Новые методы определения метаболитов триптофана в тромбоцитах и плазме крови человека для лабораторной диагностики депрессивных расстройств

• Автор: Шилов, Юрий Евгеньевич
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 124 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Метаболиты триптофана в патогенезе эндогенных психических заболеваний

1.1.1. Серотонин и его метаболиты

1.1.2. Серотониновая гипотеза эндогенных депрессивных расстройств

1.1.3. Тромбоцитарный серотонин при депрессивных расстройствах

1.1.4. Кинуренин и его метаболиты

1.1.5. Воспаление и метаболизм триптофана

1.1.6. Активация кинуренинового пути при депрессивных расстройствах

1.2. Методы определения метаболитов триптофана
1.2.1. Методы определения серотонина
1.2.2. Методы определения кинуренина и 3-гидроксикинуренина
Заключение
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Реактивы и растворители
2.2. Оборудование
2.3. Исследуемые пациенты и добровольцы
2.4. Забор крови и получение плазмы
2.5. Метод определения серотонина в тромбоцитах крови человека
2.6. Метод определения кинуренина в плазме крови человека
2.7. Метод синтеза алкиловых эфиров метаболитов триптофана
2.8. Получение растворов НС1 в абсолютных спиртах

2.9. ТСХ алкиловых эфиров метаболитов триптофана
2.10. МАЦЛ-ТОБ масс-спектрометрия алкиловых эфиров метаболитов триптофана
2.11. МАЫЛ-ТОБ масс-спетрометрическая детекция триптофана, кинуренина и 3-гидроксикинуренина в плазме крови
2.12. Статистическая обработка
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Разработка метода определения серотонина в тромбоцитах крови человека
3.2 Апробация метода определения серотонина в тромбоцитах крови человека
3.3. Разработка метода определения кинуренина в плазме крови.
3.4. Апробация метода определения кинуренина в плазме крови..
3.5. Характеристика алкиловых эфиров метаболитов триптофана
3.6. МАЬОІ-ТОЕ масс-спетрометрическая детекция триптофана, кинуренина и 3-гидроксикинуренина в плазме крови
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ВВЕДЕНИЕ
Проблема аффективных расстройств и, в первую очередь, депрессий является одной из приоритетных проблем современной психиатрии и медицины в целом. Это связано с высокой распространенностью
депрессивных расстройств среди населения, а также сложностями
диагностики и лечения этих заболеваний, что вытекает из недостаточной
изученности и гетерогенности этиологии и патогенеза депрессивных расстройств.
Эпидемиологические исследования показывают, что выявляемость депрессивных расстройств значительно возросла за последние 10-15 лет [1,2]. По некоторым данным, депрессивными расстройствами, страдают около 6% мужчин и 18% женщин [2,3], причем, в первую очередь, лица молодого и среднего возраста. Исследования социальных последствий депрессивных расстройств показывают, что депрессии приводят к
ограничению социальной активности и трудоспособности [4], в связи с чем трудно недооценить социальную значимость этих заболеваний. Кроме того, низкая эффективность лечения депрессивных расстройств может приводить к трагическим последствиям - суицидам. Все вышесказанное обуславливает особую актуальность исследования депрессивных расстройств, включая изучение патогенеза, а также разработку более эффективных методов диагностики и лечения.
Этиопатогенез депрессивных расстройств сложен и до конца не изучен. Он включает в себя нарушения в метаболических и рецепторных системах мозга, в иммунной и нейроэндокринной системах; нарушение взаимодействия этих систем между собой, воздействие психоэмоционального стресса и неблагоприятных факторов окружающей среды, таких как инфекции, которые реализуются при наличии определенной генетической уязвимости. Так, в патогенез депрессивных расстройств в той или иной степени вовлечены гиперактивация глутаматной нейротрансмиссии, гипофункция норадреналиновой и серотониновой систем мозга, нарушения

1.1.6. Активация кинуренинового пути при депрессивных
расстройствах
В течение нескольких десятилетий нарушения в серотониновой системе мозга считались наиболее значимыми патофизиологическими механизмами депрессии. И хотя, бесспорно, роль серотонина в развитии депрессий велика, очевидно, что лишь снижением уровня серотонина невозможно полностью объяснить другие патофизирологические механизмы этого заболевания. Об этом, в частности, свидетельствует большой процент резистентных к терапии пациентов (по разным даным от 30 до 60%) при использовании для их лечения современных антидепрессанов, являющихся ингибиторами обратного захвата серотонина, т.е. повышающих уровень серотонина в синаптической щели.
Последние 10 — 15 лет, стремительно набирает популярность гипотеза, постулирующая, что активация метаболизма триптофана по кинурениновому пути посредством воспаления и/или психоэмоционального стресса является ключевым связующим звеном между нейромедиаторными системами (серотониновая, глутаматная, ацетилхолиновая и др.) и системой иммунитета, а также одним из ключевых патогенетических факторов развития депрессии (рис. 4). Существуют многочисленные свидетельства вовлечения воспаления в патогенез депрессивных расстройств. Так, в ряде работ было выявлено повышение концентраций провоспалительных цитокинов 1Ь-2, 1Ь-6, растворимых рецепторов для 1Ь-6, фактора некроза опухоли а (ТМР-а) и №N-7, а также понижение уровней противовоспалительных цитокинов, таких как 1Ь-4 и 1Ь-10, в сыворотке крови больных депрессивными расстройствами [7-9].