Гормональная регуляция деэтиоляции однодольных растений на примере ячменя

• Автор: Кравцов, Александр Константинович
• Шифр специальности: 03.01.05
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 147 с. : ил.

Введение

1. Литературный обзор

1.1 Деэтиоляция растений

1.1.1 Понятие о деэтиоляции растений

1.1.2 Регуляция процесса деэтиоляции высших растений светом

1.1.3 Гормональная регуляция деэтиоляции высших растений

1.2 Биогенез пластид

1.2.1 Деление пластид

1.2.2 Влияние цитокинина и АБК на биогенез хлоропластов

1.2.3 Роль ядерного и пластидного геномов в регуляции биогенеза хлоропластов

1.3 Основные этапы биосинтеза хлорофилла и гемма.

Гены хлоропластных белков ядерной локализации Заключение
2. Материалы и методы
2.1 Объект исследования
2.1.1 Выращивание этиолированных растений ячменя
2.1.2 Инкубация листьев на растворах фитогормонов
2.2 Определение содержания хлорофилла в листьях ячменя
2.3 Выделение нуклеиновых кислот
2.3.1 Выделение суммарной ДНК из листьев растений
2.3.2 Выделение суммарной РНК из листьев растений
2.3.3 Выделение плазмидной ДНК из E. coli
2.4 Гибридизационные пробы, используемые в работе
2.5 Полимеразная цепная реакция
2.6 Электрофорез ДНК в агарозном геле
2.7 Лигирование
2.8 Трансформация клеток E.coli плазмидной ДНК
2.9 Выращивание бактерий на LB-среде

2.10 Рестрикционный анализ
2.11 Метод гип-оп транскрипции 5
2.11.1 Выделение пластид
2.11.2 Нанесение фрагментов ДІЖ на нейлоновую мембрану
2.11.3 Синтез меченых транскриптов
2.11.4 ДНК-РНК гибридизация 5
2.11.5 Сканирование мембран и анализ результатов
2.12 Определение относительного содержания мРНК
растительных генов методом ОТ-ПЦР
2.13 Электронная и световая микроскопия пластид
3. Результаты и обсуждение
3.1 Влияние возраста этиолированных проростков на накопление хлорофилла в листьях в процессе деэтиоляции ячменя
3.2 Влияние продолжительности пребывания этиолированных проростков ячменя в темноте на интенсивность транскрипции пластидных генов
3.3 Влияние фитогормонов на содержание хлорофилла в зеленеющих листьях однодольных растений на примере ячменя
3.4 Влияние цитокинина и АБК на ультраструктуру
лоропластов в 6 дневных зеленеющих листьях ячменя
3.5 Изучение регуляции экспрессии ядерных генов основных
ферментов биосинтеза хлорофилла в процессе деэтиоляции ячменя
3.5.1 Влияние фитогормонов на уровень транскриптов ядерных генов основных ферментов биосинтеза хлорофилла в процессе деэтиоляции ячменя
3.6 Изучение регуляции экспрессии пластидных генов в процессе деэтиоляции однодольных растений на примере ячменя
3.6.1 Влияние фитогормонов (цитокинина и АБК) на интенсивность транскрипции пластидных генов ячменя в процессе деэтиоляции

Заключение
Выводы
Используемые сокращения
Список используемой литературы

Однако, судя по данным, представленным в других публикациях, в хлоропластах ячменя и в.цианобактериях свет не влиял на'уровень тРНКп,у, в тоже время взеленеющих семядолях огурца уровень экспрессии этого гена был выше по сравнению с экспрессией в-этиолированных семядолях (Berry-Lowe, 1987; O'Nill and Söll, 1990).
Подобные данные свидетельствуют о том, что в определённых условиях свет может контролировать синтез АЖ через изменение уровня транскрипции тРНКглу генов, а модификация активности последних может явиться одним из способов управления синтезом хлорофилла (Аверина, 1997).
Принимая во внимание противоречивые данные о влиянии, света на
систему синтеза AJIK в-разных объектах так же, как и на другие ферменты
биосинтеза хлорофилла: АЖ-дегидрогеназу, Mg-хелатазу, уропорфириноген
декарбоксилазу и др.- в 1995 году Моком с сотрудниками (Mock et al., 1995),
была высказана гипотеза, что экспрессия структурных и регуляторных
компонентов каждого ферментного шага в метаболизме порфиринов требует
специфической регуляции, чтобы синхронизировать и обеспечить адекватное
снабжение тетрапирролами различные ткани растений. Регуляция биосинтеза
тетрапирролов должна гарантировать постоянный поток субстратов, чтобы
предотвратить накопление интермедиатов-порфиринов (Аверина, 1988). Кроме
того, существует предположение, что в дополнение к этому механизму,
функционирующему на генетическом уровне, контроль за синтезом
хлорофилла в растениях может осуществляться с помощью механизма
регуляции скоростей обновления различных продуктов метаболического пути,
через изменение соотношения между скоростями синтеза и распада каждого
интермедиата. Вероятно, ферменты, принимающие участие в реакциях
биосинтеза хлорофилла, служат своеобразным регулятором, который участвует
в разрушении избытка продуктов, способных быть вредными для растительной
клетки (Аверина, 1997). На основании обзора (Campoli et at., 2009) и