Спектрально-конформативные корреляции в спектроскопии комбинационного рассеяния белков и пептидов в применении к изучению влияния внешних воздействий на их структуру

• Автор: Купцов, А.Х.
• Шифр специальности: 01.04.17
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 180 c. : ил

ГЛАВА I. НЕРЕЗОНАНСНАЯ СПЕКТРОСКОПИЯ КОМБИНАЦИОННОГО

РАССЕЯНИЯ БЕЛКОВ И ПЕПТИДОВ. СОВРЕМЕННОЕ

СОСТОЯНИЕ

1.1. Колебания полипептидной цепи б ежовых молекул

1.2. Колебания боковых цепей

1.3. Изучение пространственной структуры бежо-вых молекул в различных агрегатных состояниях объекта

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И ГЛЕ7Г0ДЫ

ГЛАВА 3. КОЛЕБАНИЯ БОКОВЫХ ЦЕПЕЙ БЕЛКОВЫХ МОЛЕКУЛ. ЗАКОНОМЕРНОСТИ ИЗМЕНЕНИЯ КОЛЕБАНИЙ ДЖУЛЬФВДНЫХ

МОСТИКОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ИХ-КОНФОРМАЦИИ

3.1. Расчеты нормальных колебаний

3.2. Экспериментальное изучение модельных соединений и бежов, в области колебаний дисуль-фидных мостиков
ГЛАВА 4. ПРИМЕНЕНИЕ СПЕКТРОСКОПИИ КР ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ПЕПТИДОВ И БЕЖОВ
4.1. Анализ спектров КР аламина
4.2. Изучение кальций-связывающих бежов на примере кальмодулина и фосфолипаз А2 из различных источников
ГЛАВА 5. ПРИМЕНЕНИЕ СПЕКТРОСКОПИИ КР ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ГАММАОЕЛУЧЕННЫХ РАСТВОРОВ ИНСУЛИНА И АЛЬБУМИНА
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА

Одной из важных проблем химической физики является изучение пространственного строения молекул и его влияния на механизмы и скорости процессов с их участием. В ряду различных физико-химических методов исследования макромолекул, важнейшими из которых, в частности, являются молекулы пептидно-б ежовой природы, лазерная спектроскопия комбинационного рассеяния (КР) зарекомендовала себя за последнее время как один из наиболее информативных оптических методов. В настоящее время спектроскопия КР переживает бурное развитие, связанное как с расширением и усложнением типов изучаемых объектов и систем, так и с развитием новых методических подходов и технических усовершенствований в нерезонансных и резонансных методах спектроскопии КР света. Одной из отличительных черт этого метода, обеспечивших его применимость и большую значимость, является возможность получения и сопоставления спектров в различных агрегатных состояниях вещества: растворах, порошках, кристаллах и т.д. в том числе, что принципиально важно для биологических систем, в интактном состоянии. Это преимущество особенно важно при изучении пространственной структуры белков и пептидов, ее сопоставлении в растворах и кристаллах, цри исследовании влияния воды и растворенных веществ на конформации этих объектов. Достоинством метода при изучении бежов и пептидов является и то, что в их спектрах КР сочетается информация о пространственной упаковке полипептидной цепи и зачастую уникальные
сведения о состоянии и контактах ряда боковых цепей отдельных аминокислотных остатков. Особо следует отметить в этом отношении колебания серусодержащих аминокислотных остатков и дисульфидных мостиков, важную информацию о конфигурации которых можно было

получить только в кристаллическом состоянии образца на основе данных рентгеноструктурного анализа. Это само за себя говорит о том, что такая информация может быть получена не всегда и с большим трудом. Причем решение вопросов о количестве серусодержащих групп, их состоянии и превращениях в процессе функционирования молекул или в интактном состоянии сложных систем до сих пор является сложной цроблемой. Множество различных химических методов определения серусодержащих групп наделено тем принципиальным недостатком, что они связаны с необходимостью реакционного вмешательства. Развитие метода КР-спектроскопии с использованием его возможностей и преимуществ для этих целей становится особо актуальным и сулит заманчивые перспективы. В настоящее время, спектроскопия КР белков и пептидов является мало разработанной в методическом отношении и в плане интерпретации спектров по сравнению с другими традиционными методами оптической спектроскопии, такими как флуоресценция, поглощение, круговой дихроизм и др. Информация, получаемая из анализа спектров КР на основе современных спектрально-структурных корреляций имеет, главным образом, качественный характер, причем не всегда данные авторов различных методических работ (посвященных, в частности, анализу спектров серусодержащих остатков) находятся в согласии, имеется ряд нерешенных вопросов, связанных с возможностью получения количественной информации. В этой связи особую актуальность цриобретают работы, направленные на повышение информативности анализа спектров КР белков и пептидов и расширение возможностей применения метода.
Изучение на основе спектров КР особенностей пространственной структуры белковых молекул в сопоставлении с активностью и их изменений под влиянием различных факторов среды или физических воздействий (УФ-свет, ионизирующие излучения) представляет интеПродолжение таблицы 3
1307 1327
1380 1398
1418 1413,14
1437 1429
1453 1463
1418
1446
1440
1441

1017
1135
1163
939,39
1136,42
1155,55
1021 -
1143 1140
1168 1156
1308 1335
1364
1391
1418 1424,24
запятой разделены частоты симметричного и антисимметричного колебания, причем для краткости записи в значении второй частоты опутцены первые разряды, совпадающие в значениях обеих частот.