Перекисное окисление белков и содержание маркеров эндогенной интоксикации в крови лабораторных мышей после введения метилфосфоновой кислоты

• Автор: Корепин, Антон Михайлович
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Курган
• Количество страниц: 115 с. : ил.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

• АОС - антиоксидантная система;

• АМФК - аминометилфсофоновая кислота;

• АФГ - альдегидфенилгидразоны, фракция продуктов ПОБ27онм;

• АХЭ -ацетилхолинэстераза;

• ВНСММ - вещества низкой и средней молекулярных масс;

• ИИ - индекс интоксикации;

• КП - фракция ВНСММ катаболического происхождения;

• КФГ - кетодинитрофенилгидразоны, фракция продуктов ПОБз6з+з7онМ;

• МФК - метилфосфоновая кислота;

• ОБ - общий белок;

• ОМБ - окислительная модификация белков;
• ОП - фракция олигопептидов;
• ПОБ - перекисное окисление белков;
• СЕЭ - сорбционная емкость эритроцитов;
• ФОВ - фосфорорганические отравляющие вещества;
• ФОС - фосфорорганические соединения;
• ФП — фосфорорганические пестициды;
• ХО - химическое оружие.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Экологический аспект применения фосфорорганических токсикантов
1.2 Некоторые аспекты изучения показателей белкового обмена характеризующих процессы перекисного окисления белков и эндогенной интоксикации
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и структура исследования
2.2 Методы исследования
3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
ЗЛ Изменение показателей белкового обмена белых лабораторных мышей после введения метилфосфоновой кислоты в дозе 2 мг/кг массы животного
3.2 Оценка влияния различных доз метилфосфоновой кислоты на биохимические показатели белкового обмена белых лабораторных мышей через 72 часа после введения
3.3 Долговременный эксперимент. Изучение биохимических показателей крови в периоде от 6 до 30 суток после введения метилфосфоновой кислоты самцам лабораторных мышей
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность исследования
В настоящее время фосфорорганические соединения (ФОС) активно исследуются в ведущих научных центрах мира. Большинство известных ФОС являются веществами антропогенного характера, многие из них впервые были получены как сильнейшие пестициды [8, 58, 133]. Интерес к проблеме вызван, во-первых, широким использованием ФОС в промышленности [53, 59, 106, 148], медицине [59, 95, 135], быту и сельском хозяйстве, [184, 199, 200, 201], во-вторых, начавшимся в России
уничтожением фосфорорганических отравляющих веществ (ФОБ) [50, 61, 166, 167,].
До недавнего времени в России насчитывалось порядка 40 тысяч тонн фосфорорганических отравляющих веществ [16, 158, 160]. В Щучанском районе Курганской области, как и на объекте «Марадыковский» Кировской области в настоящее время функционируют заводы по уничтожению химического оружия (ХО). В основе процесса уничтожения фосфорсодержащего ХО лежит технология химического взаимодействия ФОВ (нервнопаралитического действия: зарин, зоман и V-газы) с
органическими основаниями, например, моноэтаноламином или бутилатом калия [15, 99, 165, 168]. В результате реакции получаются метилфосфонаты -соответствующие соли и эфиры метилфосфоновой кислоты (МФК). Зарубежный опыт уничтожения ХО подтверждает возможность загрязнения метилфосфонатами природных сред. МФК была обнаружена спустя 10 лет после загрязнения сухой почвы на полигоне хранения ХО Дагуэй в штате Юта США [188, 198, 205, 223].
Существует ряд фосфорсодержащих пестицидов (ФП) в строении которых присутствует фрагмент МФК. Общеизвестный гербицид глифосат (с торговым наименованием «Раундап») в результате биохимической деградации в почвах преобразуется в производное МФК -

Чокальтеу. Регистрация оптической плотности окрашенных белковых комплексов осуществлялась при длине волны 750 нм. В качестве стандарта использовались разбавленные в 100 раз растворы белка с концентрациями 60, 70 г/л из наборных методов по определению альбумина и общего белка в плазме и сыворотке крови фирмы «Витал-Диагностикс» (г. Санкт-Петербург).
ВНСММ определяли в супернатанте после осаждения крупномолекулярных белков плазмы раствором ТХУ 150 г/л путем регистрации спектра поглощения исследуемого раствора в зоне ультрафиолета в диапазоне 238-298 нм с шагом в 1 нм на спектрофотометре фирмы Janway и шагом 4 нм на спектрофотометре (LKB, Sweden) по методу М.Я. Малаховой (1987 г.) [114].
Эритроцитарную массу трехкратно отмывали физиологическим раствором. Затем объем эритроцитарной массы доводили до первоначального физиологическим раствором по метке, поставленной на пластиковой пробирке Эппендорфа после отбора крови. К отобранной аликвоте объемом 0,6 мл эритроцитарной массы приливали 0,3 мл трихлоуксусной кислоты концентрацией 150 г/л. Полученный эритроцитарный супернатант использовали для определения олигопептидов и ВНСММ, подобно обнаружению в плазме.
Математические методы исследования
Статистическую обработку данных проводили с использованием критериев непараметрической статистики. При исключении выбросов использовали метод Титьена-Мура, проверяя минимум и максимум значений выборки. Достоверность различий между двумя выборками оценивали с помощью W-критерия Вилкоксона-Манна-Уитни для независимых выборок. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимали равным 0,05. Результаты анализов усредняли с помощью медианы, на основании которой считали различия в процентах (%) опытных и контрольных групп. Для графического