Компоненты серотонинергической системы и их функциональная взаимосвязь в раннем развитии моллюсков и костистых рыб

• Автор: Ивашкин, Евгений Геннадьевич
• Шифр специальности: 03.03.01, 03.03.05
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 121 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ГЛАВА 1. ВВЕДЕНИЕ
1.1 Актуальность проблемы
1.2 Цель и задачи исследования
1.3 Научная новизна работы
1.4 Научно-практическая ценность
1.5 Апробация работы
ГЛАВА 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2Л Серотонинергическая система
2ЛЛ Общие сведения о серотонине
2Л.2 Синтез серотонина
2Л.З Метаболизм серотонина
2Л.3.1Метаболизм серотонина у позвоночных животных
2Л.3.2 Метаболизм серотонина у беспозвоночных животных
2Л.З.З Метаболизм серотонина у моллюсков
2Л.3.4 у-глутамил конъюгация и активность трансглутаминаз
2Л.4 Серотониновые транспортеры
2Л.4Л Мембранный серотониновый транспортер
2Л.4.2 Везикулярный моноаминовый транспортер
2Л.5 Рецепторы серотонина
2Л.5Л Типы рецепторов
2Л.5.2 Сигнальные механизмы
2Л.6 Серотонилирование
2.2 Серотонин в раннем развитии

2.2.1 Серотонин в половой систем самок и созревание ооцитов
2.2.1.1 Немертины
2.2.1.2 Полихеты
2.2.1.3 Моллюски
2.2.1.4 Иглокожие
2.2.1.5 Костистые рыбы
2.2.1.6 Амфибии
2.2.1.7 Млекопитающие
2.2.2 Серотонин в зародышах на стадиях дробления и гаструляции
2.2.2.1 Изменение уровня серотонина в клетках зародышей в ходе развития
2.2.2.2 Локализация серотонина в зародышах на ранних стадиях развития
2.2.2.3 Роль серотонина в регуляции процессов дробления и гаструляции
2.2.2.3.1 Первичноротые
2.2.2.3.2 Вторичноротые
ГЛАВА 3. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1 Метод иммуноцитохимического окрашивания
3.2 Метод обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции
3.3 Метод Вестерн блот аначиза
3.4 Трансмиссионная электронная миксроскопия
3.5 In situ гибридизация
3.6 Статистическая обработка

ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4Л 5-НТ в нормальном развитии
4ЛЛ Распределение 5-НТ в дробящихся зародышах мидии
4Л.2 Распределение 5-НТ в дробящихся зародышах
большого прудовика
4Л.З Распределение 5-НТ в дробящихся зародышах данио
4Л.4 Обсуждение
4.2 Синтез и транспорт 5-НТ в клетках дробящихся зародышей
4.2.1 Синтез и транспорт 5-НТ в дробящихся зародышах мидии
4.2.2 Синтез и транспорт 5-НТ в дробящихся зародышах большого прудовика
4.2.3 Выброс 5-НТ из клеток дробящихся зародышей большого прудовика
4.2.4 Синтез и транспорт 5-НТ в дробящихся зародышах данио
4.2.5 Обсуждение
4.3 Экспрессия компонентов серотонинергической системы в развитии данио
4.3.1 Исследование экспрессии компонентов серотонинергической системы на уровне синтеза мРНК
4.3.2 Экспрессия рецептора 5-НТ 1Аа в развитии данио
4.3.3 Обсуждение
4.4 Нарушения развития, вызванные фармакологической модуляцией компонентов серотонинергической системы
4.4.1 5-НТР-индуцированная экзогаструляция у большого прудовика.
4.4.2 Сезонное изменение чувствительности зародышей большого прудовика к 5-НТР

интенсивность наблюдается в желточных гранулах и, в меньшей степени, в липидных каплях и вакуолях. В 2-8 клеточных зародышах было заметно повышение флуоресценции вдоль завершённых борозд дробления. Микроавторадиография после инкубации в [3Н]-меченом предшественнике 5-НТ подтвердило данные, описанные выше. Инкубация в блокаторе моноамиоксидазы (фенилизопропилгидразин) заметно увеличивала количество метки в желточных гранулах. 5-НТ, локализовавшийся вдоль борозд дробления был преимущественно ассоциирован с цитоскелетными элементами. В митохондриях и прочих органеллах было отмечено относительно небольшое количество включения метки. Авторадиография также подтвердила локализацию 5-НТ внутри ядер (Emanuelsson, 1974).
Инъекции [3Н]-меченого предшественника 5-НТ в зародыши курицы и микроавторадиография показали, что на стадиях первичной полоски, головной складки и позднее, метка главным образом локализовалась в желточных гранулах и клеточных ядрах (Emanuelsson et al., 1988).
Также методом флуоресценции в парах формальдегида было показано присутствие 5-НТ в 2-4 клеточных зародышах крысы, причём инкубация в 5-НТ повышала яркость флуоресценции (Burden and Lawrence, 1973).
В ряде более современных работ локализация 5-НТ в ранних зародышах разных животных была исследована с помощью иммуноцитохимии.
Серотонин был обнаружен в клетках зародышей ранее стадии гаструлы и более поздних стадиях развития ряда стрекающих кишечнополостных (Mayorova et al., 2012; 2013; Mayorova and Kosevich, 2013).
У головохордового ланцетника Branchiostoma floridae на стадии гаструлы в эктодерме проксимальнее дорзальной губы бластопора наблюдаются отдельные содержащие 5-НТ клетки (Candiani et al., 2001).
У голожаберного моллюска Tritonia diomedea на стадии зиготы 5-НТ локализуется в цитоплазме в виде пятна в районе анимального полюса. На стадиях 2-х и 4-х бластомеров концентрация 5-НТ повышена на анимальном полюсе и в кортикальном слое бластомеров. На 8-16 бластомерах 5-НТ