Молекулярные и клеточные маркеры чувствительности буккальных эпителиоцитов человека к воздействию излучений радона в бытовых условиях

• Автор: Мейер, Алина Викторовна
• Шифр специальности: 03.01.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 127 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Феномен радиочувствительности и возможные подходы к ее определению
1.2. Эффекты воздействия малых доз радиации
1.3. Радон как радиационный фактор окружающей среды
1.3.1. Особенности воздействия радона на клеточные структуры
1.4. Использование цитогенетических тест-систем для оценки генотоксических эффектов воздействия малых доз радиации
1.4.1. Оценка генотоксического воздействия радона
1.5. Использование цитогенетических характеристик буккального эпителия для оценки мутагенного воздействия факторов внешней среды
1.6. Ассоциации полиморфизма генов-кандидатов с эффектами ионизирующих излучений в малых дозах
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 .Материалы исследования
2.2.Методы цитогенетического анализа
2.3. Молекулярно-генетические методы
2.4. Методы статистической обработки
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Комплексная оценка экологических факторов действующих в районе проведения исследования
3.2. Цитологический статус буккальных эпителиоцитов детей и подростков контрольной и экспонированной радоном групп
3.2.1. Основные кариологические показатели эксфолиативных клеток обследованных групп
3.2.2. Сопряженность показателей микроядерного теста в обследованных группах
3.2.3. Прогностическая эффективность показателей микроядерного теста
3.2.4. Оценка влияния заболеваемости, курения, половозрастных характеристик и этнической принадлежности обследованных на цитогенетические показатели в клетках
буккального эпителия
3.3. Характеристика изученных полиморфизмов в обследованных группах
3.3.1. Сравнительная характеристика полиморфизма генов репарации ДНК в
исследуемых выборках
3.3.2. Сравнительная характеристика полиморфизма генов биотрансформации
ксенобиотиков в исследуемых выборках
3.3.3. Ассоциации изученных полиморфизмов с показателями микроядерного теста
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность исследования. Согласно современным представлениям индивидуальная радиочувствительность (ИРЧ) имеет мультифакторную природу и в значительной степени определяется генетическими особенностями [Hu et al., 2001; Barnett et al., 2009]. К группе кандидатных генов ИРЧ относят гены репарации ДНК, контроля клеточного цикла и апоптоза, метаболизма ксенобиотиков, индукции механизмов радиозащиты и др., обеспечивающих стабильность генетического материала [Гончарова и др., 2003; Рубанович, 2007; Au et al., Fucic et al., 2008]. Оценку значимости полиморфизма вышеуказанных генетических систем в формировании признака радиочувствительности принято выполнять путем анализа ассоциаций полиморфных вариантов генов с радиационно-индуцированными эффектами, характеризующими степень ИРЧ [Kiuru et al., 2005; Rossi et al., 2009; Сальникова и др., 2010; Abilev et al., 2011; Васильева и др., 2012; Литвяков и др., 2013]. Однако на сегодня по ряду причин имеющиеся в литературе данные по установленным молекулярным маркерам радиочувствительности человека противоречивы и неоднозначны [Salnikova et al., 2012].
Другая проблема изучения радиочувствительности связана с необходимостью поиска специфических биомаркеров генотоксического эффекта ионизирующей радиации (ИР) на клеточном уровне. Выбор таких маркеров должен определяться типом радиации и мишенью воздействия. В настоящее время радиационно-специфическим методом индикации биологических эффектов ИР является анализ хромосомных аберраций (ХА), а именно дицентрических и кольцевых хромосом в лимфоцитах человека [WHO, 1993]. Другие цитогенетические маркеры эффекта - микроядра (МЯ), используются в целях биоиндикации радиационных эффектов значительно реже [Cytogenetic dosimetry, 2011]. Вместе с тем, анализ микроядер и иных типов кариологических повреждений в эпителиальных клетках человека

В ряде исследований делается попытка найти корреляции между цитогенетическими показателями и тяжестью отсроченных эффектов радиотерапии с учетом генетического профиля пациентов или без него. В работе [De Ruyck et al., 2005] показана корреляция между повышенной частотой хроматидных разрывов и отсроченными побочными эффектами радиотерапии у женщин с раком эндометрия и шейки матки; носители минорного аллеля гена XRCC1 194Тгр имели меньший риск возникновения побочных реакций после лучевой терапии.
При исследовании индивидуальной радиочувствительности в условиях профессионального облучения с применением микрокроядерного теста в лимфоцитах показан протективный эффект минорных аллельных вариантов гена XPD (751 Gin -312Asn) и мажорного варианта XRCC1 (Arg399) после воздействия низких доз ионизирующего облучения [Angelini et al., 2005].
Для последнего варианта защитный эффект отмечен также относительно спонтанных хромосомных аберраций [Skjelbred et al., 2006]. В другом сайте этого же локуса (XRCC1 Argl94Trp) в работе Skjelbred с соавт., напротив минорный вариант был ассоциирован с пониженной частотой спонтанных хромосомных аберраций.
У работников 2-х чешских АЭС с различными сроками и, соответственно, дозами облучения не было выявлено различий в частотах стабильных и нестабильных хромосомных аберраций в зависимости от дозы облучения по локусам GSTM1, GSTT1. В этой же работе минорный вариант GSTP1 являлся фактором риска возникновения стабильных хромосомных аберраций [Sram et al, 2006].
Отсутствие модифицирующего влияния полиморфизма глутатион S-трансфераз (GSTM1, GSTT1, GSTP1) на частоту микроядер в лимфоцитах установлено для медицинского персонала, подвергающегося хроническому низкоинтенсивному облучению [Sakly et al., 2012] .
Аналогичная тенденция обнаружена относительно ассоциации
полиморфизма генов GSTM1 и GSTT1 с частотой хромосомных аберраций у