Влияние искусственного гипобиоза на липиды неокортекса и тимоцитов крыс

• Автор: Быкова, Ольга Владимировна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 99 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Липиды как структурные и функциональные биомолекулы

1.1.1 Термин липиды

1.1.2 Фосфолипиды клеток млекопитающих

1.1.3 Нейтральные липиды клеток млекопитающих

1.1.4 Синтез нейтральных липидов и фосфолипидов

1.2 Биологические мембраны и фазовые свойства липидов
1.3 Гипометаболические состояния млекопитающих
1.3.1 Естественные гипометаболические состояния
1.3.2 Искусственный гипобиоз млекопитающих
1.4 Влияние гипотермии на метаболизм липидов и свойства мембран
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Объект исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Охлаждение крыс
2.2.2. Выделение ядерных фракции нейронов и глии неокортекса
2.2.3. Выделение тимоцитов крыс
2.2.4 Исследование синтеза липидов в тимоцитах при инкубации in vitro
2.2.5. Исследование включения 2-[иС]-ацетата в суммарную фракцию белков и липидов при инкубации тимоцитов in vitro
2.2.6. Выделение и очистка общей фракции липидов
2.2.7. Анализ липидов методом тонкослойной хроматографии
2.2.8. Количественное определение нейтральных липидов
2.2.9. Определение липидного фосфора
2.2.10. Определение удельной радиоактивности липидов
2.2.11. Определение жизнеспособности и интенсивности пролиферации тимоцитов
2.2.12. Определение уровня поврежденное™ ДНК в изолированных тимоцитах
2.2.13. Определение количества белка
2.2.12 Статистическая обработка результатов исследования
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Влияние искусственного гипобиоза на липидный состав неокортекса крыс
3.1.1 Количество липидов в ткани неокортекса крыс в условиях искусственного гипобиоза

3.1.2 Липидный состав нейрональных и глиальных ядер неокортекса крыс в норме и при воздействии на организм искусственного гипобиоза
3.2 Влияние искусственного гипобиоза на липидный обмен тимоцитов крыс
3.2.1 Влияние искусственного гипобиоза липидный состав и распределение клеток по фазам клеточного цикла тимоцитов крыс
3.2.2 Влияние искусственного гипобиоза на включение 2-[|4С]-ацетата в липиды тимоцитов крыс в условиях in vitro
3.3 Влияние искусственного гипобиоза на структуру ДНК в тимоцитах крыс
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ
Потенциальная возможность человека и животных адаптироваться к условиям низких температур - одна из актуальнейших проблем современной биологии и медицины. Особый интерес исследователей привлекает удивительная способность ряда видов млекопитающих в течение многих месяцев переживать неблагоприятные условия среды за счет перестройки организма на пониженный уровень жизнедеятельности. Так, у сусликов в состоянии зимней спячки в десятки-сотни раз снижается уровень метаболизма, а температура тела падает почти до 0°С [Lyman et al., 1982; Калабухов, 1985; Ануфриев, Васильев, 1990]. Низкотемпературное состояние может быть получено и у незимоспящих животных в условиях гипоксии, гиперкапнии и пониженной температуры окружающей среды. В этих условиях крысы или мыши впадают в состояние так называемого «холодового наркоза» со снижением температуры тела до 14°С и понижением в 6-7 раз уровня метаболизма со способностью этих животных без патологических последствий самостоятельно возвращаться к норме в обычных условиях [Майстрах, 1964; Игнатьев и др., 1995, 1998].
Искусственная гипотермия находит широкое применение в медицинской практике в связи с необходимостью временного значительного снижения обмена веществ и уровня потребления кислорода при пониженной температуре. Различают общую и локальную гипотермию. Общая подразделяется на «мягкую» (35-32°С) и «умеренную» (32-27°С). При мягкой гипотермии обычно используется легкая нейровегетативная фармакологическая блокада. При умеренной гипотермии, с современным многокомпонентным интубационным наркозом, применяется искусственная аппаратная вентиляция легких, релаксация и нейровегетативная блокада [Edwards, 1999; Liu, Yenari, 2009; Marion, Bullock, 2009; Turk, 2010]. Для адаптационной медицины, космической биологии и физиологии стресса особый интерес представляет изучение влияния более глубокой гипотермии

температур. Гиперкапния облегчает диссоциацию оксигемоглобина и расширяет кровеносные сосуды, что улучшает снабжение тканей мозга кислородом [Майстрах, 1964]. Накопление С02 оказывает наркотическое действие, облегчая вход в состояние гипобиоза. Изолированное действие гипоксии и гиперкапнии было бы менее благоприятно, чем сочетание этих факторов: дыхание и сердцебиение крыс могли бы остановиться при более высокой температуре, чем при сочетании данных условий [Miller, 1976].
Вход в гипобиоз и поддержание этого состояния проходит под общим контролем ЦНС. Развитие гипотермии у незимоспящих как и у зимоспящих начинается с торможения нервной деятельности высшего отдела ЦНС -неокортекса, постепенно распространяющегося затем и на подкорковые структуры; выход из гипотермии происходит в обратной последовательности [Майстрах, 1964; Игнатьев и др., 1998].
Вход незимоспящих млекопитающих в состояние гипотермии без применения фармакологических средств осуществляется в две стадии. На первой стадии происходит активация сократительного термогенеза (дрожь, судороги) с выбросом гормонов надпочечников - катехоламинов (адренергическая стадия). После истощения пула катехоламинов отключается сократительный термогенез и наступает вторая стадия -холинергическая или несократительный термогенез, обусловленный процессами нефосфорилирующего тканевого дыхания, связанного со свободным теплообразованием. Холодовую блокаду процессов сократительного термогенеза принято считать состоянием «холодового наркоза» [Тимофеев, Прокопьева, 1997].
Создавая состояние искусственного гипобиоза, можно добиться чрезвычайного замедления всех физиологических процессов в организме и изменения его реактивности, что делает организм более устойчивым к разнообразным патологическим процессам: травмам, интоксикациям,
кислородной недостаточности и т.д. Было показано, что состояние
гипотермии увеличивает устойчивость млекопитающих к ионизирующему