактерии ОгпШюЬас/егкап
гЫпоЬ'аскеЫе
2.2.4 Принципиальная технологическая схема изготовления инактивированной вакцинного препарата из бактерий ОтЫИоЬаМепит гкто1гаскеа1е и проверка его антигенной эффективности
2.2.4.1 Подбор адъюванта
2.2.4.2 Разработка методов дезинтеграции бактериальной клетки ОтИкоЬас1гпит гЫпои'аскеЫе
2.2.4.3 Изучение иммуногенных свойств разрушенной бактериальной клетки ОгпИкоЬас1ег'шгп гЫпо1гаскесйе
2.2.4.4 Конструирование вакцинного препарата
2.2.4.5 Проверка создаваемого биопрепарата его на безвредность
Заключение
Выводы
Практические предложения
Список использованных литературных источников

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АТФ - аденозинтрифосфат
ВНИИВВиМ - Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии
ВНИИЗЖ - Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных
ГОА - гидрат окиси алюминия
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ИИ - индекс иммунитета
ИР - индекс резистентности
ИСВ - индекс среднего времени
КОЕ - колониеобразующая единица
ЛИ - липопротеид
ЛПС липополисахарид
Мё2+ - магний
мРНК - матричная рибонуклеиновая кислота МПА - мясопептонный агар МПБ - мясо-пептонный бульон
НИИЦМиБ - научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии Нм - нанометр
ОРТ - ОгпикоЬаМегшт гЫпо1гас1геа1е
ПАВ - поверхностно-активные вещества
РА - реакция агглютинации
РНК - рибонуклеиновая кислота
pH - показатель кислотности
ТХУ - трехуксусная кислота
ФВК - фосфорно-вольфрамовой кислотой

поверхностных структур. У грамположительных бактерий над пептидогликаном и тейхоевыми кислотами располагается лишь аморфная капсула полисахаридной (крахмалоподобной) природы. Для грамотрицательных бактерий характерно наличие сложной внешней мембраны, основу которой составляет липополисахарид (Сидоренко, 2000).
1,3.2 Строение цитоплазматической мембраны
Цитоплазматическая мембрана является главным барьером между цитоплазмой бактериальной клетки и окружающей средой. Разрушение цитоплазматической мембраны приводит к гибели клеток (Рис, 2002).
При электронной микроскопии ультратонких срезов выявляется трехслойное строение цитоплазматической мембраны: 2 темных
электронноплотных слоя толщиной от 2,5 до 3,7 нм разделены светлым электронно-прозрачным слоем (Голов, 2005; Злыгостев, 2006). По структуре она похожа на плазмалемму клеток животных и состоит из двойного слоя фосфолипидов с периферическими, а также интегральными белками, как бы пронизывающими насквозь структуру мембраны (Ивков, 1982; Рис, 2002; Павлова, 2007).
Ыа наружной стороне мембраны, обращенной к клеточной стенке, обнаружены АТФазы, щелочная и кислая фосфатазы, а также ферменты, участвующие в синтезе материала клеточной стенки. Кроме того, показано, что на цитоплазматической мембране локализованы транслоказы и дегидрогеназы. Согласно зонно-блочной модели биологические мембраны состоят из периодически повторяющихся структурно-функциональных блоков. Предполагается, что белки, фосфолипиды, а также стерины, терпеноиды и полисахариды входят в состав этих блоков в определенном стехиометрическом соотношении. По биохимическим данным в мембранах бактерий, составляющих 8-9 % от общего веса клетки, сосредоточено 75 %