Структурно-функциональная организация белков крови и некоторых других внеклеточных жидкостей рыб

• Автор: Андреева, Алла Михайловна
• Шифр специальности: 03.00.10, 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Борок
• Количество страниц: 271 с. : ил.

Содержание

Введение
Глава 1. Материалы и методы исследований
1.1.Материалы. Объекты исследования
1.1.1.Рыб ы
1.1.2. Белки
1.2. Методы исследований
1.2.1. Постановка внутривидовых и межродовых скрещиваний леща, плотвы и синца
1.2.2. Морфологический анализ потомства от индивидуальных скрещиваний рыб
1.2.3. Отбор проб крови и интерстициальной
жидкости
1.2.4. Электрофоретические методы анализа белков и нуклеиновых кислот
1.2.5. Хроматографические методы анализа белков
1.2.6. Разные методы
1.2.7. Выделение и очистка белков
Глава 2. Внеклеточные белки в раннем развитии рыб
2.1. Литературный обзор
2.2. Результаты исследований
2.2.1. Идентификация белка липовителлина
2.2.2. Липовителлин как резервный, структурный и пластический белок
2.2.3. Определение времени проявления зародышевых генов
2.2.4. Липовителлин как регулятор раннего развития
2.2.4.1. Характер проявления родительских аллелей зародышевых генов с
разным временем экспрессии в раннем развитии гибридов Б] леща,
плотвы и синца
2.2.4.2. Динамика распределения субстратспецифической активности между
изоферментами в ходе развития зародышей рыб
Заключение главы
Глава 3. Принципы структурно-функциональной организации белков крови хрящевых и костных рыб
3.1. Литературный обзор.:
3.2. Результаты исследований
3.2.1.Структурно-функциональная организация альбуминов
3.2.1.1 .Альбуминоподобные белки хрящевых рыб
3.2.1.2. Альбумины хрящевых ганоидов
3.2.1.3. Альбумины костистых рыб
3.2.1.3.1. Роль генетических и негенетических факторов формирования структурного разнообразия альбуминов пресноводных рыб
3.2.1.3.1.1. Сезонные перестройки альбуминов
3.2.1.3.1.2. Универсальный алгоритм структурных трансформаций альбуминов
3.2.1.3.2. Низкомолекулярные фракции морских костистых рыб и видов-вселенцев
3.2.1.4. Сравнительный анализ альбуминов хрящевых и костных рыб
3.2.2. Структурно-функциональная организация глобулинов
3.2.2.1. у-глобулины и а-глобулины
3.2.2.1.1. Глобулины хрящевых ганоидов
3.2.2.1.2. Глобулины костистых рыб
3.2.3. Роль небелковых соединений в создании структурного разнообразия сывороточных белков
3.2.3.1. Липиды и углеводы
3.2.3.1.1. Трансферрины. Роль сиаловых кислот в создании их структурного разнообразия
3.2.4. Сравнительный анализ структурно-функциональной организации белков крови рыб
3.2.4.1. Белки хрящевых и костных рыб
3.2.4.2. Белки пресноводных, солоноватоводных и морских костистых

Заключение главы
Глава 4. Структурно-функциональная организация гемоглобина
4.1. Литературный обзор
4.2. Результаты исследований
4.2.1. Влияние экспериментальных дестабилизирующих факторов, моделирующих действие факторов внутренней и внешней среды на структурно-функциональные показатели гемоглобина
4.2.1.1.Действие мочевины, солей и замораживания на гемоглобин рыб
4.2.1.2.1. Гемоглобины хрящевых морских туводных рыб
4.2.1.3. 2. Гемоглобины хрящевых ганоидов, туводных и проходных
4.2.1.4.3. Гемоглобины костистых морских и пресноводных рыб
4.2.2. Действие длительного голодания на устойчивость гемоглобина
4.3. Роль экологической дифференциации видов в формировании структурнофункциональной разнокачественности гемоглобинов
Заключение главы
Глава 5. Особенности функциональной организации белков плазмы крови рыб. Сывороточные нероксидазы
5.1. Литературный обзор
5.2. Результаты исследований
5.2.1.Белки с пероксидазной активностью у хрящевых рыб
5.2.2. Белки с пероксидазной активностью у хрящевых ганоидов
5.2.3. Белки с пероксидазной активностью у костистых рыб
5.3. Функциональная организация белков плазмы крови у рыб
Заключение главы

Окрашивание липопротеидов (Метод. Пособ. Ботан. Ин-та, 1979): использовали реактивы 3% раствор ТХУ, насыщенный раствор Судана черного Б в этиленгликоле и отмывающий раствор метанол: уксусная кислота: вода (10:1:30).
Ход определения: Зафиксированные раствором ТХУ в течение 30 минут и отмытые водой гели погружали на ночь в раствор Судана черного Б. После отмывки избытка красителя липопротеиды видны в виде темно-коричневых полос на бежевом фоне. Полосы стабильны в течение долгого времени.
Окрашивание железосодержащих белков (Palmour et al., 1971): использовали реактив, содержащий 100 мл воды, 1г гидроксиламина гидрохлорида, 2,7г трехводного ацетата натрия, 1,5мл ледяной уксусной кислоты, 0,5г нитрозо-К-соли (1-гидрокси-2-нитрозонафталин-3,6-дисульфиновая кислота).
Ход определения: гель выдерживали в растворе, приготовленном из вышеперечисленных реагентов, несколько часов. Трансферрин проявлялся в виде зеленых полос. Интенсивность окрашивания можно увеличить, предварительно добавив 5 мкг железоаммониевых квасцов к 1 мл сыворотки крови. Не содержащие железа белки окрашивались в желтовато-коричневый цвет.
Окрашивание неспеиифических сывороточных эстераз (Безруков. 1987). Ход определения: а-нафтилацетат разбавляли до концентрации 1% равным количеством воды и ацетона. 1 мл этого раствора и 100 мг Fast red - TR -соли разбавляли затем в 50 мл воды и смешивали с инкубированным буфером одно- и двухосновного фосфата натрия pH 7,0. Через час зоны неспецифических эстераз обычно достигали максимума интенсивности окраски.
Окрашивание сывороточных пероксидаз (Гааль и др., 1982): окрашивание проводили раствором, содержащим 1г бензидина, 9 мл ледяной уксусной кислоты и 36 мл воды, предварительно смешанным с раствором 45 мл 1%-ной перекиси водорода в воде. Через несколько минут появлялись