Адаптивное действие хитозанов на биохимические и клеточные защитные механизмы Apis mellifera L.

• Автор: Назмиев, Булат Кависович
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 142 с. : ил.

Оглавление
Введение

Г лава 1. Биохимические и клеточные системы устойчивости

медоносной пчелы

1.1. Иммунитет насекомых: соотношение неспецифических и 12 специфических механизмов защиты

1.2. Особенности иммунитета медоносной пчелы, как эусоциального 17 насекомого

1.3. Индивидуальный и системный иммунный ответ у медоносной 19 пчелы

1.4. Ферментные защитные системы насекомых

1.4.1. Антиоксидантная ферментная система

1.4.2. Фенолоксидазная ферментная система

1.5. Паттернраспознающие молекулы в иммунной системе насекомых
1.5.1. Гемагглютинины гемолимфы
1.5.2. Антимикробные пептиды
1.6. Клеточные иммунные реакции
1.7. Влияние хитозана на иммунную систему и общеорганизменные 42 реакции насекомых
1.7.1. Зависимость эффекта действия от физико - химических 43 свойств хитозана
1.7.2. Иммуностимулирующее и антимикробное действие 48 производных хитина
Глава 2. Объект исследования и методы
2.1. Объект исследования - медоносная пчела (Apis mellifera L.)
2.2. Методы проведения лабораторных экспериментов
2.2.1. Методика изучения действия хитиновых производных и
битоксибациллина

2.2.2. Методика гематологического анализа гемолимфы
2.2.3. Методика измерения активности пероксидазы (ЕС 1.11.1.7)
2.2.4. Методика измерения активности каталазы (ЕС 1.11.1.6)
2.2.5. Методика измерения дифенолоксидазной активности (ЕС 1.10.3.1)
2.2.6. Методика измерения активности гемагглютининов гемолимфы
2.2.7. Методика работы с лабораторной культурой Ascospaera apis
2.3. Статистическая обработка результатов
Глава 3. Результаты исследований и обсуждения
3.1. Влияние хитозанов на выживаемость пчел
3.2. Влияние хитозанов на защитные ферментативные системы медоносной пчелы
3.2.1. Изменение активности ферментов антиоксидантной системы и дифенолоксидазы при воздействии хитозаном 200 кДа
3.2.2. Изменение активности ферментов антиоксидантной системы и дифенолоксидазы при воздействии сукциноилом хитозана 330 кДа
3.2.3. Изменение активности ферментов антиоксидантной системы и дифенолоксидазы при применении низкомолекулярных хитиновых производных: хитозанов 20 кДа и 7 кДа
3.3. Влияние хитозанов на клеточную и гемагглютининовую системы гемолимфы медоносной пчелы
3.3.1. Действие хитозана 200 кДа на цитологические параметры и агглютинирующую активность гемолимфы Apis mellifera L.
3.3.2. Действие сукциноила хитозана 330 кДа на цитологические параметры и агглютинирующую активность гемолимфы Apis mellifera L.
3.3.3. Действие низкомолекулярных хитозанов 20 кДа и 7 кДа на цитологические параметры и агглютинирующую активность

гемолимфы Apis mellifera L.
3.4. Действие хитозана на лабораторную культуру Ascosphaera apis
3.5. Влияние хитозана на защитные ферментативные системы и
жизнеспособность A. mellifera L. в условиях пасеки
Заключение
Выводы
Список литературы

остатков цистеина, связанных тремя дисульфидными мостиками.
Дефензины активны против широкого спектра грамположительных бактерий, некоторых грамотрицательных бактерий и грибов. Данные антимикробные пептиды вызывают образование каналов в плазматической мембране клеток-мишеней, через которые происходит деполяризация плазматической мембраны (Cociancich et al, 1993).
Цекропины - термостабильные основные пептиды (3,5 - 4,0 кДа), состоящие из 20-40 аминокислот, проявляют литическую активность против грамположительных и грамотрицательных бактерий. Реализуют свое действие путем формирования ионных каналов в мембранах, вызывая снижение концентрации ионов калия и АТФ; нарушают мембранный потенциал, что приводит к плазмолизу бактериальных клеток (Moore, A. J., et al, 1996).
Пролинбогатые пептиды - цитотоксические пептиды, состоящие из 15-39 аминокислотных остатков и с содержанием пролина более 25%. Пролинбогатые пептиды подразделяются на две подгруппы: незамещенные и О-гликозилированные. Первая группа включает короткоцепочечные пептиды (15-17 аминокислот) такие как, например, изоформы апидацинов (Hemenoptera). Показано, что апидацины непосредственно воздействуют на синтез белков микроорганизмов, блокируя репликацию и транскрипцию в течение нескольких часов после заражения (Bulet et al., 1999).
Глицинбогатые пептиды — гловерины, обнаружены у насекомых отрядов Diptera, Lepidoptera, Hymenoptera, Coleoptern и Hemiptera, с массой 8-32 кДа и отличающиеся высоким содержанием глицина.
Антибактериальное действие гловеринов осуществляется посредством ингибирования синтеза жизненно важных белковых компонентов плазматической мембраны микроорганизмов (Гайфуллина и др., 2006).