Хроматографическое разделение и определение стероидных гормонов, флавоноидов, сапонинов и аминокислот в мицеллярных и циклодекстриновых подвижных фазах

• Автор: Сорокина, Ольга Николаевна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 184 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ

ОБОЗНАЧЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕРОИДНЫХ

ГОРМОНОВ, ФЛАВОНОИДОВ, САПОНИНОВ И АМИНОКИСЛОТ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Общая характеристика исследуемых БАВ

1.2. Нехроматографические методы анализа БАВ

1.3. Хроматографические методы анализа БАВ

1.3.1. Тонкослойная хроматография

1.3.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография

1.3.3. Тонкослойная и высокоэффективная жидкостная хроматография в организованных средах
Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Объекты исследования
2.2. Техника эксперимента в тонкослойной и высокоэффективной жидкостной хроматографии
2.3. Методика хроматографирования. Расчет параметров эффективности и селективности
2.4. Расчет коэффициентов распределения в системах вода -мицелла ПАВ - НФ и вода - циклодекстрин - НФ
2.5. Методики получения водно-спиртовых извлечений биологически активных веществ из лекарственных препаратов синтетического и растительного происхождения, пищевых продуктов
Глава 3. ВЛИЯНИЕ ПРИРОДЫ И КОНЦЕНТРАЦИИ ОРГАНИЧЕСКОГО РАСТВОРИТЕЛЯ НА ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ПОВЕДЕНИЕ СОРБАТОВ

3.1. Тонкослойная хроматография
3.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография
Глава 4. ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ПОВЕДЕНИЕ
ИССЛЕДУЕМЫХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ В МИЦЕЛЛЯРНЫХ ПОДВИЖНЫХ ФАЗАХ .
4.1. Тонкослойная хроматография
4.1.1. Водно-мицеллярные подвижные фазы
4.1.2. Мицеллярные подвижные фазы, модифицированные органическим растворителем и сильным электролитом
4.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография
4.3. Количественные характеристики разделения в МПФ.
Глава 5. ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ПОВЕДЕНИЕ СОРБАТОВ
В ВОДНЫХ ЦИКЛОДЕКСТРИНОВЫХ ПОДВИЖНЫХ ФАЗАХ, МОДИФИЦИРОВАННЫХ ОРГАНИЧЕСКИМИ РАСТВОРИТЕЛЯМИ И ЭЛЕКТРОЛИТАМИ
5.1. Влияние природы и концентрации циклодекстринов
5.2. Совместное влияние циклодекстринов, органических растворителей и сильных электролитов
5.3. Количественные характеристики разделения сорбатов
в циклодекстриновых подвижных фазах
Глава 6. ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДОВ ТСХ
И ВЭЖХ В МОДИФИЦИРОВАННЫХ ПОДВИЖНЫХ ФАЗАХ НА ОСНОВЕ ПАВ И ЦИКЛОДЕКСТРИНОВ
6.1. Определение степени чистоты кортикостероидных гормонов
6.2. Хроматографическое определение прогестерона в лекарственных препаратах «Депо-провера» и «Дюфастон»
6.3. Количественное определение флавоноидов в лекарственных объектах и пищевых продуктах
6.3.1. Определение кверцетина и рутина в лекарственных объектах методом нормально-фазовой тонкослойной хроматографии
6.3.2. Определение кверцетина и рутина методами обращенно-фазовой тонкослойной и высокоэффективной жидкостной

В работе [131] представлены результаты определения кверцетина в моче и в плазме крови человека в изократическом режиме ОФ ВЭЖХ. Твердофазную экстракцию проводили на сорбенте Oasis HLB (степень извлечения более 95%) в колонке типа Luna ODS-2. Внутренним стандартом служил кемпферол. В качестве ПФ использовали смесь ацетонитрила и 1,0-10'4 М водного аммонийноацетатного буферного раствора, содержащего 0,3-10'4 М ЭДТА, в соотношении 29:70:1 и 26:73:1 (рН=3,9). Детектирование осуществляли при 370 нм. Установлено, что градуировочный график линеен в диапазоне 4 - 700 нг/мл для кверцетина в плазме крови и 20 - 100 нг/мл в моче. Нижняя граница определяемых содержаний кверцетина составила 7 нг/мл в плазме крови и 35 нг/мл в моче.
Простая, быстрая и чувствительная методика для определения пяти катехинов в плазме крови человека с использованием двух методов: жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии с автоматической экстракцией в режиме on-line разработана авторами работы [132]. Катехины (производные флавана) в плазме крови определяли методом ВЭЖХ с электрохимическим детектированием, используя колонку с октадецилсиланом. В качестве экстрагента использовали этилацетат. Конъюгаты катехинов в биологическом объекте подвергали ферментативному гидролизу сульфатазой. Установлено, что высоты пиков катехинов линейно растут в диапазоне 2 пкм - 2 нм (Д больше 0,999), предел обнаружения составляет 0,60 - 2,0 нг/мл.
Исследования показали, что идентификация и количественное определение сапонинов в растительном сырье и фитопрепаратах остается сложной аналитической задачей ввиду отсутствия универсальных методик определения, стандартных образцов, наличия в анализируемых объектах большого количества сопутствующих соединений. Авторы [133] применили методы ВЭЖХ и ВЭТСХ в разработке экстракта противодиабетического препарата. Детектирование в ВЭЖХ осуществлялось при длине волны 365 нм на колонке Eclipse SDB С-18 в режиме изократического элюирования системой растворителей: вода - ацетонитрил -