Изучение теплового шока цианобактерии SYNECHOCYSTIS AQUATILIS

• Автор: Шарипова, Марина Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Ленинград
• Количество страниц: 155 c. : ил

Принятые сокращения
Глава I. Сублегальное действие факторов среды на
микроорганизмы
1.1. Терминология
1.2. Повреждающие агенты
1.3. Факторы, влияющие на чувствительность к повреждающим агентам
а) условия культивирования
б) плотность суспензии
в) фаза роста культуры
г) состав среды инкубирования
д) pH среды инкубирования
е) скорость действия фактора
1.4. Метод учета поврежденных клеток
1.5. Основные повреждения
а) нарушение клеточной оболочки
б) повреждение РНК и рибосом
в) повреждение ДНК
г) изменение активности ферментных систем
д) нарушение процессов дыхания, фотосинтеза
и энергообеспечения клетки
1.6. Репарация повреждений
а) методы изучения
б) условия репарации
в) восстановление меточного барьера

проницаемости
г) восстановление рибосом и РНК
д) репарация ДНК
е) восстановление активности ферментных систем, процессов дыхания и фотосинтеза
ж) энергообеспечение репарации
1.7. Белки теплового шока
1.8. Заключение
Экспериментальная часть
Глава II. Материал и методы исследования
2.1. Объект исследования и условия культивирования
2.2. Учет числа колоний на твердых питательных
средах
2.3. Условия теплового и кислотного воздействия
2.4. Количественный учет поврежденных клеток
2.5. Измерение диаметра колоний
2.6. Определение чувствительности клеток к лизоциму
2.7. Измерение выделения и поглощения кислорода
2.8. Регистрация спектров флуоресценции
2.9. Изучение УФ-инактивации и фотореактивации
2.10.Опыты по изучению репарации
2.11.Изучение устойчивости к повторному шоку
2.12.Выделение ДНК-связывающихся белков
Глава III. Последствия сублетального теплового воздействия у цианобактерии Зупес1юсуа1;1д адиа-ЫНз

3.1. Количественный учет клеток S.aquatilis на твердых питательных средах
3.2. Условия теплового воздействия
3.3. Нарушение барьера проницаемости
3.4. Изменение интенсивности дыхания и фотосинтеза
3.5. Изменение УФ-инактивации и фотореактивации
3.6. Изменение диаметра колоний
Глава ХУ. Репарация повреждений
4.1. Условия репарации
4.2. Метаболические процессы, необходимые для репарации
4.3. Сравнительное изучение теплового и кислотного шока
4.4. Устойчивость к повторному тепловому воздействию
Заключение
Выводы
Литература

(Tomlins, Ordal, 1971Ö; Restaino et al., 1980).
1,7. Белки теплового шока
В последнее время у таких различных организмов, как Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae, Chlamydomonas reinhar-dii, Kaegleria gruberi, Tetrahymena pyriformis, Dictyostelium discoideum И Rolysphondylium pallidum, кукуруза, табак, горох, Drosophila и даже в куриных фибробластах и клетках млекопитающих были обнаружены белки теплового шока (Kelley, Schlessin-ger, 1978; Yamamori et al., 1978; Muller et al., 1982). Очень мало известно о том, что конкретно представляют собой белки, синтезируемые во время теплового шока, и каковы их функции. Известно, что изменение синтеза белков происходит в ответ на различные неблагоприятные воздействия: пониженные и повышенные температуры, УФ-облучения, действие химических веществ, голодание (Cooper, Rueltinger, 1975; Choo, 1977; West, Emmerson, 1977; Tanguay, 1983) и носит универсальный характер - наблюдается в клетках организмов различного эволюционного положения (от бактерий до человека).
Показано, что появление в клетках белков теплового шока обусловлено активацией "генов теплового шока". Явление активации специфического набора генов при самых различных экстремальных воздействиях открыл на дрозофиле итальянский исследователь Ф.Ритосса в 1962 г. (Ritossa, 1962). Однако систематическое изучение ответа теплового шока началось только 5 лег назад, когда параллельно в нескольких лабораториях было установлено удивительное сходство в структуре белков и генов теплового шока прокариот и эукариот (Marx, 1983). Так, Крейг обнаружила