Спектрофотометрический метод определения содержания основных производных гемоглобина

• Автор: Мосур, Евгений Юрьевич
• Шифр специальности: 01.04.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Омск
• Количество страниц: 118 с. : ил.

Глава 1. Оптические свойства гемоглобина. Исследование газотранспортных функций эритроцитов по спектрам поглощения (литературный обзор)

1.1. Гемоглобин. Структура, функции, оптические свойства

1.1.1. Строение гемоглобина

1.1.2. Электронные и магнитные свойства гемоглобина

1.1.3. Процесс оксигенации гемоглобина

1.1.4. Оптические свойства гемоглобина

1.2. Методология определения параметров кислородного транспорта крови: кислородного насыщения крови, содержания производных гемоглобина
1.2.1. Параметры, описывающие кислородный транспорт крови; факторы, влияющие на их изменение

1.2.2. Карбоксигемоглобин: патофизиологическое значение,

методы определения концентрации

1.2.3. Метгемоглобин: патофизиологическое значение, методы определения концентрации
1.2.4. Цианметгемоглобин
1.2.5. Нитрозилгемоглобин
1.2.6. Сульфгемоглобин
1.2.7. Методы определения параметров кислородного транспорта крови
Глава 2. Количественный спектрофотомстрический анализ сложных многокомпонентных смесей. Новые аналитические принципы определения содержания основных производных гемоглобина
2.1. Система уравнений Фирордта
2.2. Методы решения переопределенных систем уравнений и их применение к количественному спектрофотометрическому анализу

2.2.1. Метод наименьших квадратов (МНК)
2.2.2. Метод алгебраической коррекции фона (АКФ)
2.2.3. Метод линейного программирования (МЛП)
2.2.4. Объединенные методы, включающие МЛП и АКФ
2.2.5. Сравнение количественных спектрофотометрических методов
2.3. Методология одновременного определения содержания основных производных гемоглобина в крови человека
2.3.1. Особенности количественного спектрофотометрического анализа основных производных гемоглобина
2.3.2. Поверка шкалы оптической плотности спектрофотометра
2.3.3. Выбор аналитических длин волн
2.3.4. Выбор метода количественного анализа основных дериватов гемоглобина. Компьютерная программа "HemoSpectr"
2.3.5. Тестирование метода МЛП+АКФ на многокомпонентных смесях
2.3.6. Методика определения миллимолярных показателей поглощения основных производных гемоглобина
2.3.7. Оценка данных, получаемых при количественном анализе основных производных гемоглобина разработанным методом, с помощью независимых методов
Глава 3. Исследование "in vitro" влияния на газовый состав гемоглобина различных факторов: УФ-излучения, у-излучения, химических веществ
3.1. Методика эксперимента
3.2. Сравнение спектров поглощения цельной крови и ее растворов
3.3. Температурная зависимость спектров поглощения крови
3.4. Анализ основных производных гемоглобина в крови здоровых доноров
3.5. Исследование динамики содержания основных производных гемоглобина при воздействии на кровь различных факторов: оксигенации, моноокиси углерода, окислителя

3.5.1. Оксигенация
3.5.2. Моноокись углерода
3.5.3. Окислитель
3.6. Анализ основных производных гемоглобина в присутствии примеси (сульфгемоглобина)
3.7. Количественный спектрофотометрический анализ основных производных гемоглобина при воздействии УФ-излучения на цельную кровь
3.8. Количественный спектрофотометрический анализ основных производных гемоглобина при воздействии у-излучения на растворы крови
Глава 4. Применение разработанного метода к диагностике патологических состояний с последующим статистическим анализом
4.1. Диагностика сульфгемоглобинемии
4.2. Определение изменений в газовом составе гемоглобина при никотиновой интоксикации
4.3. Количественный анализ нитрозилгемоглобина
4.4. Особенности газового состава гемоглобина у больных дисплазией соединительной ткани
4.5. Особенности газового состава гемоглобина у больных железодефицитной анемией
Выводы
Список цитируемой литературы

£ В,с,.В,.
(2.8)
В итоге получена определенная система линейных алгебраических уравнений, которая может быть решена методом Гаусса с выбором ведущего элемента.
Основным недостатком МНК применительно к поставленной задаче является так называемая проблема отрицательных значений. Решение, полученное с помощью критерия (2.3), может содержать не имеющие физического смысла отрицательные концентрации отдельных компонентов. Появление отрицательных значений концентрации обычно связано с тем, что спектры поглощения отдельных компонентов подобны. Кроме того, отрицательные концентрации появляются в тех случаях, когда матрица молярных показателей поглощения содержит компоненты, которые присутствуют в смеси при низких концентрациях или вообще отсутствуют.
Существует два возможных пути исключения появления отрицательных значений при решении методом наименьших квадратов:
1) использование в качестве критерия оптимального решения суммы
где с/ - отрицательные элементы вектора-столбца концентраций [67];
2) применение итерационного процесса, в соответствии с которым полученные в первом приближении отрицательные значения концентраций приравнивают нулю, соответствующие этим компонентам столбцы вычеркивают из матрицы молярных показателей поглощения и заново решают систему уравнений для уменьшенного числа компонентов [68].
Особенностью МНК, обусловленной его вычислительной схемой, является получение завышенных значений концентрации по сравнению с другими методами решения переопределенных систем уравнений.
(2.9)