Функционирование митохондриального АТФ-зависимого калиевого канала при различных физиологических и патологических состояниях

• Автор: Шигаева, Мария Ивановна
• Шифр специальности: 03.01.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 110 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Системы транспорта калия в митохондриях

1.1. Митохондриальный цикл калия

1.2. Система входа калия в митохондрии

1.3. Система выхода калия из митохондрий

1.4. Физиологическое значение транспорта К+ в митохондриях

2. Биофизические свойства митоКдтф

2.1. Проводимость одиночного митоКдтф канала и их кластеризация

2.2. Селективность и потенциалзависимость митоКАТФ
3. Структурная организация митохондриального и цитоплазматического КАТф каналов
3.1. Структурная организация цитоКАТФ
3.2. Структурная организация митоКАТФ
4. Регуляция митоКдтф канала
4.1. Метаболические модуляторы митоКАТФ канала
4.1.1. Регуляция дифосфонуклеотидами
4.1.2. Гормональная регуляция мшпоКатф
4.1.3. Регуляі(іія митоКАГФ жирными кислотами
4.2. Фармакологические модуляторы митоКдтф канала
4.3. Регуляция Кдтф каналов редокс-агентами
5. Роль митоКдтф в кардиопротекции
5.1. Роль митоКдтфВ адаптации организма к гипоксии
5.2. Возможные механизмы защиты сердца при гипоксии, опосредованные активацией митоКАТФ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1. Моделирование острой ишемии и ишемии-реперфузии миокарда
1.1. Моделировние острой экспериментальной ишемии миокарда
1.2. Анализ электрокардиограмм
1.3. Внутривенное введение животным модуляторов митоКАТФ
1.4. Моделирование ишемии-реперфузии миокарда
1.5. Определение зоны риска и зоны некроза миокарда методом двойного окрашивания
2. НРЬС-анализ содержания уридиновых и адениновых нуклеотидов в ткани
миокарда
2.1 Приготовление проб ткани миокарда для НРЬС
2.2. НРЬС-анализ содержания в пробе уридиновых и адениновых
нуклеотидов
3. Определение показателей энергетического обмена в ткани миокарда
3.1. Определение уровня креатинфосфата в ткани миокарда
3.2. Определение уровня гликогена в ткани миокарда
3.3. Определение уровня лактата в ткани миокарда
4. Определение показателей перекисного окисления липидов и системы
антиоксидантной защиты в ткани миокарда
4.1. Определение уровня гидроперекисей липидов
4.2. Определение активности супер оксид дисмутазы
4.3. Определение уровня восстановленного глутатиона
5. Выделение митохондрий из ткани сердца
6. Выделение митохондрий из ткани печени
7. Выделение и очистка К+-транспортирующего белка м.м. —55 кДа из
митохондрий печени крыс
8. Денатурирующий электрофорез в полиакриламидном геле
9. Нативный электрофорез и электроэлюция белка с геля
10. Реконструкция К+-транспортирующего белка м.м. 55 кДа в БЛМ
11. Вестерн-блот анализ
12. Получение и очистка антител к митохондриальному К+-транспорти-
рующсму белку с м.м. 55 кДа
12.1. Иммунизация животных
12.2. Очистка антител
13. Непрямой дот-анализ титра антител
14. Полярографическое определение параметров дыхания митохондрий
15. Изучение энергозависимого входа К+ в МХ методом
спектрофотометрии
16. Исследование АТФ-зависимого ДНФ-индуцированного выхода К из
митохондрий при помощи К+-селективного электрода
17. Определение количества К+ в митохондриях
18. Тестирование устойчивости животных к гипоксии
19. Определение времени жизни и времени потери позы у животных в
экспериментах т ут>
20. Статистический анализ
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА 1. Изучение механизмов кардиопротекторного действия активации митохондриального АТФ - зависимого калиевого канала на модели острой ишемии и ишемии-реперфузии миокарда
1.1. Изменение уровня уридиновых нуклеотидов в плазме крови и ткани
миокарда в условиях нормоксшги острой ишемии
1.2. Энергетический баланс и окислительные процессы при острой ишемии
миокарда и их коррекция в результате активации митоКАТф
1.2.1. Влияние активации митоКАТФ на энергетический статус ткани
миокарда в условиях нормоксии и острой ишемии
1.2.2. Влияние активации митоК.АТФ канала на показатели системы антиокислителъной защиты организма и перекисного окисления липидов при острой ишемии миокарда
1.3. Антиишемический эффект активации митоКдтф на модели ишемии-
репепрфузии миокарда
1.4. Предполагаемый механизм антиишемического действия УМФ

В противоположность этому АФК, образуемые при реперфузии после продолжительной ишемии, могут быть причиной необратимого повреждения клеток. Однако, предварительная обработка активаторами митоКдтф подавляет образование АФК при реперфузии [Pain, et al., 2000; Zweier et al., 1987].
Учитывая все вышесказанное можно сделать вывод, что механизм антиишемического действия активаторов митоКдтф до сих пор окончательно не выяснен. Кроме того, остается непонятной причина сохранения устойчивости миокарда к гипоксии в течение длительного времени после ишемической адаптации сердца. Именно этот феномен может лежать в основе гипобарической адаптации животных и человека к гипоксии и связан он, вероятно, с экспрессией ряда белков, в том числе формирующих митоКАХф [Kuzuya et al., 1993; Marber et al, 1993].