Применение спектрофотометрии для диагностики лейкоза крупного рогатого скота

• Автор: Божко, Сергей Петрович
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Омск
• Количество страниц: 106 с.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Сущность лейкоза крупного рогатого скота
1.2. Источники, ПУТИ И ФАКТОРЫ, СПОСОБСТВУЮЩИЕ РАСПРОСТРАНЕНИЮ ГЕМОБЛАСТОЗОВ
КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
1.3 ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ ЛЕЙКОЗА
КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
1.4 КОНФОРМАЦИОННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ КРОВИ
ПОД ВЛИЯНИЕМ РАЗЛИЧНОГО МИКРООКРУЖЕНИЯ
1.5 Влияние температуры на физико-химические
СВОЙСТВА ВОДНЫХ РАСТВОРОВ ГЕМОГЛОБИНА КРОВИ
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы и методы исследований
2.2. Разработка методологических подходов использования спектрофотометрии для диагностики лейкоза
2.2.1. Подбор оптимальных разведений гемолизата крови крупного рогатого скота для спектрофотометрии
2.2.2. Показатели коэффициентов поглощения спектра гемолизата крови от РИД - позитивных и
больных лейкозом коров
2.2.3. Сравнительное изучение спектров гемолизата крови
коров при лейкозе и маститах разных форм
2.2.4. Изучение влияния времени и разных температур на результаты исследования проб крови от
РИД - позитивных и больных лейкозом животных

2.3. Сравнительная оценка эффективности традиционного и предлагаемого методов диагностики лейкоза крупного рогатого скота в хозяйствах Омской области
ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность работы. Лейкоз является одной из наиболее распространенных инфекционных болезней крупного рогатого скота. Изучению эпизоотической ситуации по данной болезни в разных регионах России, в том числе и в областях Западной Сибири, посвящено значительное число публикаций (А.Ф. Валихов, В.П. Шишков, Л.Г. Бурба 1980; В.М. Нахман-сон, 1986; П.Н. Смирнов, 1989, 1991, 1996; А.Т. Левашов, 1994; А.Г. Неза-витин, 1995; В.И. Околелов, Ю.С. Притужалов, 1995; B.C. Федоров, 1996 и
др.).
С момента открытия вируса лейкоза крупного рогатого скота (Miller J. et al., 1969) и до настоящего времени получено довольно много данных, касающихся характеристики возбудителя: по морфологии, биохимии, кон-тагиозности и другим свойствам (Л.Г. Бурба, 1977; В.Г. Шишков, 1979; В.А. Бусол, 1982; В.М. Нахмансон, 1986; П.Н. Смирнов, 1987; Г.Ф. Коро-мыслов, 1989; В.В. Смирнова, 1992 и др.). Разработаны и апробированы клинико-морфологические и иммунологические методы диагностики, в том числе реакция иммунодиффузии (РИД) в агаровом геле, которая включена в методические рекомендации по диагностики лейкоза крупного рогатого скота (1985), радиоиммунный (РИА) и иммунофлюоресцентный (МФА) анализ (K.M. Jacobson et al., 1985; 1988; В.Г. Арутюнян, 1992; A.B. Киселев 1992; D.R. Monke et al., 1992).
В настоящее время широко применяется гематологический метод диагностики лейкоза, включающий в себя несколько этапов: подсчет лейкоцитов в камере Горяева, изготовление мазков крови, их окраска и дифференциальный подсчет лимфоцитов, выведение лейкоформулы по «лейкоз-ному ключу». Данный метод диагностики лейкоза крупного рогатого скота требует от врача - гематолога определенных знаний и навыков, все манипуляции довольно продолжительны. К этому следует добавить, что пока еще недостаточно полно изучены вопросы, касающиеся качественного из-

тически возбужденной молекуле порфирина и переход последней в ион-радикальное соединение. На второй стадии восстановления, определяемой кислотно-основными свойствами среды, происходит перенос протона. При низких температурах, когда затормаживается реакция переноса протона, наблюдается лишь перенос электрона.
Факт миграции энергии в гемопротеидах был обнаружен О. Warburg, Е. Negelein (1928, 1929). Авторы измерили спектр действия фотохимического расщепления комплекса цитохромоксидазы с окисью углерода. В этом спектре появлялись большие максимумы при 280 нм.
Эффективность переноса энергии в пределах молекулы феррицихро-ма С зависит от взаимной ориентации и относительного расстояния между триптофаном-59 и гемином (Т. Y. Tsong 1976). Геминовая группа, как показал автор, тушит флюоресценцию данной ароматической аминокислоты. Это подтверждают результаты опытов Е. Veber, F. J. W. Teale (1959), которые сообщили об увеличении выхода ультрафиолетовой флюоресценции триптофановых остатков цитохрома С последующим удалением гема из молекулы фермента.
Рентгеноструктурные исследования позволили выяснить, что присоединение кислорода к гемоглобину может вызвать перемещение атома железа внутри молекулы белка (М. Перутц, 1966; М. F. Perutz, 1970).
Фотоокисление порфирина IX синглетным кислородом происходит по винильным группам и гидроксиальдегиду в положениях 1, 4 (Н. Н. 1п-hoffen et al., 1969). И. М. Бытева и др. (1975) предложили схему реакции фотоокисления мезо- и протопорфиринов для случая, когда концентрация порфиринов невелика и интенсивность света небольшая, т. е. в этих условиях, по мнению авторов, можно не учитывать взаимодействия возбужденных молекул.
Фотоокисление пигмента по этой схеме является сенсибилизированным процессом: энергия света идет на образование синглетного возбуж-