Биохимические и генетические маркеры аутоиммунитета при хроническом лимфоцитарном тиреоидите

• Автор: Биктагирова, Эльнара Маулетовна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 159 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список используемых сокращений 4:

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1 .ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ '

1.1. Современные представления о патогенезе хронического лимфоцитарного тиреоидита

1.2. Роль апоптоза в патогенезе АИТ ^

1.3 . Аутоантитела к ДНК в норме и при патологий

1.3.1. Возможные, механизмы реализации повреждающего действия каталитических аутоантител к ДНК при аутоиммунной патологии

1.3.2. Механизм участия ДНК-абзимбв в патогенезе аутоиммунного синдрома

1.4. Генетические факторы риска развития АИТ '

1.4.1 Полиморфизм гена поверхностного антигена цитотоксических '1-лимфоцитов СТЕА-
1.4.2. Полиморфизм гена протеинтйрозин фосфатазы РТРШ2

1.4.3 Нолиморфизмтена фактора некроза опухолей-альфа и его рецепторов
1.4.4 Полиморфизм генов цитокинов и их роль в аутоиммупитетс
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ '
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Реактивы и оборудование
2.2. Объекты исследования .
2.3 Приготовление раствора ДНК морского ежа

2.4 Определение АТ к нативной и денатурированной ДНК методом иммуноферментного анализа
2.4.1 Подбор оптимальной концентрации конъюгата
2.5 Опредление ДНКазной активности АТ к ДНК

2.6 Электрофоретический анализ плазмидной ДНК рВВ322 в агарозном геле
2.7 Иммунофенотипирование лейкоцитов методом проточной' цитометрии
2.8 Материалы и методы генотипирования

2.8.1. Выделение ДНК
2.8.2. Постановка ПЦР
2.8.3. Рестрикционный анализ
2.8.4. Разделение продуктов амплификации и рестрикции 2.9. Статистическая обработка результатов
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Характеристика процесса программируемой клеточной гибели и аутоиммунитета при хроническом лимфоцитарном тиреоидите
3.2. Выявление связи между показателями активности аутоиммунитета: уровня специфических АТ-ТГ, АТ-ТПО, неспецифических АТ к ДНК и функциональным состоянием ЩЖ при хроническом лимфоцитарном тиреоидите • .
3.3 Генетические факторы риска развития хронического лимфоцитарного тиреоидита 80 •
3.3.1 Анализ ассоциации полиморфных маркеров генов с уровнем АТ у больных АИТ "
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АИЗ - аутоиммунные заболевания АИТ - аутоиммунный тиреоидит АКТГ - адренокортикотропный гормон АПК - антиген представляющие клетки АТ - антитела
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ИФА - иммуноферментный анализ
ОП450- оптическая плотность при длине волны 450 нм в реакции ИФА
МКДЦ - межрегиональный клинико-диагностический центр
ОШ - отношение шансов
п.н. - пар нуклеотидов
ПЦР - полимеразная цепная реакция
СКВ - системная красная волчанка
ТГ - тиреоглобулин
ТПО - тиреопероксидаза
ТТГ - тиреотропный гормон
TNF-a - фактор некроза опухоли
TNF-R - рецепторы к фактору некроза опухолей
CTLA-4 - молекула 4 антигена цитотоксических Т-лимфоцитов
ЭПР - эндоплазматический ритикулум
95% ДИош - 95% доверительный интервал отношения шансов IL - интерлейкин
LYP - лимфоид-специфическая тирозин фосфатаза
SNP - (single nucleotide polymorphisms) - однонуклеотидные замены
PTPN22 - протеин тирозин фосфатаза

макрофагов ЩЖ по сравнению с моноцитами других тканей1 повышена плотность В7 на поверхности, который помогает им воспринимать сигнал от АПК и возникает состояние иммунологической толерантности (Lihong Wang cl.al. 2007).
Kotsa К.A. с: соавт (1997) изучали' функциональную, роль данного полиморфизма и показали увеличение пролиферации Т-клеток у носителей:' генотипа: GG (А1а/А1а) по сравнению носителей гомозиготного генотипа по нормальному аллелю АА (Thr/Thr). Кроме того, ими»:же показана корреляция Т аллеля полиморфизма -318 С/T промоторной области и G аллеля экзонного полиморфизма с повышением экспрессии гена на клеточной поверхности после стимуляции лимфоцитами.
Данный полиморфизм рассматривается в . качестве маркера: риска предрасположенности к различнымаутоиммунным:заболеваниям;(СД 1 типа, тиреоидит ХашимотЪ, БГ, РА и др.) у многих популяций. • К примеру,. •ассоциация аллеля* G (ТНг) с: предрасположенностью: к ОД 1 типа была, выявлена у испанцев, - французов, мексиканцев, американцев, китайцев и корейцев (Michelle P.Marron, et al., 1997). Однако, первым, кто выявил генетическую- предрасположенность к тиреоидиту Хашимото, болезни Аддинсона, БЕ у носителей; мутантного аллеля в кавказских популяциях, был: Yanagawa Y с соавт. (1995). Исследования, проведенные в японских (Masaki Takara, et. al, 2000), немецких (Hoist Donner et.al, 2000) п русских (Москва) (Чистяков Д., с соавт., 2000) популяциях так же подтвердили ее. Считается, что среди всех вариантов SNP гена CTLA-4, +49A/G наиболее изучен и, так как он затрагивает функцию самого белка-рецептора Т-лимфоцитов, играет немаловажную роль в патогенезе аутоиммунных заболеваний.
ПолшюрсЬизмы промоторной области -318С/Т и -1661A/G гена CTLA-Так как промоторные регионы являются сайтами связывания транскрипционных факторов, то регуляция экспрессии гена находится под их контролем. Полиморфизм -318С/Т (замена цитозина на тимин в прмоторном регионе -318 относительно стартовой области экзона 1) и -1661A/G (замена