Оценка влияния гриппозной инфекции и иммунизации живой реассортантной гриппозной вакциной на возникновение и течение IgE-опосредованных аллергических реакций организма

• Автор: Чиркова, Татьяна Викторовна
• Шифр специальности: 14.00.36, 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 135 с. : ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АлЖ - аллантоисная жидкость куриных эмбрионов

ВПГ - вирусы парагриппа

ГАЕ - гемагглютинирующая единица

ЖГВ - живая гриппозная вакцина

ИГВ - инактивированная гриппозная вакцина

ИЛ - интерлейкин

ИС - индекс стимуляции

ИФА - иммуноферментный анализ

ИФН - интерферон

МПК - мононуклеары периферической крови

НАЛТ - назоассоциированная лимфоидная ткань
ОВА - овальбумин
ОП - оптическая плотность
ОРВИ - острые респираторные вирусные инфекции
ОРС - окуло-респираторный синдром
ОФД - ортофенилендиамин
РВ - риновирусы
РСВ - респираторно-синцитиальный вирус РТГА - реакция торможения гемагглютинации САП - средний арифметический показатель СГТ - средние геометрические титров ЦТЛ - цитотоксические Т-лимфоциты ТЪ - Т-хелперы

1. Обзор литературы
1.1. Вирус-индуцированный патологический ТЪ2- иммунный ответ
1.1.1. 1яЕ как маркер манифестных и латентных аллергических
процессов
1.1.2. Продукция при вирусных инфекциях
1.1.3. Группы риска в развитии вирус-индуцированного 18 патологического Т112-иммунного ответа
1.2. Индукция 1§Е-иммунного ответа при острых респираторных
вирусных инфекциях
1.2.1. Риновирусы
1.2.2. Респираторно-синцитиальный вирус
1.2.3. Вирусы парагриппа
1.2.4. Вирусы гриппа
1.3. Индукция ^-иммунного ответа при вакцинации против
острых респираторных вирусных инфекций
1.3.1. Респираторно-синцитиальные вакцины
1.3.2. Гриппозные вакцины
2. Материалы и методы исследования
2.1. Вакцины
2.2. Обследованные контингенты
2.3. Лабораторные животные
2.4. Экспериментальные модели
2.5. Исследованные материалы
2.6. Методы исследования

2.7. Статистическая обработка результатов
3. Результаты собственных исследований
3.1. Продукция у мышей после экспериментальной гриппозной
инфекции и вакцинации
3.2. Продукция ^Е у людей разного возраста, перенесших
гриппозную инфекцию или иммунизированных ЖГВ
3.2.1. Продукция 1§Е у молодых людей при гриппозной инфекции и
иммунизации ЖГВ
3.2.2. Продукция 1§Е у детей разного возраста при иммунизации

3.2.3. Продукция ^Е у пожилых людей при иммунизации ЖГВ
3.3. Влияние гриппозной инфекции и вакцинации на течение
аллергопатологии респираторного тракта в условиях экспериментальной модели бронхиальной астмы
3.3.1. Отработка модели бронхиальной астмы мышей. Выявление
двух стадий аллергического воспаления респираторного тракта
3.3.2. Гриппозная инфекция и вакцинация в стадии острого
аллергического воспаления респираторного тракта
3.3.3. Гриппозная инфекция и вакцинация в стадии ремиссии
бронхиальной астмы
4. Обсуждение полученных результатов
Выводы
Список литературы

Определение общих IgE в сыворотках крови и секретах верхних дыхательных путей у людей проводили в иммуноферментном анализе (ИФА) с использованием коммерческих тест-систем (ООО «Полигност», Санкт-Петербург). Оптическую плотность (ОП) оценивали на спектрофотометре (Bio-Tec Instruments, Финляндия) при длине световой волны 490 нм. Согласно инструкции к используемым тест-системам, нормальный уровень общих сывороточных IgE составляет: для детей 1 года 8 - 20 КЕ/л, для детей 5 лет 10-50 КЕ/л, для детей 10 лет 15-60 КЕ/л, для взрослых 20- 100 КЕ/л.
Титры IgE, специфических к вирусам гриппа или к овальбумину, определяли в непрямом варианте ИФА по ранее разработанной методике [19]. В планшетах для ИФА в течение 18 часов при +4°С сорбировали вирусные антигены в дозе 16 ГАЕ/в лунке или ОВА (МР Biomedicals, Inc., США) в дозе 10 мкг/мл. Образцы сывороток и секретов титровали в 2-х кратных разведениях. В качестве конъюгата применяли моноклональные антитела к IgE человека, меченные пероксидазой хрена (ООО «Полигност», Россия). Субстратом служил ортофенилендиамин (Sigma Со, США). Оптическую плотность ОП оценивали на спектрофотометре (Bio-Tec Instruments, Финляндия) при длине световой волны 490 нм. За титр антител принимали последнее разведение исследуемого материала, превышавшее в 2 и более раза данные контроля (все ингредиенты реакции без исследуемого образца).
Определение уровней ИФНу и ИЛ-4 в супернатантах культур МПК людей. Уровни цитокинов определяли в ИФА со стандартными наборами (Cytoscreen Immunoassay Kit, Biosource International, США) в надосадках 4-дневных культур МПК, стимулированных 20 ГАЕ/0,1 мл инактивированных антигенов вирусов гриппа A(H1N1), A(H3N2) и В, входящих в состав ЖГВ. Оптическую плотность ОП оценивали на спектрофотометре (Bio-Tec Instruments, Финляндия).