Характеристика биологических свойств бактериофагов холерных и парагемолитических вибрионов

• Автор: Гаевская, Наталья Евгеньевна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Волгоград
• Количество страниц: 147 с. : 8 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Бактериофаги патогенных вибрионов и их применение
1.1.1. Бактериофаги холерных вибрионов
1.1.2. Бактериофаги Vibrio parahaemolyticus и Vibrio algi-
nolyticus
1.1.3. Бактериофаги других видов вибрионов (Vibrio
mimicus, Vibrio vulnificus, Vibrio fluvialis, Vibrio metschnikovii)
ГЛАВА2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Материалы
2.1.1. Бактериальные штаммы
2.1.2. Бактериофаги
2.1.3. Сыворотки
2.1.4. Питательные среды
2.2. Методы
2.2.1. Методы выделения фагов из культур патогенных
вибрионов
2.2.2. Метод выделения фагов из проб воды поверхностных водоёмов и сточных вод
2.2.3. Метод размножения бактериофагов
2.2.4. Метод получения антифаговой сыворотки
2.2.5. Метод изучения серологических свойств бактериофагов
2.2.6. Изучение морфологии негативных колоний
2.2.7.. Изучение строения корпускул фага
2.2.8. Метод изучения диапазона литической активности и

специфичности фагов
2.2.9. Метод изучения одиночного цикла развития фага
2.2.10. Методы определения устойчивости фагов патогенных бактерий к воздействию различных факторов
2.2.11. Метод фаготипирования холерных и парагемолити-ческих вибрионов
2.2.12. Методы статистической обработки результатов
ГЛАВАЗ. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ
СВОЙСТВ БАКТЕРИОФАГОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ
ТОКСИГЕННЫХ И АТОКСИГЕННЫХ ШТАММОВ
ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ 01 СЕРОГРУППЫ
3.1. Поиск штаммов-продуцентов фагов среди холерных вибрионов классического биовара и характеристика продуцируемых бактериофагов
3.2. Умеренные фаги, выделенные из атоксигенных
штаммов холерных вибрионов биовара эльтор, изолированных от людей
3.3. Литическая активность холерных бактериофагов
эльтор в отношении холерных вибрионов 01 и 0139 серогрупп
3.3.1. Сравнение свойств холерных бактериофагов с фагами Vibrio mimicus
3.4 Применение набора индикаторных штаммов для выделения бактериофагов холерных вибрионов из водных объектов города Ростова-на-Дону
ГЛАВА4. БАКТЕРИОФАГИ VIBRIO CHOLERAE 0139 СЕРОГРУППЫ
4.1. Выявление спонтанной фагопродукции у штаммов V. cholerae 0139 на новых индикаторных штаммах
01 и 0139 серогрупп

4.2. Внутривидовая дифференциация штаммов
V. сіюіегае 0139 серогруппы фаговыми методами
ГЛАВА 5. БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БАКТЕРИОФАГОВ ПАРАГЕМОЛИТИЧЕСКИХ ВИБРИОНОВ
5.1. Изучение биологических свойств фагов парагемоли-тических вибрионов различного происхождения
5.2. Способ дифференциации бактериофагов парагемо-литических вибрионов различных морфогрупп
5.3. Усовершенствование схемы фаготипирование V. рагакаетоіуйст
ГЛАВА6. РАЗРАБОТКА СХЕМЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ БАКТЕРИОФАГОВ ХОЛЕРНЫХ И
ПАРАГЕМОЛИТИЧЕСКИХ ВИБРИОНОВ
6.1. Критерии первичной характеристики бактериофагов
при их идентификации
6.2. Дифференциация бактериофагов холерных и па-рагемолитических вибрионов
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ферментации углеводов он относится к I или III группам Хейберга, а V. ра-rahaemolyticus к V или VII. Эти микроорганизмы можно также дифференцировать по способности роиться на 1%-ном агаре и образовывать ацетилме-тилкарбинол. Названные виды галофильных вибрионов хорошо растут при температуре 37 °С и 42 °С.
Патогенность V. parahaemolyticus связана со способностью продуцировать гемолизин, обладающий энтеротоксигенными свойствами, который является маркером патогенных штаммов V parahaemolyticus (феномен Kanaga-wa) (Kaper J.B. et al., 1984). Более 95% культур, связанных с заболеваниями человека, Kanagawa-положительны. Но данный тест не может быть единственным критерием оценки вирулентности (Шалу О.А. с соавт., 2010). Это связано с тем, что в нем не выявляются ключевые факторы патогенности, которыми являются прямой термостабильный (TDH - thermostable direct hemolysin) и родственный ему (TRH - TDH-related hemolysin) гемолизины (Hayashi S. et al., 2006).
В результате изучения 2720 культур V. parahaemolyticus, выделенных от больных людей, была разработана серологическая классификация, основанная на строении О- и К-антигенов (Sakazaki R., 1968). В СССР изучение галофильных вибрионов было начато в 1972 г. специалистами Ростовского-на-Дону противочумного института и Новороссийской противочумной станции (Либинзон А.Е. с соавт., 1984).
В настоящее время идентифицированы 13 О-серотипов и 75 К-серотипов (Iida Т., 2001). За период с 1995 г. появились и распространились по всему миру новые вирулентные штаммы V parahaemolyticus (Nishioka Т. et al., 2008). Наибольшее распространение получил серотип 03:К6 (Okuda J. et al., 1997; Matsumoto С. et al., 2000; Daniels N.A., 2000; WHO, 1999). Серотип 03:K6 был впервые выделен в 1996 г. в Индии и с тех пор данный серотип обнаруживают в странах Юго-Восточной Азии, Японии, США (Okuda J. et al., 1997; Matsumoto С. et al., 2000; Daniels N.A., 2000). В 1996-2000 годах парагемолитические вибрионы серогруппы ОЗ.’Кб явились причиной вспы-