Изучение индуцированной устойчивости культивируемых клеток Nicotiana sylvestris к высоким концентрациям солей

• Автор: Ошмарина, Вера Ивановна
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 142 c. : ил

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Реакция растений на засоление и физиологическая природа солеустойчивости
1.2. Действие солей на культивируемые
клетки растений
1.3. Получение мутантов соматических клеток растений
и их роль в изучении физиологических процессов
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Материал и методы
2.1.1. Методика получения клеточной культуры
2.1.2. Клонирование суспензии клеток K. sylvestris
2.1.3. Обработка суспензии клеток N, sylvestris Я-нитрозо-н-метилмочевиной (НММ)
2.1.4. Подготовка пробы для анализа
содержания ионов
2.1.5. Подготовка пробы для анализа аминокислот
2.2. Результаты и обсуждение
2.2.1. Получение культуры клеток ГГ, sylvestris
2.2.2. Характеристика роста культуры клеток
в стандартных условиях
2.2.3. Действие некоторых стрессовых факторов
на рост культуры Ж* sylvestris
2.2.3.1. Рост культуры в присутствии КаС1

2.2.3.2. Рост культуры N. sylvestris в присутствии этионина 52 СТр#
2.2.3.3. Рост культуры клеток Ж. sylvestris
в присутствии путресцина
2.2.4. Получение индуцированных мутагеном солеустойчивых клеточных линий Ж. sylvestris
2.2.4.1. Действие нитрозометилмочевины на
клетки Ж. sylvestris
2.2.4.2. Получение индуцированных НММ ЖаС'1 -резистентных клонов Ж. sylvestris
2.2.4.3. Получение индуцированных НММ этионин-резистентных клонов Ж. sylvestris
2.2.4.4. Выделение клонов с двойной устойчивостью
2.2.5. Физиологическая характеристика клонов
2.2.5.1. Критерии для характеристики клонов
2.2.5.2. Дикий штамм
2.2.5.3. Клон ЖрЕд-1
2.2.5.4. Клон KrEs-2
2.2.5.5. Клон ЖГЕ3-3
2.2.5.6. Клон ЖгЕг-/1
2.2.5.7. Клон ЖгЕг-2
2.2.5.8. Клон ЖрЕр-З
2.2.5.9. Клон ЖрЕг-^
2.2.5.10. Клон
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 10б
ВЫВОДЫ П5
ЛИТЕРАТУРА П7
ПРИЛОЖЕНИЕ

Повышенное содержание солей в почве - широко распространенный фактор, неблагоприятный для возделывания сельскохозяйственных растений. Огромные территории нашей планеты (25 % поверхности суши) в той или иной степени засолены (Строгонов, 1973). У нас в стране засоление почв наносит серьезный урон сельскохозяйственному производству в ряде районов интенсивного земледелия. Содержащееся в почве избыточное количество солей угнетает рост и значительно снижает урожаи практически всех сельскохозяйственных культур.
Одним из наиболее перспективных путей освоения засоленных почв, наряду с проведением мелиоративных мероприятий, является возделывание на них солеустойчивых сортов полезных растений.
Получение форм с таким комплексным признаком, как солеустой-чивость, возможно общепринятыми методами (мутагенез и гибридизация), однако в последние годы большое значение приобретают новые приемы и методы, которые облегчают и ускоряют селекцию экономически важных культур.
Одним из таких приемов является селекция на клеточном уровне. Популяция культивируемых клеток генетически и физиологически ге-терогенна и экспериментально полученное на ее основе растение может унаследовать возникшие генетические изменения.
Выращивание таких клеток ведется в специально оборудованных камерах фитотрона, где строго контролируются и дозируются состав питательной среды, температура, влажность, освещенность. Миллион посаженных на питательную среду растений может располагаться в небольшой оранжерее или камере фитотрона. Размножение культивируемых клеток, а также выращивание in vitro растений идет непреры-

ния ИаС1 в среде (Бабаева и др., 1968; Комизерко, 1969; Кулиева и др., 1975). Однако некоторые культуры проявляют большую чувствительность к низким концентрациям, чем к дальнейшему увеличению БГаС1 в среде ( ЦоШаег et а1, 1977; Собко, Шамина,
1981). Этот факт, возможно, говорит о разных механизмах действия солей на клетку.
Чувствительность культивируемых клеток разных видов к НаС1 довольно резко различается (табл. 8). Наибольшая устойчивость -у галофитов, хотя Ъ. сагсЛа - типичный гликофит - сохраняет хороший рост на среде, содержащей до 1,5% НаС1.
Таблица
Чувствительность культивируемых клеток растений к НаС1
Вид Субле-тальная доза NaCl %% Источник
I 2
Nicotiana tabacum 0,16 Nabors, 1975
N, tabacum 0,46 Heyser, Nabors, 1981
—If— 1,0 Hasegawa et al, 1980 Handa, Hasegava, 1980
ET. alata 0,9 Азизбекова и др., 1977
N. sylvestris 1,0 Zenk,1974;Dix,Street, 1975
Daucus carota 1,5 Комизерко, 1969
—If— 2,0 Бабаева, Бутенко, 1978
’Datura innoxia 1,0 Tyagi et al, 1982
Medicago sativa 1,0 Мезенцев и др., 1982 Crougham et al, 1978
Citrus sinensis 1,0 Kochba et al, 1982
C, aurautium 1,0 — «
Hordeum vulgare 1,0 Orton, 1978
Trifolium repens 0,36 Smitb., Же Comb, 1981
Capsicum anmiurn 1,0 Dix, Street, 1975