Участие эндогенных антиоксидантов в механизмах толерантности мозга к гипоксии

• Автор: Строев, Сергей Александрович
• Шифр специальности: 03.00.13, 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 138 с. : ил.

Список сокращений
1.ВВЕДЕНИЕ
2.0БЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Гипоксия: экспериментальные модели
2.2. Молекулярные механизмы действия тяжелой гипоксии
2.3. Свободные радикалы и окислительный стресс
2.4. Роль окислительного стресса в индукции повреждения нервных клеток
2.5. Участие внутриклеточных антиоксидантов в механизмах нейропротекции
2.5.1. Тиоредоксины
2.5.2. Супероксидцисмутазы
2.6. Гипобарическая гипоксия
2.7. Прекондиционирование
г 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
3.1. Создание гипобарической гипоксии
3.2. Иммуноцитохимическое исследование экспрессии антиоксидантов
3.3. Исследование ферментативной активности Си, 2п-ЬОО
4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
4.1. Влияние гипобарической гипоксии на экспрессию тиоредоксина
4.2. Влияние гипобарической гипоксии на экспрессию тиоредоксина
4.3. Влияние гипобарической гипоксии на экспрессию Мп-супероксидцисмутазы
4.4. Влияние гипобарической гипоксии на экспрессию Си, 2п-супероксиддисмутазы

5. ОБСУЖДЕНИЕ

5.1. Эффект тяжелой непрекондиционированной гипоксии на экспрессию
* антиоксидантных белков
5.2. Эффект прекондиционирования на экспрессию антиоксидантных белков после тяжелой гипоксии
5.3. Эффект прекондиционированной и непрекондиционированной тяжелой гипоксии на ферментативную активность Си, 2п-БОО
5.4. Экспрессия белков и экспрессия генов
5.5. Заключение
5. ВЫВОДЫ
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
7. ПРИЛОЖЕНИЕ 1. Сводная таблица результатов
8. ПРИЛОЖЕНИЕ 2. Значения критерия Фишера (Е) и уровня значимости (Р) для оценки статистической достоверности результатов

Список сокращений
АТФ - аденозинтрифосфат
АФК - активные формы кислорода
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ДФИ - дифосфоинозитиды
ИФз- инозитолтрифосфат
мРНК - матричная рибонуклеиновая кислота
НАД - никотинамидаденозиндинуклеотид (окисленный)
НАДФН - никотинамидаденозиндинуклеотидфосфат (восстановленный)
НАДН - никотинамидаденозиндинуклеотид (восстановленный)
ПОЛ - перекисное окисление липидов
РНК - рибонуклеиновая кислота
ТФИ - трифосфоинозитиды
цАМФ - циклический аденозинмонофосфат
ЭПР - эндоплазматический ретикулюм
ANT - adenine nucleotide translocator, аденин-нуклеотидный транслокатор
АР-1 - activator protein-1 (АР-1), активирующий белок 1 (транскрипционный фактор)
ASK1 - apoptosis signal-regulating kinase 1, регулирующая апоптозный сигнал киназа
ВН - Bcl-2 homology domain, Bcl-2-гомологичный домен
СА1, СА2, САЗ - cornu Ammonis, области 1,2 и 3 Аммонова рога гиппокампа
CAD - caspase-activated Dnase, каспазо-активируемая ДНКаза
CARD - caspase recruitment domain
С/EBP - CCAAT/enhancer binding protein

дегенерация нейронов, уже через 4 часа после воздействия отмечается быстрое снижение или даже исчезновение иммунореактивности к Cu, Zn-SOD. В непосредственно прилегающей к ядру зоне на том же сроке в большинстве нейронов также наблюдается снижение иммунореактивности Cu, Zn-SOD, хотя гистопатологическне изменения наблюдаются только в отдельных нейронах. Через сутки после воздействия развитие типичных патологических изменений морфологии нейронов в ишемическом ядре наблюдается на фоне сниженной иммунореактивности к Cu, Zn-SOD. В то же время некоторые нейроны в промежуточной зоне между инфарктным ядром и нормальной тканью, где развитие противоположных про- и антиапоптотических тенденций достигает максимума, некоторые нейроны демонстрируют повышении экспрессии обеих SOD на 3-суточном и 7-суточном сроках (Liu et al., 1994а). В аналогичном исследовании также было показано, что вне зоны интенсивного повреждения нейронов, вызванного фокальной ишемией, выживание нейронов коррелирует с повышением экспрессии Cu, Zn-SOD (Takeuchi et al., 2000). Сходные результаты были плучены и на уровне исследования ферментативной активности: ее значительное повышение отмечалось в промежуточной зоне между инфарктной и нормальной тканью, но не в ишемическом ядре (Toyoda, Lee, 1997).
Таким образом, можно сделать заключение, что подавление Cu, Zn-SOD, особенно на ранних сроках после ишемического инсульта, ведет к развитию нейронального повреждения, в то время как индукция Cu, Zn-SOD, в частности наблюдаемая в модели фокальной ишемии в промежуточной области между нормальной и инфарктной тканью, может рассматриваться как защитный механизм и форма адаптации (Liu et al., 1994а). Впрочем, имеются данные, не вполне согласующиеся с этим представлением (Chan et al., 1993; Fujimuraet al., 2001), и роль Cu, Zn-SOD в защитных механизмах при гипоксических воздействиях требует дальнейшего исследования.